环丙沙星、氧氟沙星同时与牛血清白蛋白分子作用的荧光光谱

在pH=7.40的水溶液中,环丙沙星(CPFX)、氧氟沙星(OFLX)能够猝灭牛血清白蛋白(BSA)的荧光。当两种药物共存时BSA荧光被进一步猝灭。据此建立了利用荧光发光光谱法进行喹诺酮类药物CPFX与OFLX间相互作用的研究。结果表明:药物间存在相互作用,使药物与蛋白间的结合常数减小、结合稳定性下降,游离型药物含量增加,造成药效增强;药物对蛋白荧光的猝灭属于静态猝灭,药物与蛋白结合位点数约为1。根据Frster非辐射能量转移理论,确定了药物与蛋白之间的结合距离r<7nm,属于非辐射能量转移。药物间的相互作用使r值增加,结合距离增大。同步荧光光谱研究表明药物间的相互作用对蛋白构象产生影响,使蛋白质分子伸展,疏水性降低。

曙红-中性红荧光能量转移抑制法测定肝素

在pH6．65的Britton-Robinson（B．R）缓冲溶液中，酸性染料曙红（EY）与碱性染料中性红（NR）之间由于静电吸引而能够发生有效的能量转移，使得能量受体NR荧光增强，同时能量给体EY的荧光猝灭。而肝素的加入对该荧光体系间的能量转移产生了明显的抑制作用，随肝素量的增加EY荧光依次增强，由此建立了测定微量肝素的新方法。结果表明，肝素在0．1～2．0mg／L范围内与EY的荧光增强程度呈良好的线性关系。方法检出限0．071mg／L。用于肝素钠注射液中肝素钠效价的测定，6次平行测定相对标准偏差1．4％～3．6％，回收率95．2％～105．3％。

荧光光谱在研究氯霉素与沙拉沙星间拮抗作用中的应用

氯霉素(CHL)和沙拉沙星(SLFX)均能够猝灭牛血清白蛋白(BSA)的荧光.当两种药物共存时使BSA荧光进一步猝灭,据此利用荧光光谱法研究了氟喹诺酮类药物SLFX与CHL间相互作用.结果表明:两种药物间存在拮抗作用,使药物与蛋白的结合稳定性增加,致使能够转运到作用部位产生药理效应的游离型药物含量减少,造成药效降低;药物对蛋白荧光的猝灭属于静态猝灭;药物与蛋白结合位点数约为1.根据F觟rster非辐射能量转移理论,确定了药物与蛋白之间的结合距离r,药物间拮抗作用的存在使r值降低,结合距离减小.同步荧光光谱研究表明,药物间的拮抗作用对蛋白质构象产生影响,使蛋白质分子伸展,疏水性降低.

微萃取瓶富集-高效液相色谱法测定海水中多环芳烃

采用自制微萃取瓶富集-反相高效液相色谱法同时测定海水中的萘、菲、荧蒽。实验选择DiamonsilC18(250×4.6mmi.d.,5μm)色谱柱,体积比为88∶12的甲醇-水作流动相,流速1.0mL/min,检测波长280nm,柱温30℃。最佳萃取条件:400mL水样,300μL正辛烷作萃取剂,NaCl浓度100g/L,萃取时间15min。在10～5×104μg/L范围内,萘、菲、荧蒽呈现良好线性关系(相关系数均大于0.9997)。萘、菲、荧蒽检出限分别为13.3、13.3、7.0ng/L;加标回收率分别为94.50%、94.05%、92.59%;相对标准偏差分别为1.60%、1.82%、0.90%。

微萃取瓶富集-液相色谱法测定水中痕量邻苯二甲酸酯

A liquid-liquid microextraction/high performance liquid chromatography using special microextraction flask was used for the determination of phthalate esters in water.The extraction solvent was toluene.The effect of experimental conditions on response such as different extraction solvents and salt concentration were optimized.The method detection limits of dimethyl phthalate,diethyl phthalate and dibutyl phthalate were 0.45,0.38 and 0.64 μg/L,respectively.The average recovery was 72.46% to 90.03%.The RSD was 2.72% to 3.71%.It showed that the extraction method was very simple that could be used for concentrating trace phthalate esters effectively in water.

蛋白质的曙红Y-中性红逆向能量转移荧光法测定

在pH2.35的B-R缓冲溶液中,酸性染料曙红Y(EY)与碱性染料中性红(NR)之间由于静电吸引能够发生有效的能量转移,使能量受体NR荧光增强,能量给体EY的荧光猝灭。在该体系中加入人血清白蛋白(HSA),由于竞争作用使得HSA的加入破坏了EY-NR间的能量转移,产生了明显的逆向反应,并且生成HSA-EY络合物,利用该络合物的荧光增加强度与HSA含量间的线性关系建立了一种测定微量血清蛋白的新方法。结果表明,血清蛋白工作曲线线性范围为0.6～12.0mg/L;方法检出限为0.25mg/L;6次平行测定相对标准偏差为1.94%～4.58%;回收率为96%～105%。该方法的稳定性好、选择性高,直接用于人血清试样中总蛋白含量的测定,实验结果与常用的双缩脲法基本一致。

微萃取瓶富集-液相色谱法测定水中痕量壬基酚

应用自制微萃取瓶,采用异辛烷作萃取剂,液-液微萃取方法富集水中壬基酚,反相高效液相色谱法测定。考察了不同萃取剂、盐析效应和pH对萃取效果的影响。壬基酚在水中的加标回收率为91.77%,方法检出限为0.525μg/L,相对标准偏差为1.82%。该萃取方法可有效富集水中痕量壬基酚。

光谱探针猩红S与牛血清白蛋白结合的发光光谱(英文)

利用荧光光谱和紫外吸收光谱,详细研究了不同温度下猩红S(PS)与牛血清白蛋白(BSA)的结合反应,发现PS对BSA的内源性荧光具有较强的猝灭作用,其猝灭机理属于静态猝灭,由此求得PS与BSA间的结合常数、结合位点数及热力学参数等。结果表明:PS与BSA之间形成了1:1稳定复合物,它们之间的作用力主要是静电引力。根据Frster非辐射能量转移理论,确定了PS与BSA之间的结合距离r<7nm。同步荧光光谱研究表明:PS对BSA构象发生了影响,使BSA酪氨酸残基所处环境的极性减弱疏水性增强而色氨酸残基不受影响。利用对血清蛋白具有特异性结合的竞争试剂确定了PS在BSA的键合位点为IIA亚区的siteI,证明PS与BSA也存在特异性结合,PS可以用作新的位置探针替代竞争试剂来研究小分子与蛋白的结合位置。

固定化乳酸脱氢酶活性的X射线微区分析

利用X射线微区分析 ,对吸附法得到的固定化乳酸脱氢酶的活性进行了分析;以乳酸为底物,铁氰化钾及铜离子作为捕捉剂,底物经乳酸脱氢酶及氧化型辅酶NAD +的作用下催化产生丙酮酸,反应生成的还原性辅酶NADH使铁氰化物还原为亚铁氰化物,后者和铜离子反应产生具有高电子密度的亚铁氰化铜沉淀,可以确定固定化乳酸脱氢酶的催化活性部位 ;结果表明 ,以合成出的大孔吸附树脂为固定化酶载体 ,其酶活性较高 ,活性乳酸脱氢酶分布较均匀 ,得到了固定化乳酸脱氢酶的活性定位的最佳条件 ,并对不同结构载体固定化酶活性进行了研究。

超支化聚酯分子质量及其分布的测定

采用凝胶渗透色谱-宽分布标样校正法测定超支化聚合物分子质量及分布.并和普适校正法 进行了比较,方法相对误差<8％,方法简便、快速、重现性好。