IL-12家族细胞因子:肿瘤免疫治疗研究的热点分子

利用细胞因子提高宿主免疫能力、破坏肿瘤细胞的免疫逃逸功能是肿瘤生物治疗的重要策略。IL-12细胞因子家族是具有高度同源性的一类异源二聚体细胞因子,包括IL-12、IL-23、IL-27和IL-35,它们均由活化的抗原提呈细胞如巨噬细胞和树突状细胞产生,在辅助性T细胞分化过程中起重要作用。IL-12通过活化ATAT4信号转导途径产生IFNγ-促进细胞免疫反应;IL-27主要活化STAT1途径增强细胞和体液免疫反应;外源性IL-23可以产生抗肿瘤效应,而内源性IL-23通过活化STAT3诱导产生IL-17,从而促进肿瘤的发生和发展;IL-35可能是潜在的免疫抑制性细胞因子。总之,IL-12细胞因子家族成员在肿瘤免疫反应中各自发挥不同的作用,已成为肿瘤免疫治疗和研究的热点分子。

五味子提取物对辐射所致小鼠淋巴细胞减少的预防效果及其机制

目的:研究中药五味子(Schisandra Chinensis,SC)提取物对辐射所致小鼠外周血淋巴细胞减少的预防效果及其机制。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为SC预防组(SC+ray)、NS对照组(NS+ray)、SC对照组(SC)和正常对照组(NS)。一次性6 Gyγ射线照射,照射后进行小鼠外周血白细胞和淋巴细胞计数,细胞免疫荧光检测外周血T淋巴细胞亚群,Gimsa染色观察小鼠胸腺细胞形态,流式细胞术检测胸腺细胞凋亡率,RT-PCR法检测胸腺组织中Bcl-2和Fas基因mR-NA的表达。结果:NS对照组小鼠照射后外周血白细胞总数和淋巴细胞数量及亚群均明显下降(P<0.0),SC预防组较NS对照组白细胞总数和淋巴细胞数量均明显升高(P<0.01);SC预防组小鼠外周血中CD3+、CD4+和CD8+T细胞百分率较NS对照组小鼠明显升高(P<0.01)。NS对照组小鼠照射后胸腺细胞数目减少,并可见多处片状细胞凋亡和坏死;SC预防治疗组较NS对照组胸腺细胞凋亡率明显降低[(21.32±2.56)%vs(2.87±1.03)%,P<0.01];RT-PCR结果表明,照射后小鼠胸腺细胞Bcl-2表达明显降低,Fas表达明显升高(均P<0.01),而SC预防组较NS对照组Bcl-2表达明显升高,Fas表达明显降低(均P<0.05)。结论:SC通过升高Bcl-2表达、降低Fas表达调控胸腺细胞凋亡,从而有效预防辐射所致小鼠外周血淋巴细胞的减少。

IL-27促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡

目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27)。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响。将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN(稳定转染空质粒的Aspc1细胞)和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化。结果:成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株。Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27(P<0.01)。PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达(P>0.05)。Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组(P<0.05),且生存期延长(P<0.05)。Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组[(19.5±2.4)%vs(8.5±0.3)%、(9.1±0.8)%,P<0.01]。结论:IL-27基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。

表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗增强DC活性

目的:观察表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗体内外对DC活性的影响。方法:以脂质体法将CD40L基因转染colon26细胞获得稳定表达CD40L的colon26/CD40L瘤苗。colon26/CD40L细胞与小鼠骨髓来源DC共培养,流式细胞术检测DC表型变化,RT-PCR法检测细胞因子基因P19、P35、P40、IL-18和IFN-γ的表达,ELISA法检测共培养上清中IL-12、IL-23和IFN-γ的水平。BALB/c小鼠皮下注射colon26细胞制备荷瘤小鼠模型,colon26/CD40L致敏DC治疗荷结肠癌小鼠,ELISA法检测荷瘤小鼠外周血中IL-12、IL-23、IFN-γ、IL-10和TGF-β的水平,H-E染色观察肝、脾和肿瘤组织的病理学变化。结果:成功获得高表达CD40L的丝裂霉素(MMC)处理的colon26/CD40L瘤苗。DC与colon26/CD40L瘤苗共培养后,DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHCⅠ和MHCⅡ表达增高(P<0.01);共培养体系中可检测到P19、P35、P40、IL-18和IFN-γmRNA的表达,而在其他组未检测到上述基因的表达;共培养细胞上清中有较高水平的IL-12、IL-23和IFN-γ(P<0.01)。co-lon26/CD40L瘤苗致敏DC治疗组与colon26/CD40L瘤苗治疗组、DC治疗组比较,小鼠移植瘤的体积和质量明显减小和减少(P<0.05);小鼠外周血IL-12、IL-23和IFN-γ明显升高(P<0.01),IL-10和TGF-β明显降低(P<0.01);小鼠移植瘤组织病理变化显著减轻。结论:表达CD40L的丝裂霉素(MMC)处理的结肠癌瘤苗可促进DC的成熟,刺激DC分泌细胞因子,增强DC体内外活性,从而增强治疗体系的抗肿瘤免疫效应。