脑脊液途径移植神经干细胞治疗中枢神经系统疾病的研究现状

背景:目前报道的用于神经干细胞移植的途径主要有经局部病变部位途径、经血液循环途径及经脑脊液循环途径3种。目的:综述经脑脊液途径移植神经干细胞或神经前体细胞的方式及其在治疗中枢神经系统疾病中的应用。方法:检索Pubmed数据库和CHKD全文数据库2000至2009年相关文献,叙述脑脊液途径移植神经干细胞的方法、在动物实验和临床方面治疗中枢神经系统疾病的应用及治疗机制。结果与结论:脑脊液适宜神经干细胞的存活、增殖、分化,经脑脊液途径移植神经干细胞治疗中枢神经系统疾病是一种有效可行的方法。但因神经干细胞的来源问题及治疗的机制、最佳时间窗和数量、安全性等诸多问题,仍需更深更广的研究,从而为蛛网膜下腔注射神经干细胞治疗中枢神经系统疾病奠定坚实的基础。

MPP^+对原代培养SAMP8小鼠中脑神经元的毒性作用

目的:建立MPP+(1-甲基-4-苯基吡啶离子)干预SAMP8(快速老化小鼠P8)小鼠中脑神经元的体外细胞模型。方法:SAMP8新生1 d小鼠的中脑神经元原代混合培养6 d,加入100μmol/L浓度的MPP+,再培养6、9、12 h和24 h后分别对各时间点的中脑原代培养神经元免疫荧光染色或提取蛋白测定TH水平。结果:MPP+导致原代培养的SAMP8小鼠中脑神经元形态学改变。正常对照组神经元形态完整,免疫反应性强,胞体大呈椭圆形,突起多而长且粗壮;MPP+组神经元随时间逐渐出现形态变化,MPP+后6 h即可见突起不完整断续,9 h突起数目减少,缩短;12 h神经元胞体明显变小,24 h突起多消失,神经元胞体小且免疫反应性弱。MPP+导致原代培养的SAMP8小鼠中脑神经元数量在MPP+后9 h开始有显著减少,同时TH蛋白的表达也开始有显著减少,24 h最低。结论:MPP+对原代培养的SAMP8小鼠中脑神经元具有毒性作用。MPP+导致SAMP8小鼠中脑神经元原代混合培养体系的神经元数量下降,同时TH蛋白表达降低,提示MPP+导致其中脑DA能神经元损伤死亡。

MPTP对快速老化小鼠黑质纹状体系统的急性损害及小胶质细胞的激活

目的:探讨MPTP(1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶)对快速老化小鼠(senescence accelerated mouse prone8,SAMP-8)黑质纹状体系统的急性损害及小胶质细胞激活与损害的关系。方法:57只健康雄性12周龄SAMP8小鼠,随机分为生理盐水对照组和MPTP组,每组再分别于第1次给药后6h、24h、3d和8d四个时间点处死小鼠,每个时间点6～9只。SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP20mg·kg-1,1次/2h,注射4次,观察各时间点小鼠的自主活动;免疫组织化学染色检测各时间点黑质TH+神经元数量、纹状体TH免疫反应性及小胶质细胞的状态;HPLC技术检测纹状体DA含量。结果:第3次注射后小鼠出现明显活动减少,并于第1次给药后48h恢复近正常水平。与对照组相比:MPTP组黑质TH+神经元数目于第1次注射后6h、24h、3d、8d分别减少7.06%(P=0.235)、12.79%(P<0.05)、22.49%(P<0.01)、42.39%(P<0.001),两个时间点之间比较3d与8d有统计学差异(P<0.05);与对照组相比,MPTP组纹状体TH免疫反应性(COD值)减低,6h(P<0.05)、24h(P<0.01)、3d(P<0.001)、8d(P<0.001),两个时间点之间比较24h与3d比较差异有统计学意义(P<0.05);纹状体多巴胺含量6h降低79.09%(P<0.001),24h降低80.3%(P<0.001),3d降低86.6%(P<0.001),8d降低81.0%(P<0.001),但24h、3d、8d比较无统计学差异。纹状体小胶质细胞于给药后24h免疫反应性明显增强,3d明显激活,8d激活现象明显回落。结论:MPTP可导致SAMP8小鼠黑质纹状体系统的急性损害,出现自主活动减少、黑质多巴胺能神经元减少及纹状体多巴胺能纤维脱失,多巴胺含量降低;小胶质细胞激活可能与MPTP-SAMP8小鼠的黑质纹状体系统损伤有关。

1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶致快速老化小鼠模型黑质纹状体系统的形态学改变

目的探讨1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)导致快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体系统的形态学改变。方法24只健康雄性12周龄SAMP8小鼠,随机分为盐水对照组和MPTP组,分别于第一次给药后6、24h、3和8d4个时间点处死小鼠,每个时间点3只;背部皮下注射MPTP20mg/kg,每2h一次,注射4次。用免疫组织化学染色技术检测各时间点黒质酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元形态及数量、纹状体TH免疫反应性及黑质区尼氏染色检测神经元状态。结果MPTP组和对照组比较:黑质TH阳性神经元数目于第1次注射后6、24h、3、8d分别减少7.06%(P>0.05),12.79%(P<0.05),22.49%(P<0.01),42.39%(P<0.001),其中3d和8d比较有显著差异(P<0.01);纹状体TH免疫反应性(COD值)减低,6h(P<0.05),24h(P<0.01),3d(P<0.001),8d(P<0.001),其中24h与3d比较差异显著(P<0.05);尼氏染色可见对照组细胞多,形态完整,胞核饱满,核仁清晰,尼氏体丰富。MPTP注射后逐渐出现细胞胞核固缩,核仁模糊不清,胞体及胞核形态不规则,崩解,细胞稀疏,残存的细胞周围可见大量细胞碎片。结论MPTP可导致SAMP8小鼠黑质多巴胺(DA)能神经元减少及纹状体DA能纤维丢失等帕金森样病理改变。

经颅超声技术在抑郁症及神经变性疾病伴抑郁中的应用

本文目的是对经颅超声技术(TCS)在抑郁症及神经变性疾病伴抑郁中的应用进行综述,以期为抑郁症及神经变性疾病伴抑郁的临床诊断提供新的方向。TCS在抑郁症患者可表现中缝低回声,在神经变性疾病伴抑郁患者中也出现了特异性表现。本文对TCS在抑郁症及神经变性疾病伴抑郁中的应用进行探讨。

MPTP处理的SAMP8小鼠黑质纹状体损伤中血红素加氧酶-1的表达变化

目的:研究1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(MPTP)诱导6月龄快速老化小鼠(SAMP8)黑质纹状体急性损伤,以及血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化,探讨其与MPTP导致的SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害的关系。方法:给6月龄健康雄性SAMP8小鼠背部皮下注射MPTP 20mg/(kg.次),连续注射4次,每次间隔2 h;对照组注射等量生理盐水。在注射后6 h、24 h、3 d和8 d处死小鼠留取脑组织标本,用免疫组织化学技术检测小鼠黑质、纹状体的酪氨酸羟化酶(TH)和HO-1,以计数黑质多巴胺能神经元数量及其投射纤维的改变,及HO-1阳性细胞的变化;用Westernblot方法检测TH和HO-1蛋白表达的变化。结果:MPTP致6月龄SAMP8小鼠各时间点TH阳性神经元分别减少14.23%(P<0.05),23.85%(P<0.01),36.77%(P<0.01),45.9%(P<0.01),24 h与3 d比较有显著性差异(P<0.05),神经元的丢失以24 h至3 d最为显著;MPTP组随时间延长纹状体区酪氨酸羟化酶免疫反应阳性染色逐渐变浅淡,不均匀,于注射后24 h明显,第8天最为浅淡;同时TH蛋白表达具有相同变化。但仅在注射后3 d小鼠纹状体区见到大量HO-1阳性细胞,同时HO-1蛋白表达增高,具有统计学意义,其余各时间点及对照组未见HO-1阳性细胞。中脑区HO-1阳性细胞及蛋白表达在各时间点均未见显著变化。结论:MPTP导致6月龄SAMP8小鼠黑质纹状体系统急性损伤,产生多巴胺能神经元数量减少及蛋白表达降低;其黑质纹状体HO-1的高表达是一过性短暂的,它在PD中的作用是有限的。

年龄相关的MPTP-SAMP8小鼠黑质纹状体系统急性损害

目的探讨1-甲基-4-苯基-1、2、3、6-四氢吡啶(1-Methyl-4-Phenyl-1,2,3,6-etrahydropyridine,MPTP)对不同年龄快速老化小鼠SAMP8(senescence-accelerated mouse prone8)黑质纹状体系统的急性损害,揭示衰老在帕金森病(Parkinson s disease,PD)发病中的作用。方法雄性12、24周龄SAMP8小鼠,各随机分为盐水组和MPTP组,于第1次给药后6h、24h、3d和8d处死小鼠。背部皮下注射MPTP20mg.kg-1,每2h1次,注射4次;观察各时间点小鼠的自主活动,黑质TH+神经元数量,纹状体TH免疫反应性,纹状体DA含量的变化。结果12周龄小鼠自主活动减少于第1次给药后48h恢复近正常水平;24周龄小鼠至7d时日仍没有恢复近正常水平。12周龄小鼠黑质TH+神经元数目于第1次注射后6h、24h、3d、8d分别减少7.06%,12.79%,22.49%,42.39%;24周龄小鼠分别减少14.23%,23.85%,36.77%,45.9%。纹状体TH免疫反应性COD值,24周龄小鼠在MPTP后24h,3d较12周龄小鼠明显降低(P<0.05)。12周龄小鼠纹状体多巴胺含量各时间点分别降低79.09%,80.33%,83.86%,80.14%;24周龄小鼠分别降低79.70%,86.64%,75.20%,92.32%,但两个周龄之间无统计学差异。结论证实MPTP可导致SAMP8小鼠黑质纹状体系统损害,老龄鼠黑质纹状体的损伤更严重。

磁刺激对帕金森病鼠黑质多巴胺能神经元的保护及其机制

目的探讨重复经颅磁刺激（rTMS）对帕金森病（PD）小鼠黑质多巴胺能神经元及胶质源性神经营养因子（GDNF）的影响。方法32只雄性C57BL／6J小鼠随机分为生理盐水组、模型组、假刺激组及磁刺激组，每组8只。采用1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶（MPTP）皮下注射，每次15mg／kg体重，连续注射4次，每次间隔2h，建立急性PD小鼠模型。磁刺激组小鼠每天接受1Hz、1T的磁刺激治疗（共5个序列，25脉冲／序列），疗程为2周。经rTMS干预后，通过免疫组织化学技术检测黑质酪氨酸羟化酶（TH）和GDNF的表达变化，并借助图像分析系统进行定量分析。结果模型组、假刺激组TH免疫阳性（TH-ir）和GDNF免疫阳性（GDNF-ir）细胞计数、校正光密度（COD）值较生理盐水组减少（P〈0．01）；磁刺激组TH-ir和GDNF-ir细胞计数、COD值均较模型组和假刺激组增加（P〈0．05）。相关分析显示黑质区TH-ir和GDNF-ir细胞计数呈明显正相关（r=0．836，P〈0．01），相应的COD值比较亦呈明显正相关（r=0．921，P〈0．01）。结论rTMS明显增加PD小鼠黑质TH-ir细胞数量和COD值，推测其对黑质多巴胺能神经元具有保护作用，而上调黑质区GDNF的表达可能是其作用机制。

小剂量阿托伐他汀钙对中国人血脂及颈动脉斑块长期影响的研究

目的观察20mg/d阿托伐他汀钙对无症状性颈动脉斑块患者血脂及斑块的影响。方法选取2006年1月至12月河北医科大学第一医院神经内科门诊及查体中心,经颈动脉彩色超声证实有颈动脉斑块,自愿参加临床观察的131例患者作为观察对象,随机分为阿托伐他汀钙治疗组(简称治疗组)63例及对照组68例。分别于治疗前、治疗后3、6、12、18、24个月测定两组血脂及颈动脉斑块情况,并观察终点事件及不良反应情况。结果治疗组与对照组脱落率及终点事件发生率差异无统计学意义。治疗组3个月起血胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯明显降低,6个月起高密度脂蛋白明显升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P值分别为0.009,<0.01,0.004,0.025)。对照组血脂各项指标在24个月观察期内差异均无统计学意义(P值分别为0.701,0.512,0.892,0.901)。治疗组斑块面积从治疗12个月起,较治疗前明显减小,稳定斑块逐渐增多,不稳定斑块逐渐减少,至治疗18个月起与治疗前比较差异有统计学意义(P值分别为0.022,0.002,0.007)。对照组颈动脉斑块总数、稳定斑块、不稳定斑块及斑块面积有逐渐增多的趋势,但与治疗前比较差异无统计学意义(P值分别为0.274,0.830,0.595,0.356)。治疗组无严重副反应发生。结论 20mg/d阿托伐他汀钙治疗能够显著改善无症状性颈动脉斑块患者血脂及颈动脉硬化的程度。