磷脂酰肌醇-3激酶在人骨骼肌纤维的表达

目的研究磷脂酰肌醇-3激酶在肌病患者骨骼肌纤维的表达及其意义。方法选择Duchenne型肌营养不良(Duch-enne muscular dystrophy,DMD)9例、Becker假肥大型肌营养不良(Becker muscular dystrophy,BMD)6例、先天性肌营养不良(congenital muscular dystrophy,CMD)3例、多发性肌炎(polymyositis,PM)5例,开放式骨骼肌活检,连续冰冻切片,苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)、三磷酸腺苷酶(adenosin triphosphatase,ATPase)组织化学染色;抗-磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、抗-神经细胞粘附分子(neural cell adhesion molecule,NCAM)、抗-结蛋白(desmin)单克隆抗体免疫组织化学染色,病理分析。结果①PI3K在再生早期小径肌纤维膜上表达,伴随再生肌纤维的成熟PI3K表达消失;②PI3K在幼儿肌纤维膜上表达显著;③PI3K在动静脉平滑肌上表达显著。结论PI3K可能在人骨骼肌纤维再生早期起重要作用。

脊髓内注射不同量液体及不同药物对正常大鼠神经功能的影响

目的探寻正常大鼠脊髓实质内注射，液体量大小及药物对脊髓神经功能的影响及适用于脊髓损伤基因治疗的安全注射量。方法采用（4×3）析因实验设计将96只成年健康SD大鼠随机分为12组，每组大鼠依分组情况分别于T13椎体水平注射NS或病毒缓冲液或Ad—LacZ（1×10^9pfu／ml）2、4、6、10μl。另取6只成年健康SD大鼠作为手术对照组，只行椎板减压术，不进行微注射。术后不同时间采用BBB评分标准对每组大鼠进行后肢运动功能检查。术后1、2、4周处死大鼠，病理学分析确定有效组织保留率。Ad—LacZ各组切片行X—ga染色，观察重组腺病毒在脊髓中的表达。结果神经功能损伤及组织损伤程度随注射量增大而加重，不同注射液体量间比较差异有统计学意义（P=0．000）。不同注射药物间进行比较，Ad—LacZ组损伤程度重于NS组及病毒缓冲液组，差异有统计学意义（P=0．044）。NS组与病毒缓冲液组比较，差异无统计学意义（P=1．000）。Ad—LacZ不同液体量各组均可完成对脊髓灰质神经细胞和胶质细胞的转染，术后4周阳性细胞数减少。结论脊髓实质内微注射本身就可引起组织损伤及神经功能障碍。重组腺病毒可引起组织的免疫反应，加重脊髓损伤。对于正常大鼠脊髓，4μl的重组腺病毒为相对安全注射量；6μl为临界注射量，应谨慎把握。