葛根芩连汤对幽门螺杆菌感染人正常胃黏膜上皮细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

目的 观察葛根芩连汤对幽门螺杆菌(Hp)感染人正常胃黏膜上皮(GES-1)细胞增殖与凋亡的影响及相关机制。方法 按照葛根芩连汤干预剂量的不同、是否有Hp感染将人GES-1细胞分为空白对照组、模型组、葛根芩连汤低剂量组(10μmol/L)、葛根芩连汤中剂量组(20μmol/L)、葛根芩连汤高剂量组(40μmol/L)及阳性药对照组(阿莫西林5μmol/L)。培养结束后,采用细胞增殖检测分析法(CCK-8法)检测细胞存活率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞p38、丝裂原活化蛋白激酶2(MK2)mRNA表达,蛋白免疫印迹(Western bloting)法检测细胞p38、MK2蛋白表达。结果 与空白对照组比较,模型组人GES-1细胞存活率降低(P<0.05);与模型组比较,葛根芩连汤各剂量组与阳性药对照组人GES-1细胞存活率均升高(P<0.05),且葛根芩连汤各剂量组效应呈剂量依赖性(P<0.05);阳性药对照组与葛根芩连汤高剂量组人GES-1细胞存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组TNF-α、IL-1β和IL-6均升高(P<0.05);与模型组比较,葛根芩连汤各剂量组与阳性药对照组TNF-α、IL-1β和IL-6均降低(P<0.05),且葛根芩连汤各剂量组效应呈剂量依赖性(P<0.05);阳性药对照组与葛根芩连汤高剂量组TNF-α、IL-1β和IL-6比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组人GES-1细胞凋亡率升高(P<0.05);与模型组比较,葛根芩连汤各剂量组和阳性药对照组人GES-1细胞凋亡率降低(P<0.05),且葛根芩连汤各剂量组效应呈剂量依赖性(P<0.05);阳性药对照组和葛根芩连汤高剂量组人GES-1细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与空白对照组比较,模型组人GES-1细胞p38、MK2 mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,葛根芩连汤各剂量组和阳性药对照组人GES-1细胞p38、MK2 mRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.05),且葛根芩连汤各剂量组效应呈剂量依赖性(P<0.05);阳性药对照组和葛根芩连汤高剂量组人GES-1细胞p38、MK2 mRNA和蛋白表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 葛根芩连汤可有效提高Hp感染后人GES-1细胞增殖率,同时降低细胞凋亡水平,其机制可能与抑制p38/MK2信号通路、降低细胞炎性反应有关。