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上调miR-21对长波紫外线诱导光损伤模型人皮肤成纤维细胞的生物学作用
1
作者
齐立攀
赵亚平
+2 位作者
刘竞
闫军飞
庞利霞
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期631-638,共8页
目的探究上调微小RNA-21(miR-21)对长波紫外线(UVA)诱导光损伤模型人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)生物活性、氧化损伤及磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法将HSF...
目的探究上调微小RNA-21(miR-21)对长波紫外线(UVA)诱导光损伤模型人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)生物活性、氧化损伤及磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法将HSF培养至对数生长期,分为空白对照组、UVA组(使用UVA照射细胞7 d)、UVA+NC组[使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21阴性对照(NC)慢病毒载体]、UVA+miR-21模拟物(mimics)组(使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21 mimics慢病毒载体)、UVA+miR-21 mimics+PI3K抑制剂组(使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21 mimics慢病毒载体和50μmol/L PI3K抑制剂LY294002)、UVA+miR-21 mimics+PI3K激活剂组(使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21 mimics慢病毒载体和50μmol/L PI3K激活剂740Y-P)。各组均培养24 h。荧光定量PCR法检测各组HSF miR-21表达水平;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞仪分别检测HSF活力、凋亡;β-半乳糖苷酶染色法观察HSF衰老情况;酶联免疫吸附法检测HSF中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;蛋白印迹法检测HSF中PTEN/PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果与空白对照组相比,UVA组、UVA+NC组HSF中miR-21表达水平、活力、SOD含量、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),凋亡率、衰老细胞比例、MDA含量、PTEN蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与UVA组和UVA+NC组相比,UVA+miR-21 mimics组HSF中miR-21表达水平、活力、SOD含量、PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05),凋亡率、衰老细胞比例、MDA含量、PTEN蛋白表达水平显著降低(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002可逆转miR-21 mimics对UVA诱导的HSF损伤的保护作用(P<0.05);PI3K激活剂740Y-P可增强miR-21 mimics对UVA诱导的HSF损伤的保护效果(P<0.05)。结论上调miR-21可增强UVA诱导光损伤模型HSF活力,抑制其凋亡、衰老和氧化损伤,可能与调控PTEN/PI3K/AKT信号通路表达有关。
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关键词
微小RNA-21
长波紫外线
人皮肤成纤维细胞
生物活性
氧化损伤
PTEN/PI3K/AKT通路
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职称材料
题名
上调miR-21对长波紫外线诱导光损伤模型人皮肤成纤维细胞的生物学作用
1
作者
齐立攀
赵亚平
刘竞
闫军飞
庞利霞
机构
河北医科大学
附属
人民医院
(
石家庄市
人民医院
)
整形
美容
科
出处
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第6期631-638,共8页
基金
河北省医学科学研究课题计划项目(20200134)。
文摘
目的探究上调微小RNA-21(miR-21)对长波紫外线(UVA)诱导光损伤模型人皮肤成纤维细胞(human skin fibroblasts,HSF)生物活性、氧化损伤及磷酸酶和张力蛋白同源物(PTEN)/磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路的影响。方法将HSF培养至对数生长期,分为空白对照组、UVA组(使用UVA照射细胞7 d)、UVA+NC组[使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21阴性对照(NC)慢病毒载体]、UVA+miR-21模拟物(mimics)组(使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21 mimics慢病毒载体)、UVA+miR-21 mimics+PI3K抑制剂组(使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21 mimics慢病毒载体和50μmol/L PI3K抑制剂LY294002)、UVA+miR-21 mimics+PI3K激活剂组(使用UVA照射细胞7 d,加入miR-21 mimics慢病毒载体和50μmol/L PI3K激活剂740Y-P)。各组均培养24 h。荧光定量PCR法检测各组HSF miR-21表达水平;细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、流式细胞仪分别检测HSF活力、凋亡;β-半乳糖苷酶染色法观察HSF衰老情况;酶联免疫吸附法检测HSF中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;蛋白印迹法检测HSF中PTEN/PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果与空白对照组相比,UVA组、UVA+NC组HSF中miR-21表达水平、活力、SOD含量、PI3K、磷酸化AKT(p-AKT)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),凋亡率、衰老细胞比例、MDA含量、PTEN蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与UVA组和UVA+NC组相比,UVA+miR-21 mimics组HSF中miR-21表达水平、活力、SOD含量、PI3K、p-AKT蛋白表达水平显著升高(P<0.05),凋亡率、衰老细胞比例、MDA含量、PTEN蛋白表达水平显著降低(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002可逆转miR-21 mimics对UVA诱导的HSF损伤的保护作用(P<0.05);PI3K激活剂740Y-P可增强miR-21 mimics对UVA诱导的HSF损伤的保护效果(P<0.05)。结论上调miR-21可增强UVA诱导光损伤模型HSF活力,抑制其凋亡、衰老和氧化损伤,可能与调控PTEN/PI3K/AKT信号通路表达有关。
关键词
微小RNA-21
长波紫外线
人皮肤成纤维细胞
生物活性
氧化损伤
PTEN/PI3K/AKT通路
Keywords
MicroRNA-21
Ultraviolet A
Human skin fibroblasts
Biological activity
Oxidative damage
PTEN/PI3K/AKT pathway
分类号
R758.1 [医药卫生—皮肤病学与性病学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
上调miR-21对长波紫外线诱导光损伤模型人皮肤成纤维细胞的生物学作用
齐立攀
赵亚平
刘竞
闫军飞
庞利霞
《中国皮肤性病学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2023
0
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