目的:观察微小RNA-501-3p(microRNA-501-3p,miR-501-3p)与内皮PAS结构域包含蛋白-1(endothelial PAS domain-containing protein 1,EPAS-1)的靶向关系,分析其对肾透明细胞癌增殖的调控作用。方法:选择人肾癌786-0、ACHN细胞系,采用双荧...目的:观察微小RNA-501-3p(microRNA-501-3p,miR-501-3p)与内皮PAS结构域包含蛋白-1(endothelial PAS domain-containing protein 1,EPAS-1)的靶向关系,分析其对肾透明细胞癌增殖的调控作用。方法:选择人肾癌786-0、ACHN细胞系,采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-501-3p与EPAS-1的靶向关系。建立无关序列组(NC)、miR-501-3p mimic组、miR-501-3p inhibitor组、miR-501-3p inhibitor和siRNA EPAS-1共转染组,采用CCK-8法观察细胞增殖活性。采用Western Blot法检测EPAS-1和Ki67的表达。选择78例肾透明细胞癌患者的术后组织,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-501-3p的表达,应用免疫组化法检测EPAS-1和Ki67的表达。结果:双荧光素酶报告基因实验显示miR-501-3p与EPAS-1具有靶向关系。与NC组比较,miR-501-3p mimic组的细胞活性、EPAS-1和Ki67的表达均下降,miR-501-3p inhibitor组的细胞活性、EPAS-1和Ki67的表达均增高,而miR-501-3p inhibitor和siRNA EPAS-1组则无明显改变。肾透明细胞癌组织中miR-501-3p的表达量与肿物最大径及Fuhrman分级密切相关,MiR-501-3p与EPAS-1、miR-501-3p与Ki67均呈负相关性,EPAS-1与Ki67呈正相关性。MiR-501-3p的表达均与生存时间有关。结论:MiR-501-3p靶向负调控EPAS-1抑制肾透明细胞癌的增殖。MiR-501-3p的低表达与不良预后有关。展开更多
