图文结合习题在组织学与胚胎学教学中的应用

目的本研究旨在研究图文结合习题和不同类型教学视频在组织学和胚胎学教学中的应用效果。方法选取我校2021级影像班和全科医学班学生为研究对象,实验组采用图文结合习题,对照组采用传统纯文字习题。两组学生在教学过程中使用相同的教学视频辅助教学。课程结束后,对两组学生的切片成绩和期末成绩进行比较和相关性分析,使用调查问卷评价两组的教学效果。结果实验组学生的成绩和高分段学生人数均显著高于对照组。实验组切片成绩和期末成绩之间存在密切相关性,实验组图文结合习题相关知识考点试题中,超过50%得分率的试题数量显著高于对照组。调查问卷显示,图文结合习题配合教学视频中的微课视频更有利于知识的掌握。结论使用图文结合习题能更好地加强组织学与胚胎学理论知识和实践内容的联系。

组织学与胚胎学教学中的情感教育应用

情感是人对客观事物是否符合自己的需要而产生的态度体验,是影响教学质量的一个重要因素。本文针对组织学与胚胎学这门医学基础课的教学特点,讨论了如何应用情感教育提高该学科教学效果的几点心得。

溶血磷脂酸受体3在小鼠胚胎围着床期子宫内膜的表达及意义

目的探讨溶血磷脂酸受体3（LPA—R3）mRNA和蛋白在小鼠胚胎着床过程中表达的动态变化。方法将78只雌性昆明小鼠随机分为真孕组（36只）、假孕组（36只）和对照组（6只），应用反转录．聚合酶链反应（RT-PCR）和Westernblotting以及免疫组织化学sP法，检测胚胎围着床期（0～6d）LPA—R3mRNA和蛋白在小鼠子宫内膜的表达和定位。结果LPA—R3主要分布于小鼠子宫内膜腔上皮、腺上皮和部分基质细胞的胞质。LPA—R3mRNA和蛋白在小鼠胚胎着床过程中，3d时开始上升，4d时达峰值，5d、6d骤然下降至基础水平。假孕组子宫内膜LPA—R3mRNA和蛋白表达水平及变化规律与相应同期真孕组一致。结论LPA—R3可能参与了胚胎的着床和子宫内膜容受性的建立过程。

食管鳞癌和淋巴结组织Paxillin和CD44v6的表达与临床意义

目的:研究桩蛋白(Paxillin)和CD44v6在食管鳞癌组织中的表达及其与食管鳞癌细胞侵袭与转移的关系。方法:应用免疫组化SP法检测24例正常食管黏膜、94例食管鳞癌和83例淋巴结中Paxillin和CD44v6的表达情况。结果:原发癌组织中Paxillin表达率与浸润深度(P<0.01)、临床分期(P<0.01)和淋巴结转移(P<0.05)等因素有关;CD44v6表达率与浸润深度(P<0.05)、临床分期(P<0.01)和淋巴结转移(P<0.05)等因素有关;原发癌组织和转移淋巴结组织中Paxillin和CD44v6表达率均高于无转移淋巴结组织(P<0.05);Paxillin和CD44v6在淋巴结组织中表达无相关性(P>0.05)。结论:Paxillin和CD44v6在食管癌组织和转移淋巴结中高表达,在食管癌的发生、发展过程中具有重要作用,可作为评价食管癌生物学行为的指标。

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织P450胆固醇侧链裂解酶和类固醇激素急性调节蛋白的影响

目的探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)和类固醇激素急性调节蛋白(StAR)的影响。方法 60只雄性SD大鼠,随机分为安静对照组(A组)、安静何首乌饮组(B组)、模型组(C组)、自然恢复组(D组)、何首乌饮治疗组(E组);何首乌饮预防组(F组),每组10只。C、D、E和F组大鼠复制运动疲劳动物模型,其中F组每天训练前给何首乌饮20g/(kg.d)(含生药4.8kg/L)灌胃60 d。模型成功后E组给何首乌饮20 g/(kg.d)(含生药4.8kg/L)灌胃治疗60 d。采用美国Beckmancoulter Unicel Dxl 800仪器测定睾酮水平;采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达变化。结果 P450scc免疫组织化学阳性颗粒主要表达于间质细胞及精母细胞,B组和F组表达最强,C组最弱,与其余各组相比差异有统计学意义。P450scc蛋白和mRNA表达变化为B、F组明显高于E、D和A组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A组和D组以及B组和F组两两之间差异无显著性;StAR免疫组织化学阳性颗粒主要表达于睾丸间质细胞胞质,阳性强度表现为E组和F组最强,C组最弱。StAR蛋白和mRNA表达变化为E和F组明显高于A、D组(P<0.05),C组明显低于A组(P<0.05),A、D组之间无差异。结论何首乌饮可以提高睾酮合成限速酶P450scc和StAR的表达。

5-氮胞苷诱导体外培养的胚胎干细胞向心肌样细胞分化

目的研究5-氮胞苷(5-aza)体外诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞的可行性。方法将P19细胞接种于培养板中或铺有琼脂的培养板中,5μmol/L5-aza培养7d后用不含5-aza的培养基继续培养。倒置显微镜观察细胞跳动情况,用免疫细胞化学、RT-PCR检测及电镜观察等方法鉴定细胞分化。结果5-aza暴露结合悬浮培养可诱导P19细胞分化为有节律跳动的心肌细胞。分化的细胞表达心肌特异的GATA-4、α-MHC mRNA及α-sarcomeric actin、cTnT蛋白,同时透射电镜观察到细胞质内有明显的肌丝。结论5-aza在体外可诱导胚胎干细胞向心肌样细胞分化,悬浮培养有助于细胞的心肌化过程。

桩蛋白和CD44v6在食管鳞癌及癌旁组织中的表达

目的探讨食管鳞癌和癌旁组织中桩蛋白和CD44v6的表达及其与食管癌发生、发展的关系。方法采用免疫组化方法检测了正常食管上皮组织和食管鳞癌手术切除标本的癌组织,癌旁1、3和5cm组织中桩蛋白和CD44v6表达水平。结果癌组织和癌旁1cm组织中桩蛋白和CD44v6表达阳性率均明显高于正常食管上皮组织(P<0.01),癌组织和癌旁1cm组织中桩蛋白和CD44v6表达率无显著性差异;距离原发癌组织越远,桩蛋白和CD44v6阳性表达率呈减少趋势;桩蛋白和CD44v6表达两者无相关性。结论桩蛋白和CD44v6在食管癌组织和癌旁组织中呈高表达,提示其在食管癌的浸润和转移过程中起重要作用。

肺纤维组织细胞瘤的诊断与治疗

目的探讨肺纤维组织细胞瘤临床特点、病理特征、诊断和治疗。方法回顾性分析该院1983～2005年5例肺纤维组织细胞瘤的临床资料。结果全组均行肺叶切除手术治疗,无术后并发症和死亡。术前诊断为肺癌3例;良性肿瘤2例,无1例术前明确诊断。结论该病临床症状无特征性,术前确诊极为困难。本病应手术治疗,术式以肺叶切除为主。预后良好。

黏蛋白MUC-1在人胚胎胃黏膜发育中的阶段表达

目的 阐明MUC 1在胎儿胃黏膜的表达特点 ,探讨MUC 1与胃上皮分化的关系。 方法 应用HE染色和SP免疫组织化学方法 ,检测 2 2例 9～ 30周胎儿胃黏膜的发育以及MUC 1在不同时期的表达。 结果 胎儿胃黏膜的分化可分为 3个不同时期 :1 在未分化期MUC 1呈极性分布于早期胃上皮的游离面。 2 在分化期MUC 1呈极性和弥漫性分布于中期胃黏膜上皮和腺上皮。 3 生长期MUC 1分布于胃底腺上皮。 结论 MUC 1的表达与胃上皮的分化密切相关。

Desert Hedgehog诱导大鼠胚胎中脑神经前体细胞定向分化为多巴胺能神经元

目的研究Desert Hedgehog(DHH)对胚胎中脑神经前体细胞(NPCs)向多巴胺能神经元分化的诱导作用。方法大鼠DHH病毒上清感染COS7、NIH/3T3和9L细胞,用免疫荧光、实时定量PCR和Western blot方法检测DHH表达。分离培养大鼠胚胎中脑神经前体细胞,免疫荧光鉴定神经前体细胞的增殖分化特性。条件细胞表达DHH成功后分别与上述NPCs共培养10 d,免疫荧光检测酪氨酸羟化酶(TH)的表达。结果DHH在COS7、NIH/3T3和9L细胞中成功表达;同时,分离培养的大鼠胚胎中脑神经前体细胞具有良好的增殖分化特性,但两者共培养10 d后偶见TH阳性的细胞。结论DHH编码的蛋白不能或不能单独诱导NPCs定向分化为多巴胺能神经元。

何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体的影响

目的：探讨何首乌饮对运动疲劳大鼠睾丸组织黄体生成素受体（LHR）的影响。方法：复制运动疲劳动物模型，测定睾酮水平，采用RT-PCR、免疫印迹和免疫组织化学法检测各组睾丸组织LHR的表达变化。结果：LHR免疫组化阳性颗粒主要表达于问质细胞以及精母细胞胞膜和胞质，何首乌饮预防组和何首乌饮治疗组阳性信号较强，模型组最弱。LHR蛋白和mRNA表达变化为：何首乌饮预防组、何首乌饮治疗组明显高于对照组和何首乌饮组，模型组明显低于对照组。结论：何首乌饮可以提高大鼠睾丸组织LHR的表达。

何首乌饮对过度训练大鼠睾丸组织3β-羟基类固醇脱氢酶的影响

目的探讨何首乌饮对过度训练大鼠睾丸组织3β羟基类固醇脱氢酶(3β-HSD)的影响。方法 30只雄性SD大鼠随机分为5组,A组为安静对照组;B组为安静何首乌饮组;C组为自然恢复组;D组为何首乌饮治疗组;E组为何首乌饮预防组,每组6只。C组、D和E组大鼠复制力竭运动动物模型,其中的E组每天训练前给何首乌饮20g/(kg.d)(含生药9.6kg/L)灌胃作为预防。模型成功后D组给何首乌饮20g/(kg.d)(含生药9.6kg/L)灌胃治疗60d。放射免疫法检测各组血清睾酮浓度,分别采用RT-PCR、Western blotting和免疫组织化学法检测各组睾酮合成催化酶3β-HSD的表达变化。结果 3β-HSD蛋白的阳性信号为间质细胞的胞质表达棕黄色颗粒。3β-HSD在组织、蛋白和mRNA的表达变化:B组明显高于A组(P<0.05),E组和D组高于C组(P<0.05),E组和D组之间无显著性差异。结论何首乌饮可以增强睾酮合成限速酶3β-HSD的表达。

Sertoli细胞诱导大鼠胚胎中脑神经干细胞定向分化的研究

目的 研究Sertoli细胞对胚胎中脑神经干细胞的营养及向多巴胺能神经元分化的诱导作用。 方法 将大鼠Sertoli细胞与胚胎13d大鼠中脑神经前体细胞体外共培养5、7、10、14d后,免疫荧光检测神经干细胞标记 物Nestin、神经元前体细胞标记物β Ⅲtubulin、多巴胺能神经元标记物酪氨酸羟化酶(TH)的表达情况。 结果 随 着共培养时间的延长,神经干细胞中nestin阳性细胞数量逐渐减少,β Ⅲtubulin阳性细胞数在共培养7d时较多,TH 阳性的神经元在共培养10d时数量最多。而且在各时间段TH阳性细胞数均多于单独培养的神经前体细胞。 结 论 Sertoli细胞能够诱导与其共培养的胚胎中脑神经干细胞定向分化为多巴胺能神经元。

胎儿附睾的组织化学观察

本研究用光镜观察了在６例不同胎龄的胎儿及２例新生儿的附睾各段内ＡＫＰ、ＡＣＰ和ＳＤＨ在胎儿期附睾起始段的活性比其它各段都强，并且以３３周时为最强；至新生儿期，ＡＣＰ和ＳＤＨ在胎儿期附睾起始段的活性比其它各段都强并以３３周时最强，至新生儿期，ＡＣＰ和ＳＤＨ的组织化学活性及ＰＡＳ反应，并进行了半定量评估。结果显示：ＡＫＰ只在新生儿时期有微弱的活性；ＡＣＰ和ＳＤＨ的酶活性都比３３周时弱。ＰＡＳ阳生反应首先出现在６月龄的附睾各段，随后逐渐增强，至３３周时，附睾体、尾段的反应最为强烈，此后至新生儿期则轻微地减弱。根据文献对上述不同胎龄胎儿及新生儿附睾内酶活性及ＰＡＳ反应的变化进行了讨论。

新生大鼠骨骼肌卫星细胞的原代培养及标记方法

本文用等密度沉降离心法分离出新生大鼠骨骼肌卫星细胞 ,观察其生长规律 ,检测分裂指数及生长曲线。用胶体金、DAPI及Brdu标记液分别标记细胞 8、2 4、48h ,测标记后细胞的生长曲线及标记率。结果表明分离所得肌卫星细胞纯度 95 %以上 ,梭形 ,培养第 5天细胞排列出现方向性 ,并开始融合成肌管 ,第 3～ 5天增殖旺盛 ,5代以内生长较快。三种标记方法对肌卫星细胞有不同程度毒性。胶体金标记法毒性最小 ,标记率 10 0 % ;DAPI标记细胞率为 10 0 % ;Brdu毒性最大且标记率仅为 10 %。本实验方法简单、快速 ,所得肌卫星细胞纯度高 ,性能好。胶体金标记法适合于电镜研究 ,DAPI标记法适合于光镜研究 。

db/db自发性糖尿病小鼠睾丸EGFR,c-Fos表达研究

目的 :研究表皮生长因子受体 (Epithelium growthfactorreceptorEGFR)和原癌基因c Fos在db/db(diabetesobese)自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞的表达变化。方法 :免疫组化ABC法。结果 :EGFR在精母细胞、精子细胞、支持细胞和间质细胞均呈阳性反应。c Fos免疫阳性细胞主要为精母细胞、圆形精子细胞和变形期精子 ,间质血管内皮细胞也有强阳性表达 ,另外 ,少数支持细胞、管周肌样细胞也有着色。以上两组指标 ,随糖尿病病程进展 (糖尿病组 )及年龄增加 (对照组 ) ,其阳性率呈现明显下降趋势 ,并且每年龄段糖尿病组阳性率明显低于相应正常对照组。结论 :糖尿病睾丸中EGFR的减少使EGF与受体结合减少 ,第二信使cAMP和“第三信使”c Fos均减少 ,以致核转录和核基因表达减弱 ,最终表现为糖尿病生殖细胞增殖减弱 ,生殖功能障碍。

叔丁基对苯二酚减轻高糖诱导的肾小球系膜细胞氧化应激损伤

目的研究叔丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,tBHQ)对高糖培养的小鼠肾小球系膜细胞株(mouse mesang-ial cells,MMCs)核因子NF-E2相关因子(nuclear factor ery-throid 2-related factor 2,Nrf2)表达及氧化应激的影响,探讨tBHQ保护糖尿病肾脏的部分机制。方法 MMCs随机分为4组,正常糖对照组(C组)、高糖组(HG组)、高糖+溶剂对照组(HG+D组)、高糖+tBHQ预处理组(HG+t组),于高糖刺激48 h后收集细胞及上清液,2’7’-二氯荧光素探针(2’,7’-Dichlorofluorescin diacetate,2.7-DCFH-DA)检测细胞内活性氧族(reactive oxygen species,ROS);硫代巴比妥法检测细胞内丙二醛(malondialdehyd,MDA)浓度;流式细胞学检测细胞增殖;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosor-bent assay,ELISA)检测细胞上清液转化生长因子-β1(trans-forming growth factor-β1,TGF-β1)水平;Western blot及反转录-多聚酶链反应(reverse transcription polymerse chain reac-tion,RT-PCR)检测系膜细胞Nrf2、血红素氧化酶-1(hemeoxygenase-1,HO-1)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-glutamyl-cysteine synthethase,γ-GCS)的表达水平。结果①高糖刺激使MMCs的ROS、MDA、细胞增殖及细胞上清液TGF-β1水平明显升高,而tBHQ预处理可以使以上指标明显下降。②tBHQ预处理可以增加高糖刺激下系膜细胞内Nrf2在细胞内和细胞核的表达以及细胞内HO-1、γ-GCS蛋白和mR-NA的表达水平。结论 tBHQ减轻了高糖诱导的肾小球系膜细胞的氧化应激损伤,其作用机制可能是通过激活Nrf2-ARE信号通路,进而增强抗氧化蛋白、HO-1、γ-GCS的表达而实现的。

Nrf2/ARE信号通路及其调控的抗氧化蛋白

机体在应对活性氧(reactive oxygen species,ROS)损害时形成了一套复杂的氧化应激应答系统,当暴露于ROS时,机体自身能诱导出一系列保护性蛋白,以缓解细胞所受的损害。这一协调反应是由这些保护性基因上游调节区的抗氧化反应元件(antioxidant responsive element,ARE)来调控的。而近年来的研究发现,核因子NF-E2相关因子(nuclear fac-tor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)是ARE的激活因子。Nrf2是外源性有毒物质和氧化应激的感受器,在参与细胞抗氧化应激和外源性有毒物质诱导的主要防御机制中发挥重要的作用。Nrf2-ARE通路是迄今为止发现的最为重要的内源性抗氧化应激通路。

外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化

目的:构建人Nkx2-5基因融合绿色荧光蛋白真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,探讨外源性Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化的作用。方法:以真核表达质粒pEFSA-HA-Nkx2-5为模板,PCR扩增得到人Nkx2-5基因,将目的片段亚克隆到pEGFP-N1载体,鉴定正确。将重组质粒pEGFP-N1-Nkx2-5以脂质体法转染P19细胞,G418筛选2周,聚集4d,贴壁培养16d。以免疫细胞化学检测desmin、α-sarcomeric actin和cardiac Troponin T(cTnT)的表达。结果:将Nkx2-5基因正确插入pEGFP-N1载体,外源表达Nkx2-5基因可使P19细胞在无诱导剂、聚集条件下表达desmin、α-sarcomeric actin和cTnT蛋白。结论:成功构建真核表达质粒pEGFP-N1-Nkx2-5,外源表达Nkx2-5基因诱导P19细胞向心肌分化。

L-精氨酸-NO途径抑制血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大反应

目的探讨L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)对心肌细胞血管紧张素Ⅱ受体(angiotensin Ⅱ receptor,ATR)及丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)表达的影响,进而阐述L-Arg对病理性心肌肥大的影响作用及相关机制。方法用血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,ATⅡ)、ATR抑制剂、L-Arg和(或)L-NAME(L-硝基精氨酸甲酯)分别作用于心肌细胞,然后以[3H]-亮氨酸参入法检测细胞蛋白合成速率、比色法检测一氧化氮(NO)生成量、RT-PCR及Western blot检测ATR及p38MAPK的表达水平。结果①给予L-Arg可缓解ATⅡ引起的心肌细胞NO合成量下降,减弱血管紧张素Ⅱ-1型受体(angiotensin receptor type1,ATR1)表达及下调p38MAPK蛋白磷酸化水平,并降低心肌细胞蛋白合成速率给予ATⅡ或L-Arg均未影响血管紧张素Ⅱ-2受体(angiotensin receptor type 2,ATP2)的表达水平;②心肌ATR1表达水平及p38MAPK蛋白磷酸化水平均与NO合成量之间存在线性负相关。多元逐步回归分析显示在ATR1与ATR2中,仅ATR1的表达水平与p38MAPK蛋白磷酸化水平之间存在回归关系。结论①L-Arg可致心肌细胞NO合成量增加,后者可抑制ATR1介导的p38MAPK蛋白磷酸化水平上调,进而抑制心肌细胞肥大反应;②ATR2未参与上述过程。