普伐他汀对心脏成纤维细胞转化生长因子-β1合成的影响

目的:探讨普伐他汀对醛固酮诱导新生大鼠心脏成纤维细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)的影响。方法:采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取和培养心脏成纤维细胞,应用ELISA、Western-blot、RT-PCR的方法分别测定醛固酮、普伐他汀以及甲羟戊酸对心脏成纤维细胞培养液中TGF-β1水平和心脏成纤维细胞TGF-β1mRNA和蛋白质的表达。结果:与正常对照组相比,醛固酮(10-7mol/L)可促进心脏成纤维细胞培养液中TGF-β1水平和心脏成纤维细胞TGFβ-1mRNA和蛋白质的表达,提前给予普伐他汀(10-5,10-4,10-3mol/L)能剂量依赖性地抑制醛固酮的上述作用,同时这种抑制作用可被甲羟戊酸所逆转。结论:普伐他汀可抑制醛固酮诱导的心脏成纤维细胞TGF-β1mRNA表达以及蛋白质的合成和分泌,其机制可能与甲羟戊酸代谢途径有关。

电压门控钾离子通道对卵巢黄素化颗粒细胞增殖、分泌及凋亡的影响

目的探讨电压门控钾离子通道（Kv）对人绒毛膜促性腺激素（hCG）诱导的卵巢黄素化颗粒细胞增殖、分泌及凋亡的影响。方法收集2007年11月至2008年2月行体外受精。胚胎移植患者的卵泡液共25份，密度梯度法获得卵巢黄素化颗粒细胞，采用RT—PCR技术检测颗粒细胞中Kv mRNA的表达。将培养贴壁后的颗粒细胞按干预方式分为空白组、4氨基吡啶（4-AP）组、hCG组和hCG＋4-AP组共4组，hCG和4-AP的终浓度分别为1250U／L、5nmol／L。培养24h后，采用化学发光法测定各组孕酮水平；采用流式细胞仪和分光光度法检测各组颗粒细胞的凋亡情况；采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测各组颗粒细胞的增殖、抑制情况。结果（1）培养24h后，空白组、4-AP组、hCG组和bCG＋4-AP组颗粒细胞中的孕酮水平分别为（547±64）、（206±32）、（1991±172）和（763±79）nmol／L。4-AP组、hCG组分别与空白组比较，差异均有统计学意义（P〈0．01）；hCG＋4-AP组与hCG组比较，差异也有统计学意义（P〈0．01）。（2）培养24h后，4-AP组颗粒细胞抑制率为19．7％，与空白组（0）比较，差异有统计学意义（P〈0．05）；hCG＋4-AP组为34．6％，与hCG组（0）比较，差异也有统计学意义（P〈0．01）。4-AP组、hCG＋4-AP组的颗粒细胞增殖率分别为80．3％、68．2％，分别与空白组（100％）比较，差异均有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）；hCG组（100．4％）高于空白组，但差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）培养24h后颗粒细胞的凋亡率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（caspase-3）活性，4-AP组分别为（40±5）％和0．049±0．009，均高于空白组[（17±4）％和0．029±0．008]，hCG＋4-AP组[（25±4）％和0．039±0．008]也均高于hCG组[（15±3）％和0．022±0．007]，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论4-AP能够抑制卵巢黄素化颗粒细胞和经hCG诱导的颗粒细胞的孕酮分泌，可能与其抑制增殖、促进凋亡有关。Kv在卵巢黄素化颗粒细胞分泌、增殖及凋亡过程中起重要的作用。