熊果酸调控MAPK通路对肢体缺血再灌注肝损伤大鼠的影响

目的探讨熊果酸预处理对肢体缺血再灌注肝损伤大鼠的影响以及对丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的调节作用。方法50只雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、熊果酸组、激活剂组和熊果酸+激活剂组,每组10只。熊果酸组大鼠灌胃80 mg/kg熊果酸混悬液(生理盐水配制),1次/d,连续7 d,激活剂组大鼠腹腔注射MAPK信号通路激活剂茴香霉素(anisomycin)2 mg/kg,1次/2 d,共注射3次,熊果酸+激活剂组大鼠80 mg/kg熊果酸混悬液灌胃,1次/d,连续7 d,同时腹腔注射anisomycin 2 mg/kg,1次/2 d,共注射3次,正常对照组和模型组大鼠给予等容量的生理盐水;ELISA法检测血浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)以及乳酸脱氢酶(LDH)含量,比色法检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,肝组织进行HE染色和TUNEL染色,计算细胞凋亡率,蛋白印迹法检测p-p38 MAPK和p-ERK蛋白表达水平。结果模型组和激活剂组大鼠部分区域肝细胞水肿、脂肪变性、片状坏死,且伴有大量中性粒细胞浸润,肝窦结构消失;熊果酸组和熊果酸+激活剂组大鼠肝组织病理损伤不同程度减轻,肝细胞轻度水肿,无片状坏死,少量中性粒细胞浸润。与模型组比较,熊果酸组血浆中ALT、AST以及LDH含量、肝组织中MDA含量、肝细胞凋亡率、肝组织中p-p38 MAPK和p-ERK蛋白表达水平降低,SOD和GSH-Px活性升高,而激活剂组以上各指标呈相反趋势(P<0.05);与熊果酸组比较,熊果酸+激活剂组血浆中ALT、AST以及LDH含量、肝组织中MDA含量、肝细胞凋亡率、肝组织中p-p38 MAPK和p-ERK蛋白表达水平升高,SOD和GSH-Px活性降低(P<0.05);与激活剂组比较,熊果酸+激活剂组血浆中ALT、AST以及LDH含量、肝组织中MDA含量、肝细胞凋亡率、肝组织中p-p38 MAPK和p-ERK蛋白表达水平降低,SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05)。结论熊果酸可减轻肢体缺血再灌注大鼠肝组织损伤,改善肝脏病理形态变化,可能是通过抑制MAPK信号通路介导的氧化应激反应发挥作用。