猪苓多糖注射液联合顺铂腹腔给药治疗胃癌腹腔积液患者的疗效观察

目的观察猪苓多糖注射液联合顺铂腹腔给药治疗胃癌腹腔积液的临床疗效,并对其机制进行分析。方法 66例胃癌伴恶性腹水患者随机分为治疗组和对照组,每组33例。治疗组应用猪苓多糖注射液联合顺铂腹腔给药;对照组给予顺铂腹腔给药。治疗1个月后对2组的治疗效果及不良反应进行比较。ELISA法检测用药前后外周血白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;实时定量PCR检测用药前后腹水中Gil1、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、MMP-9水平。结果治疗组患者腹水量、生活质量评分改善程度均比对照组明显,且治疗组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。2组治疗前外周血IL-6、TNF-α水平差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2组IL-6、TNF-α水平均明显低于术前(P<0.05),治疗组IL-6和TNF-α变化程度优于对照组(P<0.05)。治疗前2组腹水Gil1、MMP-2、MMP-9的m RNA表达差异无统计学意义(P>0.05);治疗后2组Gil1、MMP-2、MMP-9的m RNA水平均明显低于术前(P<0.05),治疗组Gil1、MMP-2和MMP-9的m RNA变化程度优于对照组(P<0.05)。结论猪苓多糖注射液联合顺铂腹腔给药对胃癌恶性腹腔积液有良好的效果,其机制可能与抑制炎性因子,降低Gil1、MMPs的表达。

Krüppel样转录因子12在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达及其意义

目的:检测Krüppel样转录因子12(KLF12)蛋白在结直肠癌患者肿瘤组织和血清中的表达,并探讨其临床价值。方法:选择120例结直肠癌手术患者作为研究对象(病例组),收集结直肠癌组织和癌旁组织的石蜡标本,选择体检正常者100人作为对照组。免疫组织化学染色检测结直肠癌组织和癌旁肠组织中KLF12、nm23、周期素E1(CyclinE1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白的表达情况;ELISA法检测手术前和术后1个月时患者血清中KLF12水平并检测对照组受试者血清中KLF12水平。结果:结直肠癌组织中KLF12、CyclinE1、MMP-2和MMP-9蛋白阳性表达率高于癌旁组织(χ2=66.155,52.795,64.515,52.632;P<0.001),nm23蛋白阳性表达率低于癌旁组织(χ2=13.019,P<0.001)。Spearman相关分析,结直肠癌组织中KLF12蛋白与MMP-2和MMP-9蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.396 3,P<0.001;r=0.326 4,P<0.001),与nm23蛋白表达水平呈负相关关系(r=-0.227 3,P=0.013)。病例组结直肠癌患者手术前血清中KLF12蛋白表达水平高于对照组,血清中KLF12蛋白表达水平受试者工作特征曲线(ROC)的最佳cut-off值为3.795μg·L^(-1),曲线下面积为0.834,其对诊断结直肠癌的敏感度和特异度分别为60.8%和94.0%。病例组结直肠癌患者手术后血清中KLF12蛋白表达水平降低,但仍高于对照组(t=2.708,P=0.007);结直肠癌组织中KLF12蛋白表达水平与血清中KLF12蛋白表达水平呈正相关关系(r=0.406 9,P<0.001)。淋巴结转移程度为N3的(N3组)患者血清中KLF12水平最高,N0组患者最低(F=21.731,P<0.001)。结论:KLF12蛋白可能参与了结直肠癌的侵袭转移,检测患者血清中KLF12蛋白表达水平可能对判断病情和预测淋巴结转移有价值。

Gli1基因在胃癌组织中的表达及其对胃癌细胞生物学特性的影响

目的:探讨胶质瘤相关癌基因1(Gli1)在胃癌组织中的表达,阐明Gli1基因对胃癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法:收集95例胃癌患者胃癌组织和癌旁组织,RT-qPCR法检测胃癌组织和癌旁组织中Gli1mRNA表达水平,免疫组织化学法检测胃癌组织和癌旁组织中Gli1蛋白表达水平。以人胃癌细胞株MKN28、BGC823和SGC7901为研究对象,胃永生化上皮细胞株GES-1作为对照,RT-qPCR法检测各细胞株中Gli1mRNA表达水平。将Gli1-siRNA转染BGC823细胞后,实验分为对照组、con-siRNA组和Gli1-siRNA组;RT-qPCR法检测各组细胞中Gli1mRNA表达水平,CCK-8检测细胞增殖情况,Transwell小室检测细胞迁移能力,Western blotting法检测各组细胞P27、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白的表达水平。结果:胃癌组织中Gli1mRNA表达水平和蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织(t=27.606,P<0.01;χ2=54.782,P<0.01)。在GES-1、MKN28、SGC7901和BGC823细胞中Gli1mRNA表达水平比较差异有统计学意义(F=86.341,P<0.01)。Gli1-siRNA组Gli1mRNA表达水平明显低于对照组和con-siRNA组(F=48.322,P<0.01)。Gli1-siRNA组胃癌细胞增殖率明显低于对照组和con-siRNA组(F=54.428,P<0.01)。Gli1-siRNA组胃癌细胞的迁移数低于对照组和con-siRNA组(F=257.788,P<0.01)。与对照组比较,con-siRNA组细胞中P27、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);与con-siRNA组比较,Gli1-siRNA组细胞中P27蛋白表达水平明显升高(t=-3.776,P=0.020),MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(t=3.479,P=0.025;t=5.487,P=0.005)。结论:Gli1在胃癌组织表达水平高于癌旁组织,抑制Gli1基因的表达能抑制胃癌细胞增殖和迁移能力。

TGF-β1、LMO1在胃癌组织中的表达及意义

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)、LMO1在胃癌组织的表达及二者的相关性,探讨TGF-β1、LMO1在胃癌发生发展中的作用。方法选取60例胃癌和50例正常胃组织,采用Real time-PCR和Western Blot检测TGF-β1、LMO1 mRNA和蛋白表达水平。采用免疫组织化学SP法检测TGF-β1、LMO1蛋白表达,分析TGF-β1、LMO1表达与胃癌临床病理特征的关系。结果胃癌组织TGF-β1、LMO1基因的mRNA和蛋白表达水平均比正常胃黏膜组织明显增强(P<0.05)。TGF-β1、LMO1蛋白在胃癌组织中阳性表达率明显高于正常胃黏膜组织(P<0.05)。TGF-β1、LMO1表达与年龄、性别、发病部位无关(P>0.05),而与肿瘤浸润深度、分化程度、TNM临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。TGF-β1、LMO1表达呈正相关(r=0.875,P=0.001)。结论胃癌组织TGF-β1、LMO1表达异常增高,可能参与了胃癌发生发展。TGF-β1、LMO1可作为反映胃癌恶性生物学行为及治疗的分子指标之一。

胃癌中IGF-Ⅰ、Ⅱ及IGF-ⅠR的表达与临床病理关系的研究

目的探讨在胃癌中IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR及IGF-Ⅱ的表达以及与临床病理的关系。方法取原发胃癌组织、距胃癌组织5cm以上癌旁组织的标本共计40例和胃溃疡切除后经病理证实为正常胃组织的标本共计10例,采用免疫组织化学SP法检测3组IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ的表达,将结果与患者的临床病理指标进行综合分析。结果癌旁组织和正常胃组织中IGF-Ⅰ的表达率明显低于胃癌组织(P<0.05)。PTNM分期中Ⅰ～Ⅱ期低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05);淋巴结阴性组低于淋巴结阳性组(P<0.05);未侵及全层组低于侵及全层组(P<0.05)。癌旁组织和正常胃组织中IGF-ⅠR的表达率明显低于胃癌组织(P<0.05)。PTNM分期中Ⅰ～Ⅱ期低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05);淋巴结阴性组低于有淋巴结阳性组(P<0.05);未侵及全层组及侵低于全层组(P<0.05)。癌旁组织和正常胃组织中IGF-Ⅱ的表达率明显低于胃癌组织(P<0.05)。PTNM分期中Ⅰ～Ⅱ期低于Ⅲ～Ⅳ期(P<0.05);淋巴结阴性组低于有淋巴结阳性组(P<0.05);未侵及全层组低于侵及全层组(P<0.05)。结论 IGF-Ⅰ、IGF-ⅠR、IGF-Ⅱ的显著表达与胃癌的发生发展有关,且在胃癌的侵袭和转移中起重要作用。

胰岛素样生长因子在胃癌中的表达与意义

目的探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)、胰岛素样生长因子-Ⅱ(insulin-like growth factor-Ⅱ,IGF-Ⅱ)在胃癌中的表达及与胃癌浸润转移等生物学行为的关系。方法对胃癌患者40例的癌组织、距原发灶5cm以上切缘组织和正常胃组织标本10例进行IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ免疫组织化学染色。结果①胃癌组织中IGF-Ⅰ的表达率显著高于切缘组织和对照组(P<0.05);切缘组织和对照组中表达率差异无统计学意义(P>0.05);病理分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P<0.05);无淋巴结转移组与淋巴结转移组相比差异有统计学意义(P<0.05);未侵及全层组与侵及全层组相比差异有统计学意义(P<0.05)。②胃癌组织中IGF-Ⅱ的表达率显著高于切缘组织和对照组(P<0.05)。切缘组织和对照组中表达率差异无统计学意义(P>0.05)。病理分期中Ⅰ、Ⅱ期与Ⅲ、Ⅳ期比较差异有统计学意义(P<0.05);无淋巴结转移组与淋巴结转移组相比差异有统计学意义(P<0.05);未侵及全层组与侵及全层组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论 IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的高表达与胃癌的发生有关,且均参与了胃癌的侵袭和转移。

TGF-β_1促进人胃癌MKN28细胞上皮-间质转化和转移的研究

目的观察转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导对人胃癌MKN28细胞上皮-间质转化(EMT)标志物、LMO1及转移相关基因表达的影响,探讨LMO1基因沉默在TGF-β_1诱导的MKN28细胞EMT及转移中的作用。方法体外原代培养人胃癌MKN28细胞,采用TGF-β_1诱导法建立EMT模型,将细胞分成4组:对照组(5%BSA)、TGF-β_1诱导组(10μg/L)、阴性转染组(TGF-β_1+阴性转染siRNA)、LMO1-siRNA转染组(TGF-β_1+LMO1-siRNA)。用Real time-PCR和Western blot检测各组EMT标志物[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)]、LMO1表达情况。Transwell小室检测细胞的侵袭转移能力。Western blot检测转移相关蛋白[基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)]表达情况。结果TGF-β_1可诱导MKN28细胞发生明显的EMT进程,同时伴随E-cadherin表达下调和N-cadherin、LMO1、MMP-9、VEGF表达上调(P<0.01),且细胞侵袭转移能力明显增强(P<0.01)。下调LMO1表达能使TGF-β_1诱导的E-cadherin下调及N-cadherin、MMP-9、VEGF的上调得到部分恢复,细胞侵袭转移能力得到显著抑制(P<0.01)。结论TGF-β_1通过上调LMO1表达在促进胃癌MKN28细胞发生EMT及侵袭转移中发挥重要作用。下调LMO1表达能够显著抑制胃癌的侵袭转移过程。

C57BL／6小鼠鼠尾静脉注射不同方法的对比

经鼠尾静脉注射给药或细胞回输治疗是免疫学小鼠动物实验中的常用操作技术，我们通过比较小鼠鼠尾静脉的不同注射方法，寻找穿刺成功率更高、安全、可靠的方法。

LMO1基因在胃癌侵袭转移中的作用及其机制

目的 观察LMO1在胃癌组织和人胃癌细胞株中的表达水平,探讨LMO1基因沉默对人胃癌MKN28细胞侵袭转移的影响.方法 采用免疫组化技术检测30例胃癌和癌旁组织中LOM1蛋白表达.实时定量PCR和Western blot检测人胃癌细胞株AGS、BGC-823、SGC-7901、MKN28和正常人胃黏膜上皮细胞GES中LMO1 mRNA和蛋白表达及LMO1特异性siRNA对LMO1mRNA和蛋白表达的影响.Transwell小室实验检测MKN28侵袭转移能力,Western blot检测E-钙黏蛋白、基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinase-9,MMP-9）、血管内皮生长因子（vascular endothelialgrowth factor,VEGF）蛋白的表达.结果 胃癌组织中LMO1蛋白表达阳性率（77％）高于癌旁组织（17％）（x2=21.70,P＜0.01）.淋巴结转移阳性胃癌患者LOM1蛋白阳性率高于无淋巴结转移患者（x2=5.83,P=0.02）.胃癌细胞株AGS、BGC-823、SGC-7901、MKN28的LMO1mRNA和蛋白表达水平均较正常人胃黏膜上皮细胞GES升高,以MKN28细胞升高最为明显（均P＜0.01）.与阴性转染组比较,LMO1-siRNA转染组LMO1 mRNA和蛋白表达水平均降低（均P＜0.01）.LMO1基因沉默降低了胃癌MKN28细胞的侵袭转移能力（t=-11.53,P＜0.01;t=-10.68,P＜0.01）.与阴性转染组比较,LMO1-siRNA转染组E-钙黏蛋白表达水平升高,MMP-9和VEGF表达水平降低（均P＜0.01）.结论 LMO1基因在胃癌组织和胃癌细胞株中高表达,可能通过调控E-钙黏蛋白、MMP-9和VEGF表达参与胃癌的侵袭转移过程.

七叶皂苷对人胃癌耐药细胞株SGC7901/5-氟尿嘧啶耐药性的影响及其机制

目的检测七叶皂苷（Escin）对胃癌耐药细胞株SGC7901/5-氟尿嘧啶（5-Fu）耐药性的影响，并探讨分子机制。方法噻唑蓝（MTT）法检测Escin（80 μg/ml）、5-Fu（20 μg/ml）单独或联合干预对细胞活性的影响。流式细胞术（FCM）检测Escin对SGC7901/5-Fu细胞凋亡的影响。实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）和Western blot法检测各组细胞耐药相关基因表达。结果MTT结果显示，在20、40 μg/ml的5-Fu作用后细胞活性由强到弱分别为SGC7901/5-Fu、SGC7901、GES-1（P＝0.033、0.000）。随Escin剂量增高SGC7901/5-Fu细胞活性逐渐降低（P＝0.000）。将Escin与5-Fu联合作用后SGC7901/5-Fu细胞活性在空白组[（104.38±22.83）%]、Escin组[（52.65±10.14）%]、5-Fu组[（76.26±12.84）%]、Escin＋5-Fu组[（28.42±6.48）%]依次下降（P＝0.000）。与对照组比较，Escin作用后，SGC7901/5-Fu细胞的凋亡率[（28.44±4.64）%]比对照组[（10.46±2.04）%]明显升高（P＝0.000）。Real-time PCR和Western blot结果显示，与对照组比较，Escin作用后，SGC7901/5-Fu细胞中胸腺嘧啶合成酶（TS）、胶质瘤相关癌基因1（Gil1）、生存素（Survivin）、B淋巴细胞/白血病-2（bcl-2）的表达均比对照组减弱，半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶（Caspase）-3表达比对照组增强。结论Escin能通过调节耐药相关基因的表达而减弱胃癌细胞对5-Fu的耐药性。

胃癌患者外周血与肿瘤组织中胶质瘤相关癌基因1的表达及其临床意义

目的探讨胶质瘤相关癌基因1（glioma—associatedoncogene1，Glil）在胃癌患者外周血与肿瘤组织中的表达及其临床意义。方法选取经病理确诊行根治性手术的95例胃癌患者作为胃癌手术组，手术后确诊复发转移的40例患者作为复发组，同时选取正常人50例作为对照组。用免疫组化染色方法检测肿瘤组织中Glil表达，ELISA方法检测各组外周血中Glil的含量。结果胃癌手术组术前外周血中Glil的水平高于正常对照组[（9．21±1．37）ng／ml比（0．79±0．18）ng／ml，t=43．193，P〈0．001]；手术后1个月时Glil的水平下降，与对照组比较差异无统计学意义（t=0．722，P=0．472）；复发组外周血Glil的水平为（14．37±2．74）ng／ml，高于手术组术前水平（t=14．575，P〈0．001）。手术组肿瘤组织中Glil水平比正常胃黏膜高（t=33．47l，P〈0．001）；复发组肿瘤组织中Glil水平为（14．374-2．74）ng／ml高于手术组，差异有统计学意义（t=8．808，P〈0．001）。结论Glil在胃癌患者外周血和肿瘤组织中表达升高，检测外周血和肿瘤组织Glil水平可预测复发。

Krupple样转录因子12在结直肠癌组织表达及其与肿瘤上皮-间充质转化的关系

目的探讨Krüpple样转录因子12（KLF12）参与结直肠癌上皮-间充质转化（EMT）的机制。方法应用免疫组织化学技术检测85例结直肠癌手术患者肿瘤与癌旁肠黏膜组织中KLF12及E-钙黏素（E-cadherin）、N-钙黏素（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、Snail蛋白表达，患者均有完整的临床及随访资料。合成KLF12-小干扰RNA（siRNA）转染结肠癌细胞株HT29；噻唑蓝（MTT）法检测细胞活性；划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭能力；荧光实时定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测各基因的mRNA和蛋白表达。结果免疫组织化学结果显示结直肠癌组织中KLF12、N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白阳性率明显高于癌旁肠黏膜，而E-cadherin在肿瘤组织中的阳性率低于癌旁肠黏膜（χ^＝43.724、26.145、35.788、10.985、59.225，P＝0.000）。KLF12蛋白阳性表达的患者肿瘤浸润程度较深（χ^＝7.773，P＝0.005）。KLF12蛋白阳性表达的患者生存率低于阴性者（χ^＝8.724，P＝0.003）。各结肠癌细胞株中，HT29的KLF12蛋白表达最强（P＝0.000）。抑制HT29细胞KLF12表达后细胞的活性及迁移和侵袭能力明显减弱（F＝22.541、15.002、21.908，P＝0.000）；抑制HT29细胞KLF12表达后N-cadherin、Snail表达减弱，E-cadherin表达增强（P＝0.000）。结论KLF12通过参与了肿瘤的EMT过程来促进结直肠癌的侵袭转移。

一例注射用头孢呋辛钠致高眼压伴高血压患者的护理

注射用头孢呋辛钠为第二代头孢菌素，对革兰阳性菌、阴性菌和厌氧菌均有抗菌活性，尤其对金黄色葡萄球菌、链球菌、脑膜炎球菌、流感杆菌、大肠杆菌、沙门菌等有高度抗菌作用[1~2]。临床上主要用于呼吸系统、泌尿系统、皮肤、骨关节和软组织感染。使用前要询问患者有无药物过敏史，必须做头孢呋辛钠皮肤试敏，如为阴性方可使用。输入过程中，要严密观察用药后的反应，滴入速度不宜过快。2014年12月本校医院收治1例患者因泌尿系统感染就诊，静脉滴注头孢呋辛钠10 min 后出现高眼压伴高血压症状，经积极对症治疗和护理，患者症状很快缓解，现报道如下。