雌激素α、β受体在大鼠视网膜组织的免疫组织化学定位

目的探讨雌激素α、β受体(ERα、ERβ)在大鼠视网膜组织的定位和分布。方法22只SD雌性大鼠颈椎脱臼处死,取眼球做常规石蜡包埋,连续切片,采用免疫组织化学方法显示ERα、ERβ在视网膜组织的表达,并设正常大鼠子宫作阳性对照;PBS代替一抗作阴性对照。同时采用放射免疫分析方法检测大鼠血清雌二醇的浓度。结果ERα在少数标本的视网膜色素上皮、节细胞层和神经纤维层呈阳性表达,其他区域则呈阴性反应。ERβ在视网膜组织各区域分布有着明显差异,以视网膜色素上皮、节细胞层和神经纤维层阳性表达为主,内丛状层次之,其他区域阳性表达较少。ERα、ERβ免疫阳性反应物呈颗粒状,定位在视网膜色素上皮的细胞质以及神经节细胞的细胞质和细胞核或弥散分布在相关的视网膜区域内。ERβ在视网膜色素上皮、神经节细胞层和神经纤维层阳性表达率明显高于ERα,经统计学分析两者间有显著性差异(P<0.05)。正常大鼠血清雌二醇水平经检测含量为22.13±3.54pg/ml。结论大鼠视网膜组织以表达ERβ为主,ERβ主要分布在视网膜色素上皮层、节细胞层、神经纤维层,提示雌激素通过ERβ的介导直接对视网膜功能起调控作用;同时为进一步研究雌激素与视网膜疾病之间的关系提供了分子生物学基础。

卵巢切除大鼠睑板腺雌激素α、β受体表达与组织病理学改变的相关性

目的探讨卵巢切除后大鼠雌激素α、β受体(ERα、ERβ)表达与睑板腺组织病理学改变的相关性。方法取48只成年SD雌性大鼠,随机分为正常对照组、假手术组和去势组(去卵巢组),每组16只,12周后处死大鼠,免疫组织化学检测睑板腺组织ERα和ERβ表达变化,光学显微镜和透射电子显微镜观察睑板腺组织学改变,应用放射免疫方法检测血清雌二醇水平。结果去势组ERα表达与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05),但ERβ表达弱于正常对照组(P<0.01)。正常对照组ERα/ERβ表达比值为1.06,而去势组ERα/ERβ表达比值为1.83。光镜下观察去势组睑板腺腺泡组织结构排列紊乱,细胞体积变小,腺泡呈萎缩状态。电镜下观察去势组睑板腺腺泡上皮的基底细胞体积变小,细胞核形态变异多样,呈不规则形、肾形或长杆状;过渡细胞的体积变小,脂滴减少,线粒体肿胀,线粒体嵴结构破坏,呈空泡化或云雾状改变,并可见大量嗜锇物质形成的圆形或不规则形电子致密的板层小体或髓鞘样结构。结论卵巢切除后睑板腺组织病理学改变可能与ERβ表达减弱或ERα/ERβ比值失调有关。

雌激素受体β_1亚型表达与甲状腺肿瘤微血管密度的相关性及其意义

目的探讨雌激素受体1β(ER1β)在不同组织类型甲状腺癌组织中的表达差异,分析ERβ1表达与肿瘤组织微血管密度(MVD)的相关性。方法研究样本取自2004年1月-2009年12月临床资料完整的存档标本163例,其中滤泡源性分化型甲状腺癌107例,包括乳头状腺癌(PTC)59例和滤泡状腺癌(FTC)48例;甲状腺腺瘤56例。另取腺瘤旁经病理证实为正常的甲状腺组织10例。采用免疫组化法检测ERβ1和CD31表达,以CD31阳性结果计算组织MVD值。观察不同甲状腺组织中ERβ1和CD31的表达及定位;比较不同病理类型甲状腺癌组织中ERβ1的表达水平,以及甲状腺癌患者颈淋巴结转移与ER1β表达、MVD的相关性;分析ER1β表达与MVD的相关性。结果 CD31主要表达于各种甲状腺组织的血管内皮细胞,ERβ1主要表达于滤泡源性细胞和血管内皮细胞。在正常甲状腺、甲状腺腺瘤和甲状腺癌组织中,ERβ1阳性表达率分别为80.0%、48.2%和29.8%(P<0.05),表达灰度值分别为116.22±14.231、30.08±17.511、46.26±18.13(P<0.05)。在甲状腺癌组织中,转移率高、浸润性强的组织类型ERβ1表达较弱,MVD值较高,有淋巴结转移的甲状腺癌组织MVD值显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。甲状腺癌ERβ1阳性者的MVD值显著低于ER1β阴性者(P<0.05),Spearman等级相关分析显示,ER1β表达与MVD存在显著负相关(r=-0.993,P<0.0001)。结论 ER1β表达与甲状腺癌的组织类型、淋巴结转移及MVD有关,ERβ1表达下调可促进甲状腺癌血管生成。

Bcl-2和Bax在去卵巢大鼠睑板腺腺泡上皮表达的研究

目的探讨雌激素水平降低致睑板腺功能障碍的发病机制。方法选用30只雌性青春期SD大鼠,随机分为对照组和去势组,每组大鼠15只。分别于术前和术后24周应用放射免疫方法检测血清雌二醇水平;采用免疫组织化学方法检测睑板腺腺泡上皮中Bcl-2和Bax的表达。结果 (1)去势组术后24周血清雌二醇浓度明显低于对照组(P<0.01);(2)去势组睑板腺腺泡上皮Bcl-2阳性细胞表达率明显低于对照组(P<0.01),而Bax阳性细胞表达率明显高于对照组(P<0.01)。结论 Bcl-2和Bax表达异常可能是雌激素水平降低致睑板腺功能障碍的因素之一。

雌激素α和β受体在大鼠结膜上皮和Henle腺上的分布

目的阐明雌激素α、β受体在大鼠结膜上皮和Henle腺的分布。方法选择22例青春期SD雌性大鼠上眼睑标本,采用免疫组织化学方法对结膜上皮和Henle腺雌激素α、β受体进行检测;同时采用放射免疫分析技术检测大鼠血清雌二醇的浓度。结果22例大鼠中,19例大鼠的结膜上皮雌激素α受体呈阳性表达,17例大鼠的结膜上皮雌激素β受体呈阳性表达。18例大鼠Henle腺深部的基底细胞雌激素α受体呈阳性表达,17例大鼠的Henle腺深部的基底细胞雌激素β受体呈阳性表达。在所有的大鼠中,Henle腺的杯状细胞雌激素α、β受体均呈阴性表达。雌激素α、β受体在结膜上皮阳性表达率间比较,差异无显著性(P>0.05);雌激素α、β受体在Henle腺深部的基底细胞阳性表达率间比较,差异亦无显著性(P>0.05)。正常大鼠血清雌二醇水平经检测含量为(22.13±3.54)ng/L。结论雌激素及其受体对大鼠结膜上皮、Henle腺深部的基底细胞具有重要的调控作用,但对Henle腺的杯状细胞分泌黏液功能无直接调节作用。

构建卵巢切除模型大鼠睑板腺腺泡上皮细胞脂质的变化

目的：建立人工绝经期模型，在降低雌激素水平的状态下，观察卵巢切除对睑板腺腺泡上皮细胞脂质的影响。方法：实验于2006-08／2007-05在河北工程大学医学院人体解剖学与组织胚胎学教研室完成。①实验材料：56～60d SD雌性大鼠72只，体质量200～240g；苏丹Ⅲ为天津科密欧化学试剂厂产品。②实验分组及过程：随机对72只青春期SD雌性大鼠分为3组：手术组、假手术组和正常组，每组24只，分别饲养2，4，6，8周后，用2％荧光素钠滴入大鼠结膜囊内，瞬目后在裂隙灯显微镜下用钴蓝光扫描照射观测大鼠的泪膜破裂时间，然后麻醉下颈椎脱臼法处死大鼠。③实验评估：采用放射免疫分析方法检测血清雌二醇水平；采用组织化学苏丹Ⅲ染色方法对睑板腺腺泡上皮做脂质染色阳性和强度检测。实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准。结果：①手术组随术后时间的延长血清雌二醇水平逐渐降低，术后第4，6，8周低于正常组和假手术组（分别P〈0．05，P〈0．01，P〈0．01）。②手术组泪膜破裂时间于术后第4，6，8周明显缩短，与正常组、假手术组之间比较差异有显著性（P值均〈0．05），③手术组苏丹Ⅲ染色强度随时间延长逐渐减弱，术后第6周、第8周与正常组和假手术组之间比较差异有统计学意义（分别为P〈0．05，P〈0．01）。④血清雌二醇水平与泪膜破裂时间、苏丹Ⅲ染色强度有显著性相关关系（相关系数分别为r=0．9957，P=0．0043；r=0．9723，P=0．0036）。结论：卵巢切除后血清雌二醇水平降低，可造成睑板腺腺泡上皮细胞脂质减少，是导致睑板腺机能障碍的原因之一。

甲状腺肿瘤组织中雌激素受体β1和β2的表达及其意义

采用RT—PCR检测10例甲状腺乳头状腺癌（PTC）和10例癌旁正常甲状腺组织雌激素受体（ER）β1、ERβ2以及ERα的表达，同时用免疫组织化学方法检测107例甲状腺癌、56例甲状腺腺瘤和10例正常甲状腺组织中ERβ1和ERβ2表达，并结合甲状腺癌ERα表达及其它主要临床病理参数进行分析。结果显示，ERα mRNA在PTC组织的表达明显高于癌旁正常组织，ERβ2 mRNA在FTC组织的表达明显低于癌旁正常组织（P〈0．05）；正常甲状腺组织、甲状腺腺瘤和甲状腺癌中3种ER的表达差异均有统计学意义（P〈0．05）；ERβ1和ERβ2在甲状腺癌中的表达与其组织类型有关；甲状腺组织中ERβ1和ERβ2的表达与ERα呈低、中度负相关（ERβ1：r=-0．206，P=0．042；ERβ2：r=-0．545，P〈0．01）；ERβ2的表达还与淋巴结转移以及TNM分期有关。提示ERβ2的表达缺失可能导致甲状腺滤泡上皮细胞的增生和癌变以及肿瘤的演进，并且有一定的预后评估价值。