海洋微生物几丁质酶分离纯化及其抗真菌活性

以实验室筛选的海洋产几丁质酶短芽胞杆菌属(Bacillus brevis sp.)菌株Bsp1,经往复式摇床振荡培养96 h后,发酵液先后采取了75%的硫酸铵盐析、透析、几丁质亲和层析、SDS-PAGE等方法对几丁质粗酶液进行分离纯化和鉴定。几丁质亲和层析一步纯化后,经过SDS-PAGE电泳测定该酶的分子量为23 ku,其比活力为86.65,纯化倍数为1.707、产率为32.1%。纯化的几丁质酶能抑制病原真菌的生长,对病原真菌的拮抗作用具有广谱性。同时研究了几丁质酶的稳定性,以胶态几丁质为底物,分离的几丁质酶在pH7.5,55.0℃左右具有最大酶活性;Zn2+、Cu2+和Hg2+能强烈抑制几丁质酶活性;Ni+和EDTA抑制20%～40%;然而5mmol/L Co2+可以使几丁质酶活性提高1.4倍;Mg2+、Ca2+等也能使酶活性增加。

海洋产几丁质酶微生物选育及组合发酵优化

[目的]探索海洋产几丁质酶微生物最佳的发酵组合。[方法]从唐山港曹妃甸港区海泥中分离筛选出2株几丁质酶活性强的菌株，研究不同的培养条件、诱变及组合发酵对菌株产酶的影响。[结果]通过紫外诱变产生的菌株的透明圈较大，直径在3～4mm，但数量不多；培养基碳源以胶体几丁质最好，产几丁质酶的最适温度在32℃；pH在7.0～8.0产酶量最高；以蛋白胨和酵母粉为氮源对产酶的效果明显；添加Mn^2＋的培养基产酶能力最强；随着培养时间的增加，诱变的菌株组合发酵产酶后，几丁质酶活性显著提高。[结论]在组合发酵中，选取高产酶培养条件、不同来源的菌株混合培养对组合发酵有着重大的意义。

海洋石油降解菌株选育及组合降解优化

[目的]研究海洋石油降解菌株的选育及组合降解优化。[方法]从唐山市曹妃店港区石油污染海水中筛选得到3种菌株,分别为芽孢杆菌属、鞘氨醇杆菌属和假单胞菌属,并命名为B1、S1和P1,对其进行紫外诱变和组合降解优化试验,分别测定降解效率。[结果]菌株B1、S1和P1经10 d降解的降解率分别为63.89%、67.33%和67.25%;对其进行紫外诱变,得到诱变菌株yB1y、S1和yP1,其降解率分别为70.34%7、7.05%和72.81%,均比诱变前有所提高;yS1与yP1y、B1与yP1、yB1与yS1等比例组成的混合菌群的降解率分别为78.21%7、3.65%和72.23%。yS1与产生物表面活性剂的菌株yPa1混合,其降解率达到了81.45%。[结论]利用各菌株的优势互补可构建出降解能力高、能对石油烃进行全面降解的优势混合菌群。

微生物几丁质酶的应用研究进展

近年来几丁质酶在生物防治、医药等领域的研究与开发引起了国内外普遍关注。综述了微生物几丁质酶的应用研究现状,并对其开发应用前景进行了展望。