天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及逆转syk基因甲基化的研究

目的:研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和诱导细胞凋亡过程中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,syk)基因甲基化状态的改变,以寻找新的去甲基化药物。方法:采用MTT法分析TCS对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Giemsa染色法观察TCS作用后细胞形态学的变化,FCM检测不同浓度TCS作用48h后MDA-MB-231细胞凋亡和细胞周期分布情况,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测MDA-MB-231细胞经TCS作用前后syk基因甲基化状态的改变,RT-PCR方法分析TCS作用后MDA-MB-231细胞中syk、Dnmts和MBD2 mRNA表达量的变化,比色法检测TCS对MDA-MB-231细胞DNA甲基转移酶活性的影响。结果:TCS体外对MDA-MB-231细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性;TCS可诱导MDA-MB-231细胞出现空泡样变性、核固缩和核碎裂等细胞凋亡形态学改变,能使MDA-MB-231细胞凋亡并可诱导细胞生长周期阻滞,凋亡率明显高于对照组(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性。TCS可以逆转MDA-MB-231细胞syk基因启动子区甲基化状况;MDA-MB-231细胞syk mRNA表达阴性,经TCS作用后,syk mRNA表达阳性;MDA-MB-231细胞经TCS作用48h前后Dnmts和MBD2 mRNA表达量没有明显变化(P>0.05),但Dnmts活性降低。结论:TCS在抑制MDA-MB-231细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中对syk基因具有明显的去甲基化作用,因而可能成为新型的去甲基化药物。

赞皇县胃癌与饮水关系的研究概况

采用问卷调查、致癌物质检测和致突变性研究等方法探讨了赞皇县胃癌高发区饮水与胃癌发生的可能关系。发现高发区居民饮用河水和饮用生水习惯者多 ;当地居民饮水中可检出苯并芘、亚硝胺、黄曲霉毒素B1、G1 的污染 ;赞皇县胃癌高发区和相对低发区饮水微量元素含量存在明显差别 ;赞皇县饮用水硝酸盐、亚硝酸盐含量显著高于河北省内胃癌低发区赤城(P<0.05) ;微核实验结果表明赞皇县胃癌高发区浓缩饮水水样具有致突变性 。

食管胃交界腺癌和远端胃癌KLF4 SP1及Cyclin D1表达的对比研究

目的:近些年研究发现胃食管交界腺癌的发生率较远端胃癌明显升高,但其发生机制目前并不清楚,本研究通过对比观察KLF4、SP1和Cyclin D1在食管胃交界腺癌和远端胃癌表达的差异,探讨食管胃交界腺癌发生的可能机制。方法:采用免疫组织化学染色法对比观察58例食管胃交界腺癌和47例远端胃癌组织中KLF4、SP1和Cyclin D1在蛋白水平上的表达差异以及与淋巴结转移的关系。结果:KLF4在远端胃癌组中的阳性表达率明显低于食管胃交界腺癌组(P<0.05);而且远端胃癌高中分化组和低分化组中KLF4的阳性表达率均明显低于相应食管胃交界腺癌组(P<0.05)。SP1在远端胃癌组中的阳性表达率明显高于食管胃交界腺癌组(P<0.05);而且远端胃癌高中分化组中SP1的阳性表达率均明显高于相应食管胃交界腺癌组(P<0.05)。Cyclin D1在食管胃交界腺癌组和远端胃癌组中的阳性表达率未见明显差异。进一步观察KLF4、SP1和Cyclin D1与淋巴结转移的关系,结果发现Cyclin D1的高表达与食管胃交界腺癌淋巴结转移有关;而KLF4、SP1和Cyclin D1的表达异常均与远端胃癌淋巴结转移有关。相关性分析结果显示在食管胃交界腺癌中KLF4与SP1和Cyclin D1之间未见明显相关关系;而在远端胃癌中KLF4与SP1以及KLF4与Cyclin D1(r=-0.334,r=-0.341,P<0.05)之间呈负相关;SP1与Cyclin D1之间呈正相关(r=0.340,P<0.05)。结论:食管胃交界腺癌和远端胃癌组织KLF4、SP1和Cyclin D1的表达和临床病理意义均存在一定差异,提示两种肿瘤在发生发展方面可能有所不同。

赞皇县胃癌筛查方法研究简介

以放射免疫学方法对赞皇县胃癌高发区1504名成年居民血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ、Ⅱ和胃泌素(GAS)水平进行了定量分析,同时以ELISA方法对血清幽门螺杆菌(Hp)抗体进行了检测。研究结果发现农村居民血清PGⅠ、PGⅡ和GAS均明显偏离正态分布。赞皇县农村成年居民Hp感染均比较普遍 ,血清Hp抗体阳性率达到66.4%。内窥镜和病理学检查证实,血清PG异常居民的胃粘膜91%以上可见癌前病变。提示血清PG异常的居民是胃癌的高危人群。

涎腺腺样囊性癌c─erbB─2癌基因蛋白的研究

采用ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因蛋白抗体，对３４例涎腺腺样囊性癌（包括筛孔型、管状型、实性型）进行免疫组化染色。结果显示：涎腺腺样囊性癌３种组织学类型均过度表达ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因。经统计学分析表明，筛孔型与管状型涎腺腺样囊性癌的ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因表达差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。提示ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因的过度表达与肿瘤的分化及恶性程度关系密切。

手术切除联合ALA-PDT治疗Fisher大鼠9L胶质瘤的实验研究

目的观察手术切除联合ALA-PDT治疗Fisher344大鼠9L脑胶质瘤的效果并探讨其作用机制。方法32只Fisher344大鼠颅内种植9L脑胶质瘤细胞7d后,随机分为对照组(未治疗)、手术组(近全切除颅内肿瘤)、PDT组(5-ALA300mg/kg,激光能量密度80J/cm2)和联合治疗组(手术切除+PDT),每组8只鼠。治疗后7d处死所有动物并取出脑组织,常规石蜡包埋切片,HE染色分析肿瘤体积和浸润瘤灶,以Ki67免疫组化染色和TUNEL染色方法分别分析胶质瘤细胞的增殖和凋亡。结果与对照组比较,手术组和PDT组的肿瘤体积明显减小。与手术组和PDT组相比,联合治疗既能缩小肿瘤体积又可以减少浸润瘤灶。无论是否联合手术,PDT均能增加凋亡的肿瘤细胞数,单纯手术对凋亡的肿瘤细胞无影响。各组之间肿瘤细胞的增殖(Ki67阳性表达率)无显著性差异。结论PDT通过增加凋亡的肿瘤细胞数,杀灭浸润的肿瘤病灶,提高手术的治疗效果。

河北省赞皇县胃癌高发区和相对低发区居民饮食问卷调查

以随机抽样问卷调查方法，就家庭经济情况、饮食习惯、营养状况、家族史等方面的２１７项子内容对河北省赞皇县境内胃癌高发区和相对低发区１１０１名３０岁以上居民进行了对比分析。结果发现，赞皇县胃癌高发区居民年均收入较相对低发区低，调查对象有胃癌及胃溃疡家族史者明显高于相对低发区；高发区男性居民有吸烟习惯者达６９７％，明显高于相对低发区（４５８％）；高发区男性居民喜食热烫食物和缺乏营养平衡意识的比率明显高于相对低发区。

工频均匀强磁场促进体外培养SNU细胞凋亡及其相关机理的研究

观察50Hz工频均匀强磁场(0.097T)对人低分化胃腺癌细胞株-SNU细胞凋亡的影响,并通过检测Bax、Bcl-2和Caspase-3三种蛋白表达的变化探讨其可能机制。体外培养SNU细胞,给予50Hz工频均匀强磁场(0.097T)处理后应用流式细胞定量检测和透射电镜超微结构观察,研究该磁场对SNU细胞凋亡的影响,并应用流式细胞定量检测、免疫细胞化学染色和蛋白免疫印迹相结合的方法,检测三种凋亡相关蛋白的表达。给予工频均匀强磁场处理后SNU细胞的凋亡率明显升高,此外,SNU细胞内Bax和Caspase-3蛋白的表达量随处理时间延长逐渐增加,而给予磁场处理后Bcl-2蛋白的表达量随处理时间延长逐渐下降。工频均匀强磁场处理可以促进体外培养SNU细胞凋亡,其可能机理为上调Bax和Caspase-3蛋白的表达,下调Bcl-2蛋白的表达。

赭曲霉毒素A致癌机制研究进展

赭曲霉毒素A（ochratoxin A,OTA）是一种主要由纯绿青霉、碳黑曲霉和赭曲霉产生的真菌毒素,广泛存在于食品、农产品和动物饲料中,因此OTA与人类健康的关系备受关注。研究发现,OTA具有肾毒性、肝毒性、神经毒性、免疫毒性和致畸性[1]。

河北省赞皇县胃癌高发区和相对低发区居民饮水水质和饮水习惯的对比分析

为进一步探讨赞皇县胃癌高发区饮水与胃癌发生的关系，分别以水源类型和饮水习惯的问卷调查、饮用水源水质分析方法对赞皇县癌高发区和相对低发区（胃癌年均死亡率分别为１０５～１２６／１０万和３６．３／１０万）进行对比研究。结果发现，赞皇县胃癌高发区居民饮用河水及饮生水习惯者均明显高于相对低发区。饮水水源水质分析结果表明，两地饮水微生物检出率均明显超标。高发区饮水在硬度、镁、氟、钠、ＮＯ－３、硝酸盐和亚硝酸盐的含量上均明显低于相对低发区。两地饮水水源中农药残留均未超标。

一氧化氮与肺纤维化的研究进展

肺纤维化是一组由多种因素引起的肺间质性病变,肺纤维化的发病机制迄今尚未完全清楚。近年来,发现在哺乳动物细胞的一氧化氮合酶催化合成的一氧化氮在肺纤维化的发生发展中发挥着重要的作用。因此,阐述一氧化氮与肺纤维化的关系,有着重要的理论意义和潜在的临床应用价值。

流式细胞术在细胞凋亡研究中的应用

细胞凋亡是目前生物学领域研究热点之一。流式细胞术(FCM)以其快速、灵敏、客观、定量、多参数和活体细胞分析的特点,在细胞凋亡研究中的应用日趋广泛。本文综述了近年来FCM检测细胞凋亡的一些常用方法,如光散射法、荧光染料染色法、细胞DNA含量分析等,并简单回顾了FCM在细胞凋亡研究中的应用情况。

铝致大鼠骨软化的研究

铝致大鼠骨软化的研究王松鹤，张义国，王晓红，云天佐，苏有才中国有色金属工业总公司资助课题河北医科大学职业病理研究室（石家庄０５００３１）近年来，国外一些文献［１－３］制备透析液的水含有铝是引起透析骨软化的原因。Ｅｌｌｉｓ等给大鼠腹腔内长期注铝，发现铝...

血清胃蛋白酶原异常居民胃粘膜变化的随访观察

目的 :探讨血清胃蛋白酶原 (PG)水平变化与我国胃癌高发区居民胃癌发生的关系及PG异常在人群胃癌筛查中的价值。方法 :在对赞皇县 15 0 4名农村居民进行血清PG和HP抗体检测的基础上 ,对受检居民进行了随访 ,并分析了受检后 16～ 30个月胃粘膜病理形态学变化。结果 :赞皇县居民血清PG水平具有明显的性别差异 ,男性居民PGⅠ、PGⅡ和PGⅠ /PGⅡ比值明显高于女性居民 ,但男女居民中血清PG异常者检出率无明显差异(11.7%∶9.6 % ,P >0 .0 5 )。随访期内PG异常居民胃癌死亡率 (0 .6 4% )高于正常居民 (0 .0 0 7% ) ,但统计学意义不明显。血清PG异常组居民胃粘膜腺体萎缩和腺上皮不典型增生的发生率均达到 70 %以上 ,肠上皮化生的发生率也超过 5 0 % ,明显高于血清PG正常居民 (P <0 .0 1)。血清PG异常伴HP抗体阳性者腺体萎缩、肠上皮化生及腺上皮不典型增生发生率均明显高于HP抗体阴性者。结论 :血清PG异常居民胃粘膜多有明显的癌前病变 ,是胃癌的高危人群。

胃癌高发区农村居民血清胃蛋白酶原和胃泌素分析

目的 为探讨我国胃癌高发区农村成年居民血清胃蛋白酶原Ⅰ (PepsinogenⅠ ,PGⅠ )、胃蛋白酶原Ⅱ (PGⅡ )和胃泌素 (Gastrin ,GAS)水平和分布规律。方法 以放射免疫学方法对赞皇县 15 0 4名 30岁以上居民血清PGⅠ、PGⅡ和GAS水平进行了定量分析。结果 赞皇县居民血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ /PGⅡ比值和GAS值变异范围非常大 ,明显偏离正态分布 ,其中位值分别为 5 6 30 μg/L、12 5 0 μg/L、4 6和 72 0 0pg/ml。男性居民血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ /PGⅡ比值 (6 4 90 μg/L、13 80 μg/L、4 85 )均明显高于女性居民 (49 95 μg/L、11 5 5 μg/L、4 4 0 ;P均 <0 0 0 0 1) ,而男女居民血清GAS水平无明显差异。不同年龄组居民血清PGⅠ、PGⅡ水平有一定差异 ,但PGⅠ /PGⅡ比值差异不明显。结论 赞皇县农村成年居民血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ /PGⅡ和GAS值明显偏离正态分布。血清PG水平有显著性别差异。

杂色曲霉素对小鼠穹窿下器室管膜细胞超微结构的影响

目的:观察杂色曲霉素(ST)对小鼠穹隆下器(SFO)室管膜细胞超微结构的影响。方法:BALB／c小鼠,单次ST(3000 μg/kg) 灌胃,分别于灌胃后1、2、4、8、16 h处死动物,用扫描电镜观察SFO室管膜的结构变化。结果:ST灌胃后1 h部分SFO室管膜表面微绒毛结构消失、细胞破损,ST灌胃后2 h室管膜出现凹凸不平、损伤加重,ST灌胃后8 h室管膜凹凸不平和破损最为明显, ST灌胃后16 h逐渐恢复。结论:提示ST对小鼠SFO室管膜细胞有明显的损伤作用。

杂色曲霉素灌胃对小鼠外侧隐窝超微结构的影响

目的:观察杂色曲霉素(ST)对小鼠第四脑室外侧隐窝室管膜细胞结构的影响。方法:BALB/c小鼠,单次ST灌胃,分别于灌胃后1～16d处死动物,用扫描电镜观察外侧隐窝室管膜的结构变化。结果:ST灌胃后1h和2h组外侧隐窝处室管膜的纤毛稀少、粘连、倒伏;4h和8h组纤毛粘连和倒伏更加明显,并出现室管膜细胞的破损和分泌颗粒;16h组纤毛粘连变轻,纤毛数量和形态逐渐恢复到正常,分泌颗粒少见。结论:提示ST对小鼠外侧隐窝室管膜细胞有明显的损伤作用。

脑组织核因子-κB激活对实验性变态反应性脑脊髓炎的作用

为探讨脑组织核因子 κB(NF κB)对实验性变态反应性脑脊髓炎 (EAE)的作用 ,分别用凝胶电泳迁移分析和NF κBp65免疫组化方法测定了CFA GPSCH诱导大鼠EAE 1、7、14和 2 1d时脑组织NF κB活性和蛋白表达的动态变化 ,并观察了这些变化与EAE症状之间的关系。结果显示 :对照组大鼠脑组织仅有少量NF κB蛋白表达 ,其活性也很低 ;诱导EAE后 ,伴随着大鼠EAE症状及脑组织病理损伤的出现和进行性加重 ,其NF κB活性和蛋白表达量逐渐增高 ;在免疫后 14d达到高峰 ,NF κB阳性细胞主要位于脉络丛、穹隆下器、血管“套袖样”病灶的周围 ,与EAE病变部位一致 ,此时大鼠EAE发病率最高、病情最重、体重减轻最显著、脑组织病理改变也最明显 ;2 1d脑组织NF κB活性和蛋白表达量逐渐下降 ,大鼠EAE症状也逐渐恢复。应用NF κB特异性抑制剂PDTC以抑制脑内NF κB蛋白表达后 ,大鼠EAE症状和脑组织损伤明显减轻 ,说明脑组织NF κB的动态变化与EAE症状及脑组织损伤程度密切相关。结论 :脑组织NF κB的激活对EAE的发病起着关键的作用 ,应用NF κB抑制剂可能是防治该病的有效方法之一。