土壤中解磷、解钾微生物研究进展

为了研究土壤中解磷微生物和解钾微生物对土壤中无效磷和无效钾的分解和释放作用,归纳和总结了土壤中解磷微生物和解钾微生物的种类,对解磷微生物和解钾微生物的解磷机理和解钾机理进行了探讨,同时总结了解磷解钾微生物的应用效果,从而为解磷解钾微生物在农业生产上的应用提供理论依据.

天然抗肿瘤药物鬼臼毒素的生物转化研究

[目的]筛选能够转化鬼臼毒素的菌株,得到其转化产物并鉴定结构,以期为高抗肿瘤活性天然药物的获取和研究奠定基础。[方法]采用微生物分批转化法对鬼臼毒素进行结构修饰,利用薄层色谱法和高效液相色谱法对鬼臼毒素及其转化产物进行检测,筛选出能够转化鬼臼毒素的菌株,将其中一株能够转化鬼臼毒素的菌株进行扩大培养,对其发酵液进行乙酸乙酯萃取、常规硅胶柱层析分离提取转化产物,应用现代波谱技术鉴定其转化产物结构。[结果]通过转化鬼臼毒素的研究,筛选出能转化鬼臼毒素的菌株为BS.Str-1、BS.Str-2、BS.Str-3、BS.Str-7、BS.Str-18、BS.Str-21和BS.Str-29;对BS.Str-21扩大培养,提取分离得到唯一的转化产物,经鉴定为苦鬼臼毒素。[结论]该研究表明通过生物转化的方法可以获得鬼臼毒素衍生物,该结果为高抗肿瘤活性天然药物的获取奠定了基础。

BDNF基因工程细胞对帕金森大鼠纹状体多巴胺及其代谢物影响的研究

目的:观察经侧脑室移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓间充质干细胞(MSCs)对帕金森病(PD)大鼠纹状体多巴胺(DA)及代谢产物的影响。方法:采用电穿孔法将pIRESneo-EGFP-BDNF转染至骨髓MSCs;制备PD大鼠模型,随机分为Sham组,PD组,MSCs组,脑源性神经生长因子(BDNF)组,经侧脑室移植MSCs或pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓MSCs,术后2周,4周,8周,腹腔注射阿朴吗啡(APO)诱导PD大鼠旋转行为;应用高效液相色谱测定各组大鼠纹状体内多巴胺(DA)、高香草酸(HVA)及二羟苯乙酸(DOPAC)。结果:移植术后2周,4周,8周BDNF组、MSCs组大鼠与PD组比较旋转次数明显减少(P<0.05),以BDNF组改善更为明显。移植细胞干预PD模型8周后BDNF组、MSCs组大鼠纹状体DA、HVA、DOPAC较PD组明显提高(P<0.01),以BDNF组更为显著。结论:经侧脑室移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰的骨髓MSCs干预PD大鼠模型,显著降低PD大鼠纹状体内DA代谢率,提高DA水平,改善PD大鼠的行为能力。

茶树菇液体发酵条件研究

以茶树菇为试材,采用液体摇瓶培养法,通过单因素试验、正交实验,以菌丝体生物量为主要指标,对茶树菇液体发酵培养基配方及培养条件进行优化。结果表明:最适宜的培养基配方为葡萄糖3.0%、豆饼粉1.0%、酵母膏0.2%、MgSO_4·7H_2O 0.10%、KH_2PO_40.10%。适宜的茶树菇液体培养条件为起始pH 6.0~7.0、培养温度25~28℃、摇床转速150~180r·min^(-1)。

移植脑源性神经生长因子修饰骨髓间充质干细胞对帕金森病大鼠模型治疗作用的实验研究

目的:观察移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)对帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)大鼠的研究。方法 :将pEGFP(N1)-BDNF质粒进行改造与pIRESneo相连结,构建高拷贝质粒pIRESneo-EGFP-BDNF,采用电穿孔法转染骨髓MSCs;制备PD大鼠模型,随机分为假手术组、PD组、MSCs组、脑源性神经生长因子(brain-derivedneurotrophic factor,BDNF)组,经侧脑室移植MSCs或pIRESneo-EGFP-BDNF修饰骨髓MSCs术后2、4、8周,腹腔注射阿朴吗啡诱导PD大鼠旋转行为;采用Western blot方法测定中脑黑质BDNF、酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)蛋白的含量。结果:双酶切鉴定pIRESneo-EGFP-BDNF构建成功;移植术后2、4、8周MSCs组和BDNF组大鼠与PD组比较旋转次数明显减少(P<0.05),以BDNF组较MSCs比较改善更为明显(P<0.05);移植细胞干预PD模型8周后中脑黑质BDNF、TH蛋白的含量,BDNF组较MSCs组、PD组明显增高(P<0.05)。结论:经侧脑室移植pIRESneo-EGFP-BDNF修饰的骨髓MSCs能明显改善PD大鼠的行为能力,显著提高中脑黑质BDNF、TH蛋白的含量。

地衣芽孢杆菌2709与基因工程菌BD105原生质体融合的研究

本实验选用碱性蛋白酶生产菌地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)2709和工程菌枯草芽孢杆茵(B.Subtilis)BD105(pDW_2),在聚乙二醇的诱导下进行原生质体融合.报道了2709与BD105的原生质体的形成、再生与融合,融合子A有氯霉素抗性、能在基本培养基上生长且遗传稳定.初步检测,融合子A中含有质粒,发酵酶活高于亲本株近50%.

甘蔗渣栽培茶树菇研究

为筛选出适合甘蔗渣栽培的茶树菇优良菌株,以菌丝长速和生物转化率为主要指标,对以甘蔗渣作为主要栽培料的茶树菇栽培培养基进行了优化。结果表明:茶-3为甘蔗渣栽培茶树菇的优良菌株,配方B即甘蔗渣60%,杂木屑20%,麸皮15%,豆粕3%,石灰2%是栽培茶树菇较为适宜的栽培配方。

金福菇栽培培养基的优化研究

以金福菇为试验材料,以菌丝生长速度和生物转化率为主要指标,对金福菇的栽培培养基进行了优化试验。试验结果表明,配方B即木屑39%、玉米芯20%、棉籽皮30%、麸皮10%、石灰1%是栽培金福菇较为适宜的栽培配方。

花生接种胶冻样类芽孢杆菌对土壤微生物群落、氨化细菌、固氮菌及产量的影响

针对花生连作对花生生长和产量的不利影响,通过田间小区试验,研究了花生接种胶冻样类芽孢杆菌后土壤中的细菌、放线菌和真菌,尤其是根际氨化细菌和固氮菌的的数量变化,同时分析了胶冻样类芽孢杆菌对花生生育性状及产量的影响。结果表明:土壤中细菌、放线菌、真菌的数量随着花生生育期的延长,呈下降趋势;随着胶冻样类芽孢杆菌接种数量的增加,在花生不同生育期土壤中细菌和放线菌的数量有不同程度的提高,而真菌数量下降;未接种胶冻样类芽孢杆菌的花生在苗期和开花期无法检出氨化细菌和固氮菌,施用胶冻样类芽孢杆菌400 g/亩(1亩=667 m^(2))的处理在整个花生生育期都可检出;花生的株高、侧枝长度及产量均呈现随胶冻样类芽孢杆菌施用量的增加而递增的趋势,说明接种胶冻样类芽孢杆菌后不仅可减少施肥量,而且可提高花生产量,增产增收效益明显。

甲壳动物免疫力综合指标定量研究

通过分析当前甲壳动物免疫力研究指标,指出目前对免疫力进行评判存在的2个缺陷:1)不能综合反映免疫力水平变化;2)采用不同评判指标得到的结论无法进行科学客观比较.在此基础上,指出免疫力是一个综合指标,并具体定义了免疫力综合指数,规定了计算方法,明确了2种计算权重的步骤方法,即层次分析法和主成分分析法.通过对文献数据的实际计算,阐明了计算方法的具体步骤,得到了免疫力综合指数,以定量数据表明实验结果对免疫力的影响,为客观评价所采取的实验措施提供量化结果.

胶冻样类芽孢杆菌菌粉的研制及功能菌株的存活性研究

针对应用较为广泛且增产效果稳定的胶冻样类芽孢杆菌在实际生产过程中存在的发酵有效活菌数低、液体制剂运输不便及保存周期短等问题,筛选出耐高渗透压胶冻样类芽孢杆菌HB-02菌株,并利用该菌株芽孢耐高压、耐高温等特点,采用喷雾干燥方法研制出胶冻样类芽孢杆菌菌粉。试验研究了该菌株发酵液的喷雾干燥处理工艺,结果在入料流量0.75t/h、通风量20m^3/min、进风温度150℃条件下,3批次喷雾干燥菌粉平均含菌量达到265.1×10^8cfu/g,收率达到81.3%,成功研制出高含量胶冻样类芽孢杆菌HB-02菌株菌粉。通过该胶冻样类芽孢杆菌在不同复合微生物肥料中的存活性研究,结果表明在w(N+P2O5+K2O)达到30%、室温保存120d的情况下,胶冻样类芽孢杆菌在复合微生物肥料中的存活率为89.8%,为该菌株与化肥的有机结合以生产复合微生物肥料提供了理论依据。

柿木屑栽培毛木耳研究

为使柿木屑在毛木耳栽培上得到合理开发利用,以菌丝长速和生物转化率为主要指标,对以柿木屑作为主要栽培料的毛木耳栽培培养基进行了优化试验。结果表明:毛木耳三号菌株是栽培毛木耳的优良菌株,3号培养基(柿木屑60%,玉米芯20%,麸皮18%,石灰1%,石膏1%)是作为栽培毛木耳较为适宜的栽培配方。

臭椿珍稀类型方干椿的初步研究

对臭椿的一个珍稀类型方干椿其形态进行了描述，并比较了它与一般臭椿植株的ＰＯＤ和ＥＳＴ同工酶增差异，发现ＰＯＤ同工酶在“方干椿”的不同组织表达一致且稳定；“方干椿”高体快繁成功，为保存这一植物资源提供了保障。

黄瓜灰霉病拮抗菌的筛选鉴定及其抑菌特性研究

从石家庄地区多个蔬菜大棚的根际土壤分离筛选到一株高效生防菌F1-2,对黄瓜灰霉病菌的抑菌圈直径高达33mm。根据菌株F1-2的形态特征、生理生化特性以及16SrDNA序列对其进行鉴定,初步确定为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。采用生长速率法对拮抗菌的抑菌谱进行测定,其对所选的16种病原菌均有很好的抑制作用。实验还对拮抗菌F1-2的抑菌特性进行了研究,菌株连续传代至10代抑菌性能保持不变,菌株的发酵液对热和酸碱都比较稳定。该菌株的代谢产物具有广谱抑菌活性和较强的稳定性,具有开发成为灰霉病生防制剂的潜力。

预处理对小麦成熟胚愈伤组织形成的影响

研究了种子预处理及生长素质量浓度对小麦成熟胚愈伤组织形成及种子碳水化合物和蛋白质降解的影响。结果表明：１）在２，４－Ｄ质量浓度为８ｍｇ／Ｌ时发芽率最低，出愈率最高。２）低温处理促进冀麦３６种子萌发，抑制其愈伤组织的形成；而对河农３２６种子萌发及愈伤组织形成无明显影响；引起河农３２６种子淀粉酶、蛋白酶活性显著增加。３）ＣａＣｌ２处理促进冀麦３６、河农３２６种子萌发，但抑制其愈伤组织形成，使河农３２６种子淀粉酶活性显著增加。４）ＰＥＧ处理促进冀麦３６、河农３２６种子萌发，抑制河农３２６愈伤组织形成，但对冀麦３６愈伤组织形成无明显影响，并明显引起河农３２６种子淀粉酶、蛋白酶活性升高。

六味地黄发酵液的抗瘤和减毒作用

目的 :探讨六味地黄发酵液的抗肿瘤和对化疗药物的减毒作用。方法 :采用小鼠腋下接种肿瘤细胞法观察抗肿瘤作用 ,采用环磷酰胺法造成白细胞减少 ,观察六味地黄发酵液对外周血白细胞数的影响。结果 :六味地黄发酵液对小鼠肝癌H2 2 的生长具有显著抑制作用 (P <0 .0 5) ,而六味地黄煎剂无明显抑瘤作用 ;六味地黄发酵液和六味地黄煎剂对环磷酰胺造成的小鼠骨髓抑制 ,均有升高外周血白细胞的作用 (P <0 .0 1 )。结论

水杨酸对小麦愈伤组织CAT和POD同工酶的影响

分别用浓度为 5或 1 0 mg/ L的水杨酸处理河农 859小麦愈伤组织 ,发现它具有抑制 POD和 CAT活性以及小麦愈伤组织胚性细胞形成的作用 ,但 5mg/ L的水杨酸也诱导一种

用终止剂改进超氧化物歧化酶邻苯三酚测活法

以二硫苏糖醇（ＤＴＴ）或Ｌ－抗坏血酸（ＶｉｔＣ）为终止剂改进的经典邻苯三酚法测定超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性。反应体系：５０ｍｍｏｌ／Ｌ邻苯三酚，ｐＨ８．２０，总体积９ｍｌ，２５℃，加一滴ＤＴＴ（１００ｍｍｏｌ／Ｌ）或ＶｉｔＣ（５％），约５０μｌ，终止自氧化反应。终止后，反应体系的４２０ｎｍ光吸收在ｌｈ内保持恒定。终止剂法的邻苯三酚自氧化率及酶活测定灵敏度与经典法相近，一个酶活单位相当于纯ＳＯＤ１００μｇ／Ｌ。

蚯蚓纤溶酶的成分分析

蚯蚓纤溶酶（ｅａｒｔｈｗｏｒｍｆｉｂｒｉｎｏｌｙｔｉｃｅｎｚｙｍｅｓ，ＥＦＥ）是从蚯蚓体内提取的一类纤维蛋白水解酶，是一种新的溶栓药．利用亲和层析技术，自蚯蚓匀浆液一步提取蚯蚓纤溶酶，并对该酶的成分进行了分析．实验表明，蚯蚓纤溶酶是一组非均一的糖蛋白，含糖量为５％左右，以中性已糖为主；等电点（ｐＩ）在４．０以下；富含Ａｓｐ，而Ｍｅｔ、Ｔｒｐ和Ｌｙｓ含量很少；ｌｍｇ蚯蚓纤溶酶相当于２５０～３００尿激酶单位．