血小板浓缩液的制备及促进兔尺骨骨折愈合方面的实验研究

目的:探索动脉血小板浓缩液,在无菌情况下的制备方法。通过免疫组化及物理测量,证实血小板浓缩液中含有多种生长因子,并对比分析其对骨折愈合不同时期的促进作用,为临床应用提供基础资料。方法:选用20只新西兰兔,随机分成2组,分别为空白组及血小板组。制作尺骨中段骨折动物模型,采用指钢板行内固定。在手术之前,先抽取兔股动脉血6ml左右,经枸橼酸钠抗凝后,加低速高速离心,提纯出白色的血小板浓缩液,将其注射回骨折断端。所有操作均为无菌操作。分别在1、2、4及6周处死兔,在骨折处取5mm骨组织标本。切片作PDGF免疫组化染色定性分析及测量骨痂直径定量分析。结果:①6ml的兔动脉血在低速及高速离心后,可分离出0.5ml的血小板浓缩液,浓度在正常兔血小板浓度的3倍以上。②免疫组化染色阳性产物呈棕黄色颗粒状。在空白组术后第1周及第2周PDGF因子为阴性表达,第4周、第6周为弱阳性表达;在血小板浓缩液组,随着处死时间延长,阳性表达率逐渐增高。在相同的处死时间,血小板浓缩液组阳性表达率明显高于空白组。空白组、血小板组兔尺骨骨折标本在1、2、4、6周,均有不同程度骨痂形成,其中以第6周兔骨痂最多,第1周兔以纤维连接为主,仅有少许骨痂形成。空白组与血小板组同期骨痂直径差异有显著性意义。结论:①少量的兔血在严格的实验条件下,能够制备出血小板浓缩液。②兔血小板浓缩液中确含有较高浓度的PDGF生长因子。③血小板浓缩液加速了骨折断端的愈合。