沙格雷酯对糖尿病下肢动脉硬化闭塞症疗效临床观察

研究沙格雷酯治疗糖尿病合并下肢动脉硬化性闭塞症的疗效及安全性。 方法: 选择糖尿病合并下肢动脉硬化性闭塞症患者,随机分成实验组(n=35)和对照组(n=35),在常规治疗下实验组予沙格雷酯100 mg 口服3次/日,对照组予安慰剂,治疗时间90天。观察患者Rutherford分类变化,踝肱收缩压指数(ABI),下肢血管彩超变化及无痛步行距离,药物不良反应。结果:患者在沙格雷酯治疗后,主观症状明显改善,Rutherford分类中0级增加28.6%,1级增加20%;血管动脉斑块减小或消失;无痛步行距离由治疗前108.5±62.3米,增加致治疗后215.5±181.7米,P <0.05具有统计学意义。治疗过程中未见不良反应。结论:沙格雷酯对糖尿病合并下肢动脉硬化性闭塞症有良好的治疗效果及安全性。

绿原酸对肾癌A498和769-P细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨绿原酸对肾癌A498和769-P细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及其可能的分子机制。方法取人肾癌A498或769-P细胞培养,分为对照组和绿原酸(2μL,1μmol/L)组,培养72 h。采用MTT法检测细胞增殖能力;Transwell小室法检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;ELISA法检测细胞上清液中IL-1β水平;qRT-PCR法检测细胞EPAS-1表达;Western blot检测细胞AKT/P65信号通路相关蛋白表达。结果绿原酸能抑制胃癌A498或769-P细胞增殖、侵袭和迁移的能力,降低细胞上清液中IL-1β水平。qRT-PCR和Western blot检测结果显示,与对照组比较,加入anti-IL-1β后,肾癌A498或769-P细胞中EPAS-1 mRNA及p-AKT、p-P65蛋白表达水平降低;与对照组比较,绿原酸组肾癌A498或769-P细胞中EPAS-1 mRNA及p-AKT、p-P65蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论绿原酸能抑制肾癌细胞增殖、侵袭及迁移,其机制可能与抑制细胞IL-1β的分泌,从而抑制AKT/P65/EPAS-1通路有关。

程序性死亡因子1/程序性死亡因子1配体抑制剂治疗肾细胞癌有效性及安全性的Meta分析

背景肾细胞癌因起病隐匿,缺乏早期典型的临床表现,多数患者确诊时已经发生转移或已到晚期,根治性肾细胞癌切除术疗效较差。近年来,随着靶向治疗在肿瘤治疗中广泛应用,很大程度上降低了术后复发率和死亡率,但由于存在一定的不良反应及并发症,因而临床治疗的有效性及安全性缺乏循证依据。目的系统评价程序性死亡因子1(PD-1)/程序性死亡因子1配体(PD-L1)抑制剂治疗肾细胞癌的有效性及安全性。方法计算机检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网及PubMed、Web of Science、Embase、Cochrane Library、Clinical Trials英文数据库和手动检索以收集PD-1/PD-L1抑制剂治疗肾细胞癌的随机对照试验,试验组为接受PD-1/PD-L1抑制剂治疗,对照组为接受常规治疗或安慰剂。检索时间为建库至2022-09-30。由2位研究员独立提取和整理资料,依据Cochrane 5.3手册标准对纳入文献的质量进行评价,应用RevMan 5.4软件进行Meta分析。结果最终纳入11篇文献,研究对象7895例,试验组3936例,对照组3959例。Meta分析结果显示,试验组总生存期(OS)、无进展生存期(PFS)优于对照组〔HR=0.87,95%CI(0.84,0.90),P<0.00001;HR=0.85,95%CI(0.78,0.92),P<0.0001〕;试验组客观缓解率(ORR)、部分缓解率(PR)、完全缓解率(CR)、基本控制率(DCR)高于对照组〔RR=1.72,95%CI(1.39,2.12),P<0.00001;RR=1.56,95%CI(1.20,2.01),P=0.0007;RR=3.05,95%CI(2.39,3.09),P<0.00001;RR=1.12,95%CI(1.05,1.20),P=0.0005〕;试验组疾病稳定率(SD)低于对照组〔RR=0.66,95%CI(0.62,0.72),P<0.00001〕。试验组和对照组疾病进展率(PD)、总不良反应发生率(AEs)、Ⅰ~Ⅱ级不良反应发生率、Ⅲ~Ⅴ级不良反应发生率比较,差异无统计学意义〔RR=0.73,95%CI(0.53,0.99),P=0.05;RR=1.01,95%CI(0.89,1.04),P=0.60;RR=1.02,95%CI(0.88,1.17),P=0.82;RR=1.02,95%CI(0.88,1.19),P=0.80〕。Egger's检验结果均为P>0.05,表明各研究间发表偏倚不显著。结论PD-1/PD-L1抑制剂治疗肾细胞癌可显著改善和提高患者的OS、PFS、ORR、PR、CR和DCR,其安全性较好,未增加患者的不良反应发生率,从而证实PD-1/PD-L1抑制剂治疗肾细胞癌在临床有效性及安全性方面有一定的优越性。

miR-130b-3p在肾癌中表达及PI3K/AKT途径参与的机制研究

目的探究miR-130b-3p调节PI3K/AKT途径对肾癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法临床收集肾癌患者78例,检测肿瘤组织和癌旁组织中miR-130b-3p和PTEN蛋白水平,分析miR-130b-3p与肾癌病理特征的关系。通过相关性分析探究肾癌组织中miR-130b-3p与PTEN蛋白的相关性。786-O细胞分为NC、miR-130b-3p、PTEN和miR-130b-3p+PTEN组,分别转染NC、miR-130b-3p mimic和/或pcDNA 3.1 PTEN来过表达miR-130b-3p和/或PTEN。分别检测各组细胞活力、凋亡率、侵袭能力以及PI3K/AKT通路水平。结果肾癌组织中miR-130b-3p水平显著高于癌旁组织(P<0.05)。miR-130b-3p表达水平与性别、年龄、肿瘤直径无关,高水平的miR-130b-3p与高临床分期和淋巴转移有关(P<0.05)。miR-130b-3p与PTEN靶向结合(P<0.05)。与NC组比较,miR-130b-3p组的PTEN蛋白和凋亡率显著降低,增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著升高(P<0.05);PTEN组的PTEN蛋白和凋亡率显著升高,增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著抑制(P<0.05)。miR-130b-3p+PTEN组的PTEN蛋白和凋亡率显著高于miR-130b-3p组且显著低于PTEN组,而增殖活力、侵袭能力和PI3K/AKT通路显著低于miR-130b-3p组且显著高于PTEN组(P<0.05)。结论miR-130b-3p在肾癌组织中上调,高水平的miR-130b-3p与肾癌患者的高临床分期和转移有关,miR-130b-3p可调控PI3K/AKT途径,抑制PTEN蛋白表达,促进肾癌细胞的侵袭并抑制凋亡。

miR-630对肾透明细胞癌发生发展的影响及机制研究

目的 探究miR-630对肾透明细胞癌(ccRCC)的发生发展的影响及其机制。方法 选择2020年7月至2021年7月河北工程大学附属医院收治的ccRCC患者86例,术中取肿瘤组织和癌旁正常组织(距癌灶边缘>5 cm),通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测肿瘤组织和癌旁正常组织中miR-630表达水平,分析其与ccRCC患者临床病理特征的关联性。分析ccRCC组织中miR-630表达水平与凋亡标志蛋白表达水平的相关性。选择786-O细胞进行实验,设计miR-630 NC组、miR-630 mimic组和miR-630 inhibitor组(分别为miR-630的对照、过表达和抑制组),分析miR-630表达对细胞增殖活力、凋亡率以及凋亡标志蛋白表达水平的影响。结果 ccRCC组织中miR-630水平显著高于癌旁正常组织(P<0.05)。高水平的miR-630与更大的肿瘤直径、高临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05)。与癌旁正常组织相比,ccRCC组织中caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.05),B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl2)蛋白水平显著升高(P<0.05)。ccRCC组织中miR-630表达水平与caspase-3蛋白表达水平呈负相关(r=-0.489,P=0.011),与Bcl2蛋白表达水平呈正相关(r=0.516,P=0.004)。过表达miR-630可显著促进细胞增殖活力,抑制细胞凋亡率以及caspase-3蛋白表达水平,促进Bcl2蛋白表达水平(P<0.05)。降低miR-630表达可显著抑制细胞增殖活力,促进细胞凋亡及caspase-3蛋白表达水平,抑制Bcl2蛋白表达水平(P<0.05)。结论 miR-630在ccRCC组织中表达上调,高水平的miR-630可抑制细胞凋亡,并与ccRCC患者的高临床分期和淋巴结转移情况有关。

EPAS-1在透明细胞性肾细胞癌中的表达及意义

目的探讨内皮PAS结构域包含蛋白-1(EPAS-1)在透明细胞性肾细胞癌中的表达特征,分析其与细胞增殖的关系及其临床意义。方法收集在我院确诊为透明细胞性肾细胞癌的患者共78例,留取术后肿瘤组织作为观察组,留取距肿瘤标本肉眼可见的边缘>3 cm的正常肾组织作为对照组,应用免疫组化法检测两组中EPAS-1及观察组中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,分析其临床意义;选择人肾透明细胞癌786-0细胞系和人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞系,应用Western Blot方法检测EPAS-1蛋白的表达,实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测EPAS-1 mRNA的表达。选择人肾透明细胞癌786-0细胞系,建立小干扰RNA EPAS-1(siRNA EPAS-1组),并设立786-0细胞系的空白对照组(NC组),Western Blot检测PCNA蛋白,应用RT-PCR法检测PCNA mRNA。结果观察组中EPAS-1表达的阳性率明显高于对照组(P<0.05),EPAS-1的阳性率在不同Fuhrman分级、肿瘤最大径及PCNA增殖指数的表达中差异均有统计学意义(P<0.05),而在有无肾窦累犯、不同性别及年龄分组的表达中差异无统计学意义(P>0.05)。EPAS-1的表达与生存时间有关(P<0.05)。人肾透明细胞癌786-0细胞系中EPAS-1蛋白和mRNA的表达明显高于人肾皮质近曲小管上皮HK-2细胞系(P<0.05)。siRNA EPAS-1组中PCNA蛋白和mRNA的表达明显低于NC组(P<0.05)。结论EPAS-1在透明细胞性肾细胞癌中表达明显升高,在不同临床病理特征中的表达有差异。EPAS-1可能对促进肿瘤细胞增殖有一定作用。检测EPAS-1的表达可能与肿瘤的预后有关。

EPAS-1基因甲基化水平及蛋白表达与肾透明细胞癌临床特征的相关性

目的分析内皮PAS区域蛋白1(EPAS-1)基因甲基化及蛋白表达水平与肾透明细胞癌临床特征及预后的关系。方法选取2014年2月—2015年8月河北工程大学附属医院泌尿外二科诊治肾透明细胞癌患者86例的癌组织作为肾透明细胞癌组,癌旁正常组织作为癌旁对照组。亚硫酸氢钠处理基因组DNA后采用直接测序法检测组织EPAS-1基因甲基化水平,采用免疫组织化学法检测组织EPAS-1蛋白表达水平;分析肾透明细胞癌患者癌组织EPAS-1甲基化水平及蛋白表达与临床病理特征的关系;多因素Cox回归分析影响肾透明细胞癌预后的因素。结果肾透明细胞癌组EPAS-1基因甲基化率为62.79%(54/86),高于癌旁对照组的16.28%(14/86),差异有统计学意义(χ^(2)/P=38.914/0.000);肾透明细胞癌组EPAS-1蛋白表达阳性率23.26%(20/86),低于癌旁对照组的65.12%(56/86),差异有统计学意义(χ^(2)/P=30.553/0.000)。肿瘤≥4.0 cm、转移(Fuhrman)分级高级别肾透明细胞癌患者癌组织EPAS-1甲基化率高于肿瘤<4.0 cm、Fuhrman分级低级别患者(χ^(2)/P=10.261/0.001,9.097/0.003);蛋白表达阳性率低于肿瘤<4.0 cm、Fuhrman分级低级别患者(χ^(2)/P=10.402/0.001,4.160/0.041)。EPAS-1基因甲基化肾透明细胞癌患者5年生存率低于EPAS-1基因非甲基化患者(51.85%vs.78.13%,χ^(2)=5.865,P=0.015);EPAS-1蛋白阳性表达肾透明细胞癌患者5年生存率高于EPAS-1蛋白阴性表达(85.00%vs.54.55%,χ^(2)=6.020,P=0.014)。EPAS-1基因甲基化是影响肾透明细胞癌患者死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=2.093(1.574~2.784)],EPAS-1蛋白阳性表达是其保护因素[OR(95%CI)=0.677(0.469~0.978)]。结论EPAS-1基因启动子高甲基化及蛋白低表达可能与肾透明细胞癌的发生、发展及预后有关。

EPAS1 siRNA抑制人肾透明细胞癌细胞系HiMet⁃ccRCC的增殖、迁移及侵袭

目的探讨沉默内皮PAS区域蛋白1(EPAS1)对抑制人肾透明细胞癌细胞系HiMet⁃ccRCC增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法将HiMet⁃ccRCC细胞分为对照(Con)组、阴性对照(NC)组、沉默EPAS1表达组(EPAS1 siRNA组)。用RT⁃qPCR检测HiMet⁃ccRCC细胞EPAS1 mRNA水平;MTT法检测HiMet⁃ccRCC细胞增殖;Transwell小室法检测HiMet⁃ccRCC细胞迁移、侵袭能力;蛋白质印迹法检测E⁃cadherin、N⁃cadherin、MMP⁃9、PCNA表达。结果与对照组、阴性对照组比较,EPAS1 siRNA组HiMet⁃ccRCC细胞中EPAS1表达水平显著降低(P<0.05),HiMet⁃ccRCC细胞增殖抑制率明显升高、侵袭及迁移细胞数明显减少(P<0.05);与对照组、阴性对照组比较,EPAS1 siRNA组HiMet⁃ccRCC细胞E⁃cadherin蛋白表达上调(P<0.05),N⁃cadherin、MMP⁃9、PCNA蛋白表达下调(P<0.05)。结论沉默EPAS1可抑制HiMet⁃ccRCC细胞增殖、迁移及侵袭,EPAS1可能是肾透明细胞癌基因治疗的潜在生物靶标。

MiR-501-3p靶向EPAS-1抑制肾透明细胞癌细胞增殖的研究

目的:观察微小RNA-501-3p(microRNA-501-3p,miR-501-3p)与内皮PAS结构域包含蛋白-1(endothelial PAS domain-containing protein 1,EPAS-1)的靶向关系,分析其对肾透明细胞癌增殖的调控作用。方法:选择人肾癌786-0、ACHN细胞系,采用双荧光素酶报告基因实验分析miR-501-3p与EPAS-1的靶向关系。建立无关序列组(NC)、miR-501-3p mimic组、miR-501-3p inhibitor组、miR-501-3p inhibitor和siRNA EPAS-1共转染组,采用CCK-8法观察细胞增殖活性。采用Western Blot法检测EPAS-1和Ki67的表达。选择78例肾透明细胞癌患者的术后组织,应用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-501-3p的表达,应用免疫组化法检测EPAS-1和Ki67的表达。结果:双荧光素酶报告基因实验显示miR-501-3p与EPAS-1具有靶向关系。与NC组比较,miR-501-3p mimic组的细胞活性、EPAS-1和Ki67的表达均下降,miR-501-3p inhibitor组的细胞活性、EPAS-1和Ki67的表达均增高,而miR-501-3p inhibitor和siRNA EPAS-1组则无明显改变。肾透明细胞癌组织中miR-501-3p的表达量与肿物最大径及Fuhrman分级密切相关,MiR-501-3p与EPAS-1、miR-501-3p与Ki67均呈负相关性,EPAS-1与Ki67呈正相关性。MiR-501-3p的表达均与生存时间有关。结论:MiR-501-3p靶向负调控EPAS-1抑制肾透明细胞癌的增殖。MiR-501-3p的低表达与不良预后有关。

TGF-B1在前列腺癌组织中临床表达意义Meta分析

应用Meta分析研究前列腺癌中TGF-B1蛋白的表达和临床意义。方法:检索万方数据库、pubmed、中国知网、及中国期刊网全文期刊数据库,收集2017-09以前在内外已公开发表的学术期刊论文、、学术会议及文献,依据癌组织的临床分期、病理分级及有无骨转移、TGF-B1蛋白检测及结果分析评价方法等,制定相应纳入及排除标准来筛选文献。应用Meta分析软件RevMan5.0对研究原始数据来统计学处理,合并计算OR值及95%CI且绘制出Meta分析森林图和漏斗图。结果:有8篇文献纳入系统评价,对TGF-B1蛋白阳性表达率原始数据行Meta分析,结果显示,癌组与非癌组的OR值为9.94,95%CI:6.18~16.00;低分化组与中高分化组的OR值为5.40,95%CI:2.75~10.59;C+D期与A+B期的OR值为4.46,95%CI:1.92~10.39;骨转移组与无骨转移组的OR值为12.22,95%CI:4.76~31.35。TGF-B1蛋白在前列腺癌中的阳性表达率组明显高于非前列腺癌组;低分化组TGF-B1蛋白阳性表达率显著高于中高分化组;C+D期TGF-B1蛋白阳性表达率明显高于A+B期,骨转移组中TGF-B1蛋白的阳性表达率显著高于非骨转移组。结论:TGF-B1蛋白的高表达可能与前列腺癌发生及发展有关,且与前列腺癌的分化程度、有无骨转移、及其临床分级密切相关。检测TGF-B1蛋白可能对前列腺癌临床分期及预后的判断有指导意义。