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钙调素的结构生物学研究进展 被引量:8
1
作者 马力耕 孙大业 阎隆飞 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第3期209-213,共5页
介绍了ApoCaM、Ca2+CaM以及CaM与其靶肽及拮抗剂复合体的空间结构.钙调素(calmodulin,CaM)作为细胞多功能的Ca2+受体,在细胞信号转导过程中发挥重要作用.近几年对它的空间结构有了较清楚的... 介绍了ApoCaM、Ca2+CaM以及CaM与其靶肽及拮抗剂复合体的空间结构.钙调素(calmodulin,CaM)作为细胞多功能的Ca2+受体,在细胞信号转导过程中发挥重要作用.近几年对它的空间结构有了较清楚的了解。 展开更多
关键词 钙调素 空间结构 蛋白质晶体学 核磁共振
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白芷细胞外21kD钙调素结合蛋白的生理功能初探 被引量:8
2
作者 毛国红 汤文强 孙大业 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1999年第2期165-170,共6页
利用Sephadex G100 及CMSepharose层析法,从白芷悬浮培养细胞的胞外盐提液中纯化了21 kD 钙调素结合蛋白(21 kDCaMBP) ,测其等电点的pH 为8 .9 ,紫外薄层扫描显示其纯度达94 % ... 利用Sephadex G100 及CMSepharose层析法,从白芷悬浮培养细胞的胞外盐提液中纯化了21 kD 钙调素结合蛋白(21 kDCaMBP) ,测其等电点的pH 为8 .9 ,紫外薄层扫描显示其纯度达94 % 以上。以此蛋白为抗原,用免疫小鼠腹水法制备了特异性抗体。由纯化的21 kDCaMBP及其特异性抗体研究其对白芷悬浮培养细胞增殖的影响,结果表明:加入外源纯化的21 kDCaMBP 抑制细胞增殖,半抑制浓度约8 μg/ml;而加入21 kDCaMBP特异性抗体却促进细胞增殖效应。推测胞外内源存在的21 kDCaMBP在生理条件下可能具有参与调节胞外活化CaM 信号分子的浓度,从而调节胞外CaM 的生物学功能。 展开更多
关键词 白芷 胞外 钙调素 结合蛋白 细胞增殖 生理功能
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乙烯在植物中的信号转导 被引量:11
3
作者 潘延云 郭毅 +1 位作者 赵军峰 孙大业 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期453-460,共8页
乙烯是所有植物激素中结构最简单的一种,它对植物的代谢调节可贯串其整个生活周期.作为信号物质,它的生物合成主要由ACC合成酶和ACC氧化酶调控.通过对拟南芥中一系列乙烯反应的突变体的分析,人们掌握了很多在乙烯信号转导中发挥作用的... 乙烯是所有植物激素中结构最简单的一种,它对植物的代谢调节可贯串其整个生活周期.作为信号物质,它的生物合成主要由ACC合成酶和ACC氧化酶调控.通过对拟南芥中一系列乙烯反应的突变体的分析,人们掌握了很多在乙烯信号转导中发挥作用的生化组分.乙烯受体与细菌的双组分调节系统结构相似,乙烯与之结合后,调节与Raf激酶极为相似的CTR1,进而将信号传递给下游的EIN2.EIN3是一个转录因子,可结合到与乙烯反应相关的基因的启动子的特殊序列上,激活这些基因并使其转录,从而使植株出现与乙烯反应相关的诸多表型特征. 展开更多
关键词 乙烯 信号转导 植物激素 生物合成 ACC合成酶 ACC氧化酶 受体
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花粉萌发和花粉管生长发育的信号转导 被引量:52
4
作者 孙颖 孙大业 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第12期1211-1217,共7页
Pollen germination and tube growth are a developmental stage in fertilization of flowering plants during which the complex interactions between female and male cells take place. In this process, extracellular signal m... Pollen germination and tube growth are a developmental stage in fertilization of flowering plants during which the complex interactions between female and male cells take place. In this process, extracellular signal molecules are the main regulating factors that can induce signal transduction cascade in the two sexual cells. The present review attempts to summarize the advances in this research field. 展开更多
关键词 花粉 花粉管 萌发 生长 信号转导
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^(35)S标记重组植物钙调素的制备方法 被引量:3
5
作者 崔素娟 郭晓强 +5 位作者 毛国红 赵军峰 孙颖 白娟 马力耕 孙大业 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第5期801-805,共5页
利用3 5S标记的氨基酸混合物喂养工程菌 ,成功地制备了3 5S标记的拟南芥钙调素亚型 2 (3 5S ACaM2 ) ,对其纯度、放射活度、电泳行为及其灵敏性等进行了检测 .结果表明从工程菌中制备的3 5S ACaM 2纯度高、放射活度高、Ca2 + 与EGTA存... 利用3 5S标记的氨基酸混合物喂养工程菌 ,成功地制备了3 5S标记的拟南芥钙调素亚型 2 (3 5S ACaM2 ) ,对其纯度、放射活度、电泳行为及其灵敏性等进行了检测 .结果表明从工程菌中制备的3 5S ACaM 2纯度高、放射活度高、Ca2 + 与EGTA存在时的电泳行为与未标记的ACaM2相同 。 展开更多
关键词 ^35S标记 重组植物钙调素 制备方法 工程菌 拟南芥
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肌醇磷脂信号途径参与胞外钙调素启动花粉萌发和花粉管伸长 被引量:25
6
作者 马力耕 徐小冬 +1 位作者 崔素娟 孙大业 《植物生理学报(0257-4829)》 CSCD 1998年第2期196-200,共5页
In our previous reports, wehave verified the involvement of G protein, Ca2+ channel in plasma memband CDPK in extracellular calmodulin(CaM) signal transduction chain for theinitiatory effects of extracellular CaM onpo... In our previous reports, wehave verified the involvement of G protein, Ca2+ channel in plasma memband CDPK in extracellular calmodulin(CaM) signal transduction chain for theinitiatory effects of extracellular CaM onpollen germination and pollen tubegrowth . In this paper, both normal andexogenous CaM-enhanced pollen germination and tube growth were completelyinhibited by the phospholipase C inhibitor U-73122 (Fig. 1 ). The enhancement of pollen germination and tubegrowth by the G protein agonist choleratoxin were also completely inhibited byU-73122 (Fig. 2), whereas the inhibition of pollen germination and tubegrowth by the G protein antagonist pertussis toxin was reversed by IP3 (Fig. 2).Heparin, an antagonist Of IP3 receptor,inhibited pollen germination and tubegrowth (Fig. 3 ), while thapsigargin increased cytosolic Ca2+ by inhibiting theIP3-specific Ca2+ pump in endoplasmicreticulum, and thereby increased pollengermination and tube growth (Fig. 4).The above results suggest that phosphoinositide signaling pathway might be involved in the extracellular CaM signaltransduction chain in the initiatory effectsof extracellular CaM on pollen germination and tube growth. 展开更多
关键词 细胞外钙调素 花粉萌发 G蛋白 磷脂酶
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光敏色素与转录因子结合直接调控植物基因表达和发育 被引量:10
7
作者 马力耕 孙大业 《生命科学》 CSCD 2001年第4期148-150,共3页
植物的光控发育一直是植物学中一个非常活跃的研究领域。最近该领域又取得重大突破性进展,人们通过酵母双杂交技术克隆到在体内与光敏色素相互作用的转录因子,并证实被光活化的光敏色素直接进入细胞核与转录因子结合启动基因表达。本... 植物的光控发育一直是植物学中一个非常活跃的研究领域。最近该领域又取得重大突破性进展,人们通过酵母双杂交技术克隆到在体内与光敏色素相互作用的转录因子,并证实被光活化的光敏色素直接进入细胞核与转录因子结合启动基因表达。本文就此研究进展作简要介绍。 展开更多
关键词 光敏色素 转录因子 基因表达 植物光控发育 调控
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染色质重塑和高等植物开花时间控制 被引量:1
8
作者 李健 马力耕 《细胞生物学杂志》 CSCD 2005年第1期24-28,共5页
 染色质的结构和组成直接影响转录因子与基因启动子的结合,并最终导致基因的活化或沉默。多年来在酵母和动物等领域的研究已经证实,起关键调节作用的转录因子表达模式的建立和维持需要染色质重塑。外界和细胞内部信号介导的染色质重塑...  染色质的结构和组成直接影响转录因子与基因启动子的结合,并最终导致基因的活化或沉默。多年来在酵母和动物等领域的研究已经证实,起关键调节作用的转录因子表达模式的建立和维持需要染色质重塑。外界和细胞内部信号介导的染色质重塑调控基因的表达,并最终调控细胞的分化和生物个体的发育。近几年人们发现高等植物也存在与动物和酵母同源的参与染色质重塑的蛋白质因子。最近的研究结果表明,决定高等植物开花时间关键基因的表达调控就是通过外界信号影响其染色质结构实现的。 展开更多
关键词 染色质重塑 转录因子 关键基因 细胞内 基因启动子 研究结果 介导 高等植物 表达调控 酵母
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拟南芥钙调素定点突变基因分离及其在钙不依赖钙调素结合蛋白检测中的应用(英文)
9
作者 高丽 王振杰 崔素娟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第7期890-896,共7页
动植物系统研究表明,钙调素不仅在结合钙离子时调节多种靶酶或靶蛋白的活性,而且没有钙离子结合时,还可以通过结合钙不依赖的钙调素结合蛋白,发挥多种生物学作用.然而,目前却没有体内分析钙调素与钙不依赖钙调素结合蛋白相互作用的方法... 动植物系统研究表明,钙调素不仅在结合钙离子时调节多种靶酶或靶蛋白的活性,而且没有钙离子结合时,还可以通过结合钙不依赖的钙调素结合蛋白,发挥多种生物学作用.然而,目前却没有体内分析钙调素与钙不依赖钙调素结合蛋白相互作用的方法.首先,采用定点突变的方式,得到了拟南芥钙调素亚型2的多个突变基因mCaM2,随后,大肠杆菌重组表达突变蛋白的电泳迁移率及45Ca2+覆盖分析表明,得到了编码失去钙结合能力的钙调素的突变基因mCaM21234,mCaM21234突变钙调素中所有4个钙结合EF-hand结构域中的关键氨基酸谷氨酸均突变为谷氨酰胺.在酵母双杂交体系中,作为诱饵蛋白的突变钙调素mCaM21234与我们前期体外方法报道的钙不依赖性钙调素结合蛋白AtIQD26存在相互作用.这将为钙不依赖性钙调素结合蛋白提供有用的体内研究工具,有利于我们全面认识钙-钙调素-钙调素结合蛋白信号途径. 展开更多
关键词 定点突变 拟南芥 钙调素 钙不依赖 钙调素结合蛋白
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PLC-IP_3信号途径参与花粉管伸长调控的显微注射实验 被引量:8
10
作者 王昕 崔素娟 +1 位作者 马力耕 孙大业 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2000年第7期697-702,共6页
以百合 (LiliumdavidiiDuch .)花粉为材料 ,通过显微注射肌醇磷脂信使系统中重要组成成分或其抗体 ,研究该信使系统对花粉管伸长的影响。发现显微注射动物来源磷脂酶C(PLC) β1-3 抗体显著抑制花粉管的伸长生长 ,而注射PLCβ4 抗体对花... 以百合 (LiliumdavidiiDuch .)花粉为材料 ,通过显微注射肌醇磷脂信使系统中重要组成成分或其抗体 ,研究该信使系统对花粉管伸长的影响。发现显微注射动物来源磷脂酶C(PLC) β1-3 抗体显著抑制花粉管的伸长生长 ,而注射PLCβ4 抗体对花粉管伸长无影响 ;显微注射三磷酸肌醇 (IP3 ) ,可显著促进花粉管伸长生长 ;显微注射动物来源的IP3 R2 、IP3 R3 抗体可显著抑制花粉管伸长生长 ,而注射IP3 R1抗体对花粉管伸长无影响。上述结果表明肌醇磷脂信号系统可能参与花粉管伸长生长过程。 展开更多
关键词 花粉管伸长 显微注射 肌醇磷信号系统 调控
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细胞外钙调素对花粉萌发和花粉管伸长的影响 被引量:14
11
作者 马力耕 徐小冬 +1 位作者 崔素娟 孙大业 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1997年第24期2648-2652,共5页
钙调素(Calmodulin CaM)作为主要的多功能的Ca^(2+)受体,传统上被认为是细胞内信号转导(Signal transduction)途径中的主要信号分子。然而近年来国内外的一些研究结果表明CaM不仅存在于细胞内,也存在于细胞外。在植物系统中,Biro和孙大... 钙调素(Calmodulin CaM)作为主要的多功能的Ca^(2+)受体,传统上被认为是细胞内信号转导(Signal transduction)途径中的主要信号分子。然而近年来国内外的一些研究结果表明CaM不仅存在于细胞内,也存在于细胞外。在植物系统中,Biro和孙大业等人(1984)首次发现燕麦胚芽鞘细胞壁中存在CaM,随后我室一系列工作,包括从小麦细胞壁中纯化CaM、用金标免疫电子显微镜从玉米根尖细胞壁中检测到CaM,以及从悬浮培养的白芷和胡萝卜胞培养介质中检测到CaM,证实了植物细胞外CaM存在的普遍性。另外,我室近年来还发现细胞外CaM可以促进白芷细胞增值、原生质体壁再生及第一次分裂,并且还在白芷和胡萝卜细胞外检测到了CaM结合蛋白(CaMBPs),并将其中主要的分子量为21 ku的CaMBP纯化。上述结果表明植物细胞外不仅存在CaM,而且细胞外CaM还具有生物学功能。 展开更多
关键词 细胞外钙调素 花粉萌发 花粉管伸长
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细胞外钙调素对转基因烟草悬浮细胞rbcS-GUS基因表达的促进作用 被引量:3
12
作者 马力耕 周君莉 +2 位作者 张素巧 刘强 孙大业 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第19期2075-2080,共6页
以转rbcS-GUS报告基因的烟草悬浮培养细胞为材料, 研究了细胞外钙调素对rbcS基因表达的影响. 实验证实培养介质中钙调素浓度与rbcS-GUS基因表达呈现一个在细胞培养初期较低、随后增高、然后再降低的动态变化;而且培养介质中钙调素浓度... 以转rbcS-GUS报告基因的烟草悬浮培养细胞为材料, 研究了细胞外钙调素对rbcS基因表达的影响. 实验证实培养介质中钙调素浓度与rbcS-GUS基因表达呈现一个在细胞培养初期较低、随后增高、然后再降低的动态变化;而且培养介质中钙调素浓度变化在前, rbcS-GUS基因表达变化在后. 介质中加入外源纯化钙调素可以促进rbcS-GUS基因表达, 而且这种促进作用具有浓度剂量依赖性. 介质中加入不过膜的大分子钙调素抑制剂W7-agarose抑制rbcS-GUS基因表达, 这种抑制作用能被加入外源纯化钙调素完全恢复. 上述结果提供了较直接的证据, 表明钙调素可以在细胞外诱导rbcS基因的表达. 展开更多
关键词 细胞外钙调素 基因表达 转基因烟草
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钙调素在细胞外对花粉质膜异三聚体G蛋白的激活效应 被引量:2
13
作者 徐小冬 马力耕 +1 位作者 孙颖 孙大业 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 1998年第22期2463-2464,共2页
钙调素(Calmodulin,CaM)传统上认为是一种胞内Ca^(2+)重要的多功能受体,是细胞内信号转导(Signal transduction)途径中的重要信号分子。近年来,人们发现它还存在于细胞外,并具有诸如促进细胞增殖、原生质体壁再生等生物学功能。在... 钙调素(Calmodulin,CaM)传统上认为是一种胞内Ca^(2+)重要的多功能受体,是细胞内信号转导(Signal transduction)途径中的重要信号分子。近年来,人们发现它还存在于细胞外,并具有诸如促进细胞增殖、原生质体壁再生等生物学功能。在花粉实验体系中,我们证实,细胞外CaM对花粉萌发和花粉管伸长具有启动和促进作用,并初步提出G蛋白。 展开更多
关键词 钙调素 异三聚体G蛋白 花粉 质膜 激活效应
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植物细胞多肽第一信使 被引量:15
14
作者 马力耕 孙大业 《科学通报》 EI CAS CSCD 北大核心 2000年第18期1920-1927,共8页
动物体系中的多肽第一信使在动物细胞发育分化及神经信息传递等方面发挥重要调控作用.近几年的研究结果表明植物体系也存在多肽第一信使,而且这些多肽第一信使还参与诸如防御反应、花粉与柱头之间的相互识别、茎顶端分生组织细胞分裂... 动物体系中的多肽第一信使在动物细胞发育分化及神经信息传递等方面发挥重要调控作用.近几年的研究结果表明植物体系也存在多肽第一信使,而且这些多肽第一信使还参与诸如防御反应、花粉与柱头之间的相互识别、茎顶端分生组织细胞分裂及分化平衡控制等许多植物生长发育进程中重要的过程.简要综述了该领域国内外的最新进展并进行了讨论. 展开更多
关键词 多肽信号 信号转导 植物细胞 多肽第一信使
全文增补中
G-蛋白和cGMP在光敏色素介导的尾穗苋苋红素合成中的作用 被引量:12
15
作者 周君莉 马力耕 孙大业 《中国科学(C辑)》 CSCD 1998年第2期143-147,共5页
以尾穗苋幼苗为材料 ,对G 蛋白和cGMP在红光诱导、光敏色素介导的苋红素合成过程中的作用进行了研究 ,结果表明G 蛋白激活剂霍乱毒素可在暗中诱导苋红素合成 ,其抑制剂百日咳毒素则抑制红光诱导的合成 ;cGMP可以在暗中诱导苋红素合成 ,... 以尾穗苋幼苗为材料 ,对G 蛋白和cGMP在红光诱导、光敏色素介导的苋红素合成过程中的作用进行了研究 ,结果表明G 蛋白激活剂霍乱毒素可在暗中诱导苋红素合成 ,其抑制剂百日咳毒素则抑制红光诱导的合成 ;cGMP可以在暗中诱导苋红素合成 ,而Genistein抑制红光、CTX及外源cGMP诱导的苋红素合成 ;鸟苷酸环化酶抑制剂LY 835 83可以抑制红光及CTX诱导的苋红素合成 ,却不能抑制由外源cGMP诱导的苋红素合成 .上述结果表明G 蛋白、鸟苷酸环化酶及cGMP可能都参与了苋红素合成过程中红光信号的转导 ,并且红光信号传递链的顺序可能是红光→光敏色素→G 蛋白→鸟苷酸环化酶→cGMP . 展开更多
关键词 G-蛋白 CGMP 光敏色素 尾穗苋 苋红素 合成
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