NORAD在口腔鳞状细胞癌组织、癌旁组织及口腔鳞癌细胞系中的表达及作用机制

目的探讨DNA损伤激活的非编码RNA(NORAD)在口腔鳞状细胞癌组织,癌旁组织及口腔鳞癌细胞系中的表达及作用。方法回顾性选取2020年1月至2022年1月在河北医科大学第四医院行手术切除的口腔鳞状细胞癌组织标本88例,同时选取癌旁组织标本88例作为对照。采用PCR检测组织中NORAD mRNA相对表达量,分析不同临床病理特征口腔鳞状细胞癌组织NORAD mRNA相对表达量差异;同时选取口腔鳞癌细胞系SCC9、CAL27、SCC15及TSCCA细胞,以及正常黏膜HOK细胞,检测各细胞NORAD mRNA相对表达量差异。结果口腔鳞状细胞癌组织NORAD mRNA相对表达量为2.21±0.87,明显高于癌旁组织(1.03±0.34),差异有统计学意义(P<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、低分化、有淋巴结转移口腔鳞状细胞癌组织NORAD mRNA相对表达量分别为2.79±0.69、2.62±0.65、2.68±0.68,明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、中高分化、无淋巴结转移口腔鳞状细胞癌组织(1.98±0.67、2.03±0.70、1.93±0.62),差异均有统计学意义(P<0.05);复发和未复发患者NORAD mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。CAL27细胞NORAD mRNA相对表达量为1.87±0.41,明显高于SCC15、SCC9、TSCCA、HOK细胞(1.40±0.44、1.39±0.46、1.06±0.34和0.51±0.18),差异均有统计学意义(P<0.05)。结论NORAD在口腔鳞状细胞癌组织表达上调,与TNM分期、分化程度及淋巴结转移有关,NORAD在CAL27细胞中表达最高。

口腔颊癌p16INK4/CDKN2基因的纯合子缺失与点突变

目的探讨p16基因纯合子缺失和点突变与颊癌发生、发展的关系。方法采用聚合酶链反应(PCR)、DNA单链构象多态性(SSCP)分析和DNA测序技术研究30例颊癌及10例颊黏膜白斑p16基因纯合子缺失和点突变的情况,并应用免疫组化检测基因改变组织中P16蛋白质的表达。结果颊白斑和正常颊黏膜无p16基因的纯合子缺失和点突变。在30例颊癌标本中,7例标本p16纯合子缺失,纯合子缺失率是23.3%(7/30);5例颊癌出现点突变,均发生在第2外显子上,点突变率为16.7%(5/30)。经DNA直接测序,发现5例点突变均为错义突变,其中3例突变位点相同,均在第99密码子上由GAT突变为AAT,由门冬酰胺取代门冬氨酸;对纯合子缺失和点突变的12例颊癌组织进行P16蛋白的检测,发现11例标本P16蛋白表达缺失,1例点突变标本表达正常。结论p16基因纯合子缺失和点突变是颊癌基因失活的主要形式,与颊癌的发生、发展密切相关。

牙髓干细胞对兔面神经损伤的修复作用及其机制

目的:通过手术建立兔面神经损伤模型,探讨牙髓干细胞对兔面神经损伤的修复作用,阐明其可能机制。方法:分离、培养并诱导牙髓干细胞。45只兔随机分为正常对照组、模型组和实验组,每组15只。除正常对照组外,其余各组兔沿嘴角至耳前处做长约3cm的切口,离断面神经上颊支,建立面神经上颊支损伤的动物模型。1周后向实验组兔手术术腔部位注入0.1mL牙髓干细胞悬液(5×10~6个),正常对照组兔不作任何处理,模型组兔注射等量磷酸盐PBS缓冲液。术后2周观察各组兔行为表现及面部胡须运动功能评分,HE染色观察各组兔面神经组织病理形态表现,免疫组织化学染色观察兔面神经组织中脑源神经生长因子(BDNF)和睫状神经生长因子(CNTF)阳性细胞数,透射电镜观察兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度。结果:成功分离鉴定原代幼兔牙髓干细胞,大多数呈成纤维状、长梭形。HE染色后,第3代干细胞的细胞核呈深蓝色、卵圆形,呈梭形着色深细胞为成纤维细胞样细胞。与正常对照组比较,模型组兔面部胡须运动功能评分降低(P<0.05);与模型组比较,实验组兔面部胡须运动功能评分升高(P<0.05)。与模型组比较,实验组兔治疗10周后,再生神经纤维较多,呈束状且紧密。与正常对照组比较,模型组兔面神经组织中BDNF和CNTF阳性细胞数明显降低(P<0.05);与模型组比较,实验组兔面神经组织中BDNF和CNTF阳性细胞数明显升高(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度明显降低(P<0.05);与模型组比较,实验组兔面神经组织横切片中再生神经纤维数目、纤维直径和髓鞘厚度数均明显升高(P<0.05)。结论:牙髓干细胞对面神经损伤具有一定的修复作用,其机制可能与上调BDNF及CNTF表达有关联。

Bcl-2家族蛋白在莱菔硫烷诱导人涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M凋亡中的作用

目的观察莱菔硫烷(sulforaphane,SFN)对腺样囊性癌细胞ACC-M中Bcl-2家族成员表达的影响,探讨Bcl-2家族蛋白在SFN诱导ACC-M细胞凋亡中的作用。方法 20或40μmol/L SFN处理ACC-M细胞特定时间后,采用倒置显微镜,Wright-Giemsa染色和透射电镜观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞凋亡率。40μmol/L SFN处理细胞4、8、16、24h,采用Western blot方法检测Bax、Bak、Bcl-2和Bcl-xL的表达。结果倒置显微镜,Wright-Giemsa染色和透射电镜显示SFN可诱导ACC-M细胞凋亡,流式细胞术检测可见凋亡率随处理时间延长和药物浓度增加而上升,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。经40μmol/L SFN处理后,促凋亡蛋白Bax、Bak的表达以及Bax/Bcl-2比值随着时间的延长而增加,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL的表达随时间延长逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 SFN以浓度-时间依赖方式诱导ACC-M细胞凋亡,并上调Bax和Bak的表达,下调Bcl-2和Bcl-xL的表达。SFN对Bcl-2家族蛋白的调节可能是其诱导凋亡的机制。

两种微/纳米化处理对钛种植体表面理化性能影响的实验研究

目的:评价纯钛经氢氟酸酸蚀+阳极氧化及氢氟酸酸蚀+磁控溅射处理后纯钛表面涂层的理化性能。方法:30个纯钛钛片平均分成两组,A组进行氢氟酸酸蚀+阳极氧化处理,B组进行氢氟酸酸蚀+磁控溅射处理。处理后的样品通过扫描电镜(SEM)、原子力学显微镜(AFM)观察其表面形貌,通过X射线能谱分析(EDS)、X射线衍射物相(XRD)观察表面化学成分,通过环氧树脂对接拉伸实验检测涂层的结合强度。结果:SEM显示两种表面处理后都可形成微/纳米级表面形貌,其中A组表面形貌为纳米管;B组表面形貌为纳米柱。AFM显示两种表面处理后形成的微/纳米级表面,粗糙度相近。EDS显示两种处理的表面都载入氟元素,其中B组以钛酸锶为靶材进行溅射后,表面载入锶元素。XRD显示两种表面主要晶相均为α钛。环氧树脂对接拉伸实验显示B组结合强度高于A组(P<0.01)。结论:两种处理方法在纯钛表面构建了不同结构的微/纳米涂层,其中氢氟酸酸蚀+磁控溅射表面载入锶元素,但都未形成新的晶相。磁控溅射组涂层的结合强度优于阳极氧化组。

头颈部多发嗜酸性粒细胞增生性淋巴肉芽肿1例

患者,男性,19岁,主因双侧腮腺肿块5年入院。缘于5年前发现双侧腮腺肿块,无疼痛及其他不适,肿物缓慢生长,3年前曾于外院就诊,给予腺体按摩并进酸性饮食,肿物仍缓慢生长,2年前于外院查血常规、血沉及各项风湿因子及抗体,血常规显示嗜酸性粒细胞增高达0.44,血沉及风湿因子均为阴性,未系统治疗,来我院就诊。自发病以来,有口干、眼干症状。既往体健。

基于HF酸蚀＋阳极氧化处理的μm/nm表面对种植体早期骨结合的影响

目的:评价μm/nm表面对种植体早期骨结合的影响。方法:40枚种植体平均分为2组,对照组为机械加工表面;实验组为μm/nm表面。植入20只大鼠股骨远端,术后即刻、2周行活体显微CT扫描,术后2周处死取材,行组织学染色及生物力学检测。结果:显微CT提示:实验组BV/TV、Tb.Th、Tb.N显著增高,Tb.Sp显著减少。对照组和实验组骨结合率分别为(38.94±9.48)%,(51.49±12.49)%;最大拔出力分别为(64.95±6.11)N,(81.90±13.10)N,2组结果实验组均高于对照组。结论:μm/nm表面可以显著促进种植体早期骨结合。

血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p水平与婴幼儿增殖期面部血管瘤普萘洛尔停药后复发的关系

目的探讨血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p水平与婴幼儿增殖期面部血管瘤普萘洛尔停药后复发的关系。方法增殖期面部血管瘤患儿93例,均接受普萘洛尔治疗,随访治疗后血管瘤复发情况,并将患儿分为复发组(23例)和无复发组(70例)。治疗前、后采集静脉血,qRT⁃PCR检测血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p表达,分析血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p表达与增殖期面部血管瘤婴幼儿普萘洛尔停药后复发的关系。结果无复发组治疗后血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p表达较治疗前增高(P<0.05),复发组治疗后血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p表达与治疗前比较差异无统计学意义(P>0.05)。复发组治疗后血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p表达低于无复发组(P<0.05)。治疗后瘤体分级Ⅲ~Ⅳ级患儿血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p表达高于Ⅰ~Ⅱ级患儿(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示miR⁃199a⁃5p低表达、miR⁃378a⁃3p低表达、治疗后瘤体分级Ⅰ~Ⅱ级是增殖期面部血管瘤婴幼儿普萘洛尔停药后复发的危险因素(P<0.05)。结论血清miR⁃199a⁃5p、miR⁃378a⁃3p低表达与增殖期面部血管瘤婴幼儿普萘洛尔停药后血管瘤复发有关。

雌激素受体及芳香化酶在牙龈癌组织中的表达和意义

目的:观察牙龈癌中雌激素受体(ER)与芳香化酶的表达情况,探讨局部雌激素及芳香化酶在牙龈癌中的作用与关系。方法:免疫组化过氧化物酶标记的链酶卵白素法测定雌激素受体及芳香化酶在牙龈癌中的表达。结果:牙龈癌组雌激素受体及芳香化酶的表达阳性率分别为50%和42.86%,正常对照组分别为13.33%和6.67%(P<0.05);牙龈癌中雌激素受体与芳香化酶之间未见明显相关性。结论:牙龈癌有一定的雌激素依赖性;芳香化酶在牙龈癌组织中表达升高,但芳香化酶并不是影响局部雌激素受体升高的唯一因素。

氢氟酸酸蚀形成的两种不同微/纳米表面对骨髓间充质干细胞生物活性的影响

目的:评价纯钛样品经12.5 g/L氢氟酸(HF)酸蚀处理不同时间后形成的两种不同表面对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)生物活性的影响。方法:将纯钛钛片平均分为3组:A组抛光处理;B组12.5 g/L HF酸蚀1 min;C组12.5 g/L HF酸蚀15 min。X射线能谱仪分析(EDS)其表面化学成分;亲水性试验测量样品表面的接触角;激光共聚焦显微镜计数评价BMMSCs在样品表面的早期黏附;SEM观察观察样品表面形貌及黏附的细胞形态;MTT法检测细胞活性;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定ALP活性。结果:酸蚀后的两组样品都可形成微/纳米级表面形貌且载入氟元素;酸蚀后的表面接触角明显小于抛光组,且C组小于B组;酸蚀后的纯钛样品表面能够促进BMMSCs的黏附、增殖和ALP活性,且C组优于B组。结论:HF酸蚀使纯钛表面构建了不同结构的微/纳米形貌,载入了氟元素,可促进BMMSCs在纯钛表面的生物活性。

掺锶仿生涂层用于促进种植体早期骨结合的初步研究

目的:在种植体表面构建掺锶的仿生化涂层并观察其对早期骨结合的影响。方法:采用酸蚀加磁控溅射技术在纯钛种植体表面产生掺锶的微纳米化仿生涂层(实验组);用扫描电镜、能量色散型X射线谱(EDS)观察其表面形貌和元素成分,将实验组种植体植入SD大鼠一侧股骨干骺端,另一侧植入机械加工的种植体作为对照。术后进行双荧光序列标记,饲养4周时取材,用丽春红染色、荧光染色分析评估2组种植体早期骨结合的能力,轴向拔出实验评估其生物力学性能。结果:实验组种植体表面形成了微纳米化的仿生涂层,其表面锶的含量1.2%,提示成功构建掺锶的微纳米化种植体涂层;实验组新生骨组织与种植体结合紧密,成骨活跃,骨接触率(BIC)以及骨矿化沉积率(MAR)均显著高于对照组(P<0.05);实验组的最大拔出力明显高于对照组(P<0.05)。结论:掺锶的微纳米化仿生涂层可有效促进种植体的早期骨结合能力。

微/纳米化载锶涂层对骨髓间充质干细胞生物活性影响的研究

目的:评价微/纳米化载锶涂层对骨髓间充质干细胞(BMMSCs)生物活性的影响。方法:将纯钛片分为3组,A组:光滑组(未经任何处理,n=24);B组:氢氟酸(HF)酸蚀组(n=24);C组:HF酸蚀+磁控溅射组(n=27)。SEM观察钛片表面形貌;X射线能谱(EDS)分析其表面元素含量;表面接触角检测钛片表面亲水性;离子释放试验检测C组的锶离子释放情况。在3组钛片表面分别接种BMMSCs,观察BMMSCs早期粘附能力;MTT检测细胞增殖能力;ALP活性评估细胞成骨分化能力。结果:3组钛片经不同方法处理后,B组形成微米级表面形貌;C组形成微/纳米表面形貌,并载入了锶元素,且锶元素可以离子形式释放;B、C组的亲水性、细胞粘附及增殖能力均高于A组,且B组高于C组;C组表面细胞的ALP活性显著高于B组。结论:微/纳米化载锶涂层有助于促进BMMSCs的增殖和成骨分化能力。

基于锥形束CT的颏孔区解剖结构分析

目的利用锥形束CT(cone beam CT,CBCT)对颏孔区解剖结构进行观察测量及分析,为临床颏部手术的术前规划及安全实施提供详细数据支持。方法收集2018年6月至2020年6月于河北医科大学第二医院口腔科就诊的290例患者(580侧下颌骨)的影像学资料行回顾性分析,对不同性别及各年龄段患者的颏孔位置、横径、纵径、距下颌骨下缘的距离(MF-MLB),下牙槽神经前襻的发生率、长度,副颏孔的发生率、位置分类、横径、纵径、距下颌骨下缘的距离(AMF-MLB)及其中心至颏孔中心距离(MF-AMF),侧方舌侧孔的发生率、纵径、距下颌骨下缘的距离(LLF-MLB)进行测量和分析。结果(1)580侧下颌骨中能精确定位553个颏孔,71.07%(393/553)位于第二前磨牙根尖区;其中,男性患者颏孔的横径、纵径及MF-MLB均大于女性患者,50~59岁和≥60岁患者的MFMLB大于其他年龄段患者,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。(2)237例患者存在下牙槽神经前襻(392个),其发生率为81.7%(237/290),其长度为(3.3±0.6)mm;其中,男性患者下牙槽神经前襻发生率及长度均大于女性患者,差异有统计学意义(均P<0.05);而各年龄段患者下牙槽神经前襻长度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。(3)31例患者存在副颏孔(38个),其发生率为10.7%(31/290),第Ⅲ类副颏孔占比最大为44.7%(17/38);副颏孔的横径、纵径分别为(1.3±0.3)、(1.2±0.2)mm,AMF-MLB、MF-AMF分别为(15.3±2.2)、(4.9±0.9)mm;不同性别及各年龄段患者的副颏孔发生率及各项测量指标比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。(4)202例患者存在侧方舌侧孔(320个),其发生率为69.7%(202/290),侧方舌侧孔纵径为(0.8±0.2)mm,LLF-MLB为(7.2±1.2)mm;其中,男性患者LLF-MLB大于女性患者,50~59岁患者侧方舌侧孔纵径小于其他年龄段患者,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论颏孔区下牙槽神经前襻和侧方舌侧孔具有较高的发生率,且均有较大的解剖结构变异。建议在颏孔区行牙种植术或其他颌面外科手术时,术前常规行CBCT检查,以减少术中及术后并发症。

微种植钉联合横腭杆支抗对安氏Ⅱ类高角患者磨牙垂直向、牙弓宽度及后牙颊倾度的影响

目的比较微螺钉种植体支抗系统(MAS)联合横腭杆支抗(TPA)对安氏Ⅱ类高角患者的治疗效果。方法选取2014年6月—2015年6月邢台医学高等专科学校第二附属医院收治的安氏Ⅱ类高角患者40例,根据随机数字表法分为MAS组和MAS联合TPA组,每组各20例。采用X线头颅定位侧位片测量矫治前后磨牙垂直向距离,使用电子游标卡尺测量矫治前后的石膏模型上下颌牙弓横向宽度,对2组患者矫治前后采用锥形束CT(CBCT)测量分析第一磨牙颊倾度。比较2组患者磨牙垂直向距离、牙弓宽度以及后牙颊倾度的变化情况。结果经矫治后MAS联合TPA组的磨牙垂直向距离(L6-MP、LI-MP、U6M-SV、U6-PP和UI-PP)和MAS组(均P>0.05),牙弓宽度各指标(U33、U55、U66、L33、L55、L66)和MAS组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。MAS联合TPA组的磨牙旋转角度、磨牙颊向移动距显著高于MAS组[(2.23±0.45)°vs.(1.06±0.24)°;(1.23±0.08)mm vs.(0.15±0.01)mm],但磨牙位移显著低于MAS组[(3.13±0.66)mm vs.(5.21±0.82)mm,均P<0.05]。结论MAS联合TPA可有效降低磨牙垂直向的变化,促进牙弓宽度的增加,改善颊倾度,其对于安氏Ⅱ类高角患者的矫治效果显著优于MAS,值得临床推广。