高效液相色谱法—蒸发光检测器测定复方石韦片中黄芪甲苷的含量

目的采用高效液相色谱法—蒸发光检测器测定复方石韦片中黄芪甲苷的含量,建立一种简便、快速的测定方法。方法采用Agilent 5-HC C18(2)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为乙腈—水(34∶66),体积流量1.0 ml/min,柱温30℃,进样量20μl。蒸发光检测器参数:载气体积流量1.6 L/min,漂移管温度100℃。结果在上述色谱条件下,黄芪甲苷在0.02043~2.043 mg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9996),平均加样回收率为97.3%(n=9)。采用回流碱化衍生法测得的16批复方石韦片样品中黄芪甲苷含量为0.60~0.98 mg/g,平均值0.75 mg/g;采用药典方法测得的16批复方石韦片样品中黄芪甲苷含量为0.55~0.93 mg/g,平均值0.67 mg/g,同批次样品采用回流衍生法含量测定结果均略高于药典方法。结论回流碱化衍生法可用于复方石韦片中黄芪甲苷的含量测定,操作简便,结果稳定,重复性好,可为复方石韦片中黄芪甲苷的含量测定提供参考。

基于高效液相色谱法的儿童清肺丸中汉黄芩苷含量测定

目的采用高效液相色谱法建立儿童清肺丸中汉黄芩苷的含量测定方法,以期为儿童清肺丸的质量控制提供参考。方法采用高效液相色谱法测定儿童清肺丸中汉黄芩苷含量,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C 18(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液(27∶73),流速为1.0 ml/min,检测波长为276 nm,柱温为30℃,进样体积为10μl。结果该方法的精密度、稳定性、重复性均符合要求,汉黄芩苷在9.92~74.40μg/ml(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均加样回收率为100.92%,RSD为1.08%(n=9),6批儿童清肺丸中汉黄芩苷含量在0.55~0.64 mg/g范围内。结论基于高效液相色谱法建立的儿童清肺丸中汉黄芩苷含量测定方法操作简便、精密、准确、专属性强,可作为儿童清肺丸中汉黄芩苷的质量控制方法。

HPLC法同时测定复方石韦片中2种生物碱类成分的含量

目的建立高效液相色谱法(HPLC)测定复方石韦片中2种生物碱类成分(苦参碱和槐果碱)含量的方法。方法采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80)(用三乙胺调节至p H8.0)为流动相,流速1.0 ml/min,检测波长210 nm,柱温30℃,进样量10μl。结果苦参碱、槐果碱质量浓度分别在0.01994~1.99430 mg/ml(r=0.9999)、0.010059~1.005900mg/ml(r=1)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为95.9%(RSD=2.9%)、103.3%(RSD=2.8%),15批样品苦参碱、槐果碱含量分别在7.75~10.40 mg/g、2.34~3.18 mg/g范围内。结论HPLC法测定复方石韦片中苦参碱、槐果碱含量简便、准确、快捷,可为复方石韦片的质量控制提供参考。

野生和家种北苍术质量对比

目的对比承德地区野生和家种北苍术的质量。方法按《中国药典》方法对野生和家种北苍术进行外观性状、显微图像和薄层鉴别、指标成分的含有量测定及重金属和农药残留检测;采用GC法进行北苍术中β-桉叶醇、苍术酮、苍术素的含有量测定和其挥发性成分的特征图谱分析。结果样品各项检测指标均符合《中国药典》要求;各挥发性成分含有量在家种和野生北苍术间均无显著差异,野生与家种北苍术特征图谱与对照谱的相似度均接近0.9;个别样本中镉元素和五氯硝基苯含有量超出参考限度要求。结论可采用家种北苍术替代野生北苍术,为北苍术药材质量均一、稳定及承德地区北苍术的栽培、扩大药源提供参考。

水蒸气蒸馏法与超临界二氧化碳萃取法提取活血润肠软胶囊挥发油成分气质联用仪分析

目的比较水蒸气蒸馏法与超临界二氧化碳萃取法提取活血润肠软胶囊挥发油成分。方法分别用水蒸气蒸馏法与超临界二氧化碳萃取法提取活血润肠软胶囊中当归、羌活和防风中挥发油,采用气质联用仪(G C-MS)分析其挥发油的化学成分。结果超临界二氧化碳萃取法萃取物中鉴定出188个化合物,平均提取率为4.69%。水蒸气蒸馏法提取物共鉴定出244个化合物,平均提取率为0.34%。结论超临界二氧化碳萃取法提取率更高,GC-MS分析两种提取方法得到的挥发油成分不完全相同。

活血润肠软胶囊挥发油的提取工艺优化及气相色谱质谱分析

目的探讨水蒸气蒸馏法提取活血润肠软胶囊中当归、羌活和防风中挥发油的最佳提取工艺条件。方法采用正交试验法,以提取率为评价指标,考察加水量、浸泡时间、提取时间和加盐量对挥发油提取率的影响,采用气相色谱质谱(GC-MS)法分析其挥发油的化学成分。结果最佳提取工艺条件为加6倍量水,浸泡1.5 h,提取4 h,此条件下挥发油的提取率为0.34%;GC-MS法分析得到的主要成分为1,4-双(1-甲基乙基)-苯、1 R-α-蒎烯、β-蒎烯、醋酸呋喃酯、(R)-4-甲基-1-(1-甲基乙基)-3-环己烯-1-醇、柠檬烯等。结论浸泡时间、加水量和提取时间对挥发油的提取率影响不显著,影响顺序为浸泡时间>加水量>提取时间。

膜控型非诺贝特缓释微丸制备工艺优选及体外释放度评价

目的优选膜控型非诺贝特缓释微丸的制备工艺,并评价其体外释放效果。方法以非pH依赖型丙烯酸树脂水分散体为成膜材料,采用流化床底喷包衣技术对微丸进行包衣,以雾化压力、物料温度、喷枪流速为考察因素,以7 h的药物累积释放率为评价指标,采用L_(9)(3^(4))正交试验优选微丸的制备工艺;以老化时间和包衣增量为变量,考察缓释微丸的体外释放效果;采用扫描电子显微镜观察制备的缓释微丸的体外表征。结果优选的制备工艺为雾化压力1.7 bar,物料温度35℃,喷枪流速2.5 mL/min。成膜材料增量20%,老化10 h时体外释放效果最好。扫描电子显微镜下缓释微丸的圆整度好,大小均匀,微丸表面成膜材料致密规则。结论该制备工艺简单可行,自制缓释微丸的体外释放效果良好。

高效液相色谱法测定蚁参蠲痹胶囊中丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定蚁参蠲痹胶囊中丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量。方法采用Agilent 5 TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相甲醇-0.02%磷酸(75∶25);检测波长为270 nm;体积流量为1.0 mL/min。结果丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮ⅡA分别在浓度为1.25~20.00μg/mL(r=0.9999)、5.05~80.78μg/mL(r=1.0000)、5.05~80.72μg/mL(r=0.9999)范围内,与各自峰面积呈现良好的线性关系,丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮ⅡA的平均加样回收率分别为97.01%、98.07%、95.48%,RSD分别为2.70%、2.62%、1.62%,符合要求。结论本法操作简单、结果可靠,为更好地控制蚁参蠲痹胶囊质量提供参考。

固相萃取偶联液相色谱质谱联用法测定鹿血中睾丸酮的含量

目的建立固相萃取偶联液相色谱质谱联用法测定鹿血中睾丸酮含量的方法,用于鹿血的质量评价。方法首先对样品进行前处理,其次在液相色谱条件和质谱条件下,通过定量子离子(109.06)对鹿血中睾丸酮进行含量测定。样品前处理:乙腈沉淀鹿血中的蛋白,乙酸乙酯初次提取睾丸酮,所得溶液加至活化的SAX(最大上样量为500 mg,体积为3 mL)固相萃取柱,所得液经氮气吹至近干,正己烷萃取3次,再加至活化的Florisil(最大上样量为500 mg,体积为3 mL)固相萃取柱,弃滤液,乙酸乙酯-正己烷(60∶40,V/V)洗脱柱子,氮气吹干。50%甲醇溶解,过0.22μm微孔滤膜后即得供试品溶液。高效液相色谱条件:色谱柱为shim-Pack XR-ODS(2.0 mm×75 mm,2.2μm);流动相为甲醇-0.1%甲酸-水,梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL/min;进样量为20μL。质谱条件:去簇电压(DP)为60.0 V;碰撞能(CE)为10.0 eV。结果在1.5165×10^(-4)~3.033×10^(-1)μg/mL线性范围下,定量子离子109.06的R=0.9995。平均回收率为66.62%(n=6),RSD=3.44%。该方法测定4个批次鹿血中睾丸酮的含量范围为3.30×10^(-4)~3.48×10^(-4)μg/mL,RSD均<3%。结论本文建立了固相萃取偶联液相色谱质谱联用法测定鹿血中睾丸酮含量的方法,其线性范围和回收率符合法规要求,可以为鹿血的质量评价提供参考。

椒姜凝胶贴膏的体外释药动力学与药效学评价

目的:研究椒姜凝胶贴膏的体外动力学并对其药效学进行评价,为该制剂的开发提供可行性依据。方法:采用改良的Franz扩散池法进行体外释放与透皮试验,分别以半透膜和离体小鼠皮肤作为透过屏障,采用高效液相色谱法(HPLC)测定指标成分羟基-α-山椒素、人参皂苷Rb1及6-姜辣素的含量,以评价椒姜凝胶贴膏的释放与经皮渗透效果。6-姜辣素和羟基-α-山椒素检测的流动相为水-乙腈-甲醇(2∶1∶1),检测波长280 nm;人参皂苷Rb1检测的流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(31∶69),检测波长203 nm。建立小鼠肠麻痹模型,动物随机分为5组,即假手术组、模型组、多潘立酮组(3.9 mg·kg^(-1))及椒姜凝胶贴膏高、低剂量组(6.2,3.1 g·kg^(-1),以生药量计),观察椒姜凝胶贴膏对模型动物胃肠推进功能的影响。结果:椒姜凝胶贴膏中羟基-α-山椒素,6-姜辣素及人参皂苷Rb1在24 h的平均释放速率分别为16.41,4.23,4.15μg·cm^(-2)·h^(-1);体外透皮试验中24 h平均透过速率分别为2.31,0.64,0.29μg·cm^(-2)·h^(-1);皮肤滞留量分别为19.56,3.59,1.61μg。根据Ritger-Peppas方程,确定羟基-α-山椒素、人参皂苷Rb1及6-姜辣素的释放为非Fick扩散。椒姜凝胶贴膏高剂量组对模型小鼠小肠摩擦损伤术后的肠功能具有一定改善作用,可以促进肠蠕动,促进小肠推进率(P<0.05)。结论:椒姜凝胶贴膏具有体外释放和透皮性能,体外释放符合Higuchi方程,经皮渗透行为符合零级动力学方程,其对术后的小肠功能有改善作用,可提高小肠推进功能,初步说明该制剂具有一定的临床开发价值。

蚁参蠲痹胶囊中5个成分测定及HPLC指纹图谱建立

目的:测定蚁参蠲痹胶囊中桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、苍术素、丹参酮Ⅱ_(A)5个成分的含量,并建立蚁参蠲痹胶囊HPLC指纹图谱。方法:以丹参酮Ⅱ_(A)为内参物,建立桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和苍术素的相对校正因子,并进行含量计算,实现一测多评(QAMS),同时采用外标法测定3批蚁参蠲痹胶囊中上述5个化学成分的含量,比较计算值与实测值的差异,验证QAMS法的准确性;色谱条件:采用Kromasil 100-5 C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.02%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长270 nm,柱温20℃。采用HPLC法,建立蚁参蠲痹胶囊HPLC指纹图谱,对共有峰进行归属,通过相似度评价、聚类分析、主成分分析对指纹图谱进行评价;色谱条件:采用Agilent 5 TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.02%磷酸水为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1),检测波长320、270 nm,柱温20℃。结果:建立的相对校正因子重现性良好,采用校正因子计算的含量值与实测值之间无显著差异,相对误差均在±2%以内。建立了蚁参蠲痹胶囊HPLC指纹图谱,共标定了36个共有峰,通过与对照品比较,指认出12个成分,10批样品指纹图谱与对照指纹图谱的相似度均大于0.95。采用QAMS法测得3批样品中桂皮醛、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、苍术素和丹参酮Ⅱ_(A)的含量分别为0.077~0.244、0.402~0.472、0.098~0.136、0.086~0.186、0.454~0.517 mg·g^(-1),QAMS法计算值与ESM实测值间均无显著性差异。结论:所建立的QAMS含量测定方法及HPLC指纹图谱简便、准确,重复性好,可为蚁参蠲痹胶囊的质量评价提供参考。