河北省健康胎儿脐带血血常规红细胞参数参考范围的研究与建立

目的建立河北省妊娠期胎儿脐带血血常规红细胞参数的参考范围,并探讨孕周、性别与胎儿红细胞参数参考范围变化的关系。方法收集河北省人民医院2010年5月至2021年7月因各种指征行产前诊断随访结果均正常的3069例孕18~38周的胎儿脐带血,进行脐带血血常规检测,根据不同孕周对血常规红细胞计数、血红蛋白浓度、红细胞压积、平均红细胞体积、平均红细胞血红蛋白量、平均红细胞血红蛋白浓度的检测结果进行汇总分析。结果胎儿的血常规红细胞各参数结果呈非正态分布。随着孕周增加红细胞计数、血红蛋白、红细胞压积、平均血红蛋白浓度逐渐升高,红细胞平均体积、平均血红蛋白含量逐渐降低。不同性别胎儿红细胞计数、血红蛋白、平均血红蛋白浓度、红细胞平均体积、平均血红蛋白含量的总体差异具有统计学意义(P<0.05)。结论河北省22~38周健康胎儿脐带血血细胞参数在不同孕周及性别之间存在差异,应该独立制订河北省妊娠期胎儿的血细胞参数参考范围,有助于胎儿产前和早产儿疾病的诊断。

核型分析联合其他遗传学检测技术在高龄孕妇产前诊断中的应用

目的探讨核型分析联合单核苷酸多态性微阵列技术(single nucleotide polymorphism array,SNP array)或荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH)或细菌人工染色体微珠标记技术(BACs on Beads,BoBs)在高龄孕妇产前诊断中的应用价值。方法回顾性研究因高龄行产前诊断的930例孕妇,全部行核型分析,联合BoBs检测420例,联合SNP array检测343例,联合FISH检测167例,分析其染色体结果及妊娠结局。结果930例胎儿中,核型异常192例(20.7%),三体综合征中以21-三体居多,性染色体异常中以克氏征居多。在核型联合其他检测中,联合SNP array检测可显著提高胎儿染色体异常检出率,差异有统计学意义(χ^(2)=6.191,P=0.013)。对于染色体嵌合体的诊断,核型联合FISH检测可更精准地确定嵌合类型及比例。孤立性高龄胎儿染色体异常风险相对较低,高龄合并无创高危胎儿染色体异常率最高,在高龄合并超声软指标中,随超声软指标数目增多,染色体异常率随之升高(P=0.001)。高龄孕妇年龄与核型异常、非整倍体尤其21三体的发生率呈正相关(P<0.05)。结论孤立性高龄孕妇胎儿染色体异常风险相对较低,高龄合并无创高危胎儿染色体异常的风险高,随超声软指标数目增多、孕妇年龄增长胎儿染色体异常的风险增加,核型联合FISH检测可更精准地确定嵌合类型及比例,核型分析联合其他检测尤其与SNP array技术可显著提高染色体异常检出率,有利于遗传咨询及再生育指导,是高龄孕妇首选的产前诊断方案。

1317例高危孕妇胎儿产前分子细胞遗传学分析

目的探讨染色体核型分析及单核苷酸多态性微阵列技术(SNP-Array)在高危孕妇胎儿中的产前诊断应用价值。方法回顾性研究1317例具有产前诊断指征的高危孕妇胎儿,孕妇年龄17~48周岁,孕周17~34周。行G显带核型分析联合SNP-Array检测,统计分析其染色体结果及妊娠结局。结果在1317例胎儿染色体中,核型多态性44例(3.3%),核型异常152例(11.5%),SNP-Array异常241例(18.3%),两种检测比较差异有统计学意义。两种检测联合应用染色体异常270例(20.5%),与核型异常检出率比较差异均有统计学意义。核型与SNP-Array均异常123例(9.3%),核型正常中SNP-Array异常110例(9.8%),SNP-Array正常中核型异常31例(2.9%)。剔除其他指标干扰,在孤立性指标中,孤立性无创高危组的胎儿核型和SNP-Array异常率最高。合并两类指标中,高龄仅合并无创高危组的胎儿核型及SNP-Array异常率最高。21-三体发生率与年龄呈正相关(P=0.037)。在不良孕史中,孤立性胎停育史组的胎儿核型异常率最高,其他不良孕史合并超声软指标阳性组SNP-Array异常率最高。在孤立性超声软指标阳性分组中,核型分析仅孤立性心内强回声灶的胎儿检出染色体异常,SNP-Array检测孤立性NF增厚的胎儿染色体异常率最高,其次依次是孤立性长骨短、孤立性侧脑室扩张。剔除其他指征仅超声异常者,随超声异常数目增多,核型和SNP-Array异常率随之升高,差异有统计学意义。结论21-三体发生率与年龄呈正相关,无创高危、胎停育史、长骨短、NF增厚和侧脑室扩张提示染色体异常风险升高,心内强回声灶仍不排除染色体异常的可能,遗传咨询中双亲验证后的家系综合分析仍十分重要,核型分析联合SNP-Array技术可提高染色体异常检出率,核型结果与SNP-Array结果相互补充,可以更精准地分析染色体异常,有利于遗传咨询及再生育指导,是高危孕妇胎儿首选的产前诊断方案。

嵌合型Y染色体等臂双着丝粒致胎儿主动脉狭窄1例报告及文献复习

目的:通过对先天性主动脉狭窄(AS)胎儿产前诊断结果进行遗传学分析,明确其可能的致病原因。方法:1例孕25周孕妇,因“胎儿AS”行羊膜腔穿刺术采集羊水,行染色体G显带核型分析联合单核苷酸多态性微阵列(SNP-array)检测。同时采集胎儿父母外周血,行染色体核型分析。结果:胎儿核型分析,为嵌合型Y染色体等臂双着丝粒;SNP-array分析,胎儿染色体Yp11.31q11.21区段存在11.2 Mb片段的重复,同时Yq11.21q11.23区段存在14.8 Mb片段的缺失。胎儿父母均为正常核型,考虑其为新发变异。经充分遗传咨询后,孕妇及家属选择回当地引产。结论:嵌合型Y染色体等臂双着丝粒的染色体核型可能是男性胎儿表型为AS的原因,羊水细胞染色体核型分析联合SNP-array检测有助于该病的早期诊断。

卵巢储备功能减退相关基因及组学研究进展

卵巢储备功能减退(DOR)是引起女性不孕症的常见原因之一。由于卵泡闭锁和排卵,随着年龄的增长,部分患者出现卵巢可募集的卵泡数目减少和受精能力减弱,以及同时伴有卵母细胞质量的下降和自然流产风险增高的现象。卵巢颗粒细胞(GCs)的程序性死亡可能导致了DOR卵巢中的大多数卵泡的最终闭锁,但是DOR女性生殖力低下的具体机制尚不明确,因此解析DOR的发病机制对于DOR的治疗和预防有着重要的指导意义。近年来对于DOR基因组学、代谢组学和蛋白质组学的研究取得了一定的进展,研究显示基因突变、脂类小分子和蛋白质分子的变化均与DOR的发生有关。本文就近年来在DOR基因组学、代谢组学和蛋白质组学中的研究进展作一综述,以期为早期诊断、干预和治疗DOR患者提供新思路。

array-CGH对胎儿11号染色体畸变的遗传学分析1例

临床资料患者某孕妇，30岁，孕4产1，足月剖宫产一男孩，体健，现孕23＋3周，因胎儿颈部水囊瘤要求产前诊断。

遗传性痉挛性截瘫IBA57基因新发突变1例

采用全外显子测序对1例疑似遗传性痉挛性截瘫病例进行相关基因检测,同时行羊膜腔穿刺术提取胎儿DNA,对可疑致病性变异位点进行Sanger测序验证。结果提示,患儿存在IBA57基因c.22C﹥T(p.R8X)(父源)和c.341G﹥C(p.G114A)(母源)复合性杂合突变,该突变尚未见文献报道,结合临床表型、遗传方式及基因测序结果,先证者所患疾病为痉挛性截瘫74型。

应用二代测序技术招测罕见病的遗传学研究

罕见病目前国际上对其没有统一的标准,一般指临床发病率低,较少见的疾病。罕见病在欧洲定义是发病率〈1/2 000的,在美国指患病人数〈20万的疾病,而中华医学会遗传学分会2010年将那些患病率〈1/500 000或新生儿〈1/10 000发病率的疾病定义为罕见病[1-3]。二代测序技术能够平行对多个靶基因进行测序,

罕见7q22.1q31.2拷贝数变异1例患者的产前诊断及遗传学分析

26岁,G2P0,2021年孕19周因"胎儿脊柱裂"引产。本次为自然妊娠,胎儿颈后透明层(nuchal translucency,NT)检查未见异常,无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)提示为低风险。孕23^(+5)周超声显示胎儿鼻骨发育不良,右锁骨下动脉迷走,永存左上腔静脉(图1)。经遗传咨询后行羊膜腔穿刺术,常规进行染色体G显带核型分析与拷贝数变异测序(copy number variation sequencing,CNV-seq)检测。本研究通过了河北省人民医院医学伦理委员会的审查(2023150),孕妇及其家属均签署了临床研究知情同意书。

胚胎停育患者绒毛组织染色体检测分析

目的分析胚胎停育患者绒毛组织染色体检测结果。方法选取胚胎停育患者的流产绒毛组织240例份,采用基因组拷贝数变异测序检测染色体。结果240例份胚胎停育患者流产绒毛组织中,染色体异常181例份、染色体正常59例份。181例份染色体异常绒毛组织中,染色体数目异常97例份,其中常染色体三体76例份、性染色体单体18例份、三倍体3例份;结构异常120例份;部分标本同时出现染色体数目异常和结构异常。育龄(208例)和高龄(32例)胚胎停育患者流产绒毛组织中染色体异常分别为157例份、24例份。育龄者常染色体三体61例份、性染色体单体16例份、三倍体3例份,高龄者分别为15、2、0例份,两者常染色体三体例份数比较,P<0.05。胚胎停育1次、2次、3次、4次、≥5次患者(136、51、33、15、5例)流产绒毛组织染色体异常例份数分别为100、46、22、9、4例份,胚胎停育2次者分别与胚胎停育3次、4次者比较,P均<0.05。胚胎停育1次、2次、3次、4次、≥5次患者流产绒毛组织染色体数目异常例份数分别为58、26、11、2、0例份,胚胎停育1次者、2次者分别与胚胎停育4次者比较,P均<0.05。CNV一共检测出120例份,其中18例份为致病性,2例份为可能致病,87例份为临床意义未明,13例份为可能良性。结论胚胎停育患者流产绒毛组织染色体异常率较高,异常类型为染色体数目异常或结构异常,常染色体多数以三体发生常见,其中16-三体发生率最高,其次为22-三体、15-三体、21-三体等;性染色体异常以X单体为常见。育龄和高龄胚胎停育患者流产绒毛组织染色体异常无差异,但不同胚胎停育次数患者流产绒毛组织染色体异常存在差异。

趋化因子及其受体在正常早期妊娠中的作用研究进展

趋化因子是一类结构相似的小分子家族,其与膜结合的G蛋白偶联受体结合而发挥作用,广泛参与细胞免疫、生长发育、炎症等多种生理功能。趋化因子在母胎界面的胚胎滋养层、蜕膜基质细胞及蜕膜免疫细胞中普遍表达,并通过其受体发挥作用,一方面能够促进子宫内膜蜕膜化、提高子宫容受性,另一方面可以调控滋养层的增殖、迁移和侵袭,促进胚胎着床和发育;此外,趋化因子可以募集外周免疫细胞到达蜕膜,进一步分化诱导母胎免疫耐受,并且介导胎盘血管形成,多方面参与正常妊娠的建立和维持。对趋化因子及其受体在正常早期妊娠中的作用机制进行总结,有利于更好地认识早期妊娠生理,并为治疗病理妊娠、妊娠合并症和并发症提供治疗新策略。

NPHP1基因纯合缺失所致肾消耗病一个家系的临床特征及遗传学分析

肾消耗病(nephronophthisis,NPHP)是一种常染色体隐性囊性肾病,是儿童肾衰竭最常见的原因,在引起NPHP的已知致病基因中,NPHP1是最常见的,约占NPHP病例的五分之一[1]。本病在国外报道居多,国内少有报道,目前认为位于染色体2q13的NPHP1基因纯合缺失是引起肾消耗病的主要原因,在我国关于NPHP的发病率没有确切数据,在全球约为1∶50000至1∶70000,占肾衰竭病例的10%~15%,占儿童肾移植的15%[2],1997年Hildebrandt等[3]首次发现NPHP1与肾消耗病有关。

NF1新突变致Ⅰ型神经纤维瘤病的遗传学分析

神经纤维瘤病是影响神经、皮肤、骨骼等多系统的遗传性、肿瘤易感性疾病,最常见的类型为Ⅰ型神经纤维瘤病(neurofibromatosis type 1, NF1),约占96%[1]。NF1是由编码神经纤维瘤蛋白(NF1蛋白)的NF1基因突变所致,遵循常染色体显性遗传,发病率为1/3 000~1/2 500[2]。

痉挛性截瘫4型的产前诊断及遗传咨询

目的 对一例孕26周双下肢瘫痪的孕妇实施遗传咨询及基因检测和介入性产前诊断,明确孕妇宫内胎儿的遗传信息和发育情况。方法 对孕妇采用芯片捕获高通量测序,其家系其他成员进行Sanger测序验证,随后通过羊膜腔穿刺和Sanger测序验证进一步对胎儿进行产前诊断。结果 全外显子组测序检测结果提示孕妇SPAST基因杂合突变,孕妇为常染色体显性痉挛性截瘫4型患者。该家系中3例患者均存在SPAST基因的同一位点致病性突变(c.1496G>A,p.Arg499His),其余家系成员及胎儿均不存在该致病突变位点。结论 遗传病是导致流产、死胎等不良妊娠结局和影响出生胎儿今后生活质量的重要原因。应用全外显子组测序技术和Sanger测序验证对遗传性痉挛性截瘫家系进行确诊,明确相关致病位点,有助于该家系的优生指导。

植物固醇血症ABCG5基因突变1例

研究1例植物固醇血症患儿中ABCG5基因突变与植物固醇血症的关系及其遗传学特点。采用Sanger测序检测相关基因,筛查其致病基因,以明确临床诊断,分析遗传方式。ABCG5基因突变是植物固醇血症的致病原因之一,及早诊断、及时干预可以改善预后。

心肌梗死患者Lp-PLA2基因Y160X位点多态性检测的意义

目的:检测Lp-PLA2基因Y160X位点突变与心肌梗死(MI)的关系。方法:检测病例组和对照组LpPLA2基因多态性,Logistic回归分析Lp-PLA2多态性与MI的关系,以及病例组和对照组血脂、血糖、LpPLA2、超敏C反应蛋白(Hs CRP)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)水平,分析这些指标与MI及Lp-PLA2基因突变的关系。结果:病例组总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDLC)、Lp-PLA2、Hs CRP、IL-6水平及家族史阳性率高于对照组,HDLC、IL-10水平低于对照组(P<0.05);发病1周、1个月时Lp-PLA2、Hs CRP、IL-6水平下降,IL-10水平上升(P<0.05)。Lp-PLA2基因型是MI的独立危险因素。结论:Lp-PLA2基因Y160X位点突变可能是MI的原因。

冠心病患者外周血人枯草溶菌素转化酶9基因V312F位点的多态性及其临床意义

目的探讨外周血人枯草溶菌素转化酶9(PCSK9)基因V312F多态性与不同类型冠心病之间的关系及临床意义。方法选取2014年1月-2016年1月年在我院就诊的不同类型冠心病患者3 560例作为病例组,按照解剖及病理生理变化分为心绞痛、心肌梗死、无症状心肌缺血、缺血性心肌病、猝死5组,同期健康体检者1 000例为对照组。应用聚合酶链反应(PCR)结合DNA直接测序技术,对所有入选者PCSK9基因V312F(T/G)多态位点进行分型。多因素Logistic回归分析PCSK9基因V312F多态位点与不同类型冠心病的相关性。同时检测研究对象的血脂及PCSK9水平。结果病例组血清PCSK9、TC、TG、LDLC、阳性家族史的比例高于对照组,HDLC低于对照组(均P<0.05);病例组中猝死组各指标变化最明显,无症状心肌缺血组变化最小。病例组中TT、GT基因型和T等位基因频率分别为3.4%、16.6%和11.7%,明显高于对照组(1.1%、10.2%、6.2%)(P均<0.01)。病例组中猝死组TT、GT的基因型频率、T等位基因频率最高,无症状心肌缺血组最低(P<0.05)。Logistic回归分析发现PCSK9基因V312F(T/G)多态位点TT基因型与冠心病的严重程度有关(OR值为8.463,95%CI为3.505~17.854,P<0.001)。结论PCSK9基因V312F(T/G)位点基因突变与冠心病严重程度有关。

河北省42万余例孕妇无创产前检测结果回顾性分析一线筛查方案评价

目的评价无创产前检测(NIPT)做为一线筛查方法在胎儿染色体非整倍体筛查实践中的效果。方法河北省自2019年7月开展“NIPT民生项目”,为辖区内符合条件的孕妇(不适用人群除外)提供NIPT一线筛查,高风险孕妇接受遗传咨询、产前诊断和指导干预,低风险和假阳性孕妇继续进行产前检查,发现异常后再次到产前诊断中心遗传咨询并产前诊断。对所有孕妇进行随访,了解妊娠结局与新生儿健康状况。收集2019年7月至2020年7月接受NIPT一线筛查孕妇的检测结果和临床数据,统计分析NIPT一线筛查的检测性能指标。结果(1)筛查人群基本信息:共筛查孕妇424330例,成功检测423596例,检测成功率为99.83%(423596/424330)。成功检测孕妇的年龄为(28.8±4.5)岁,筛查孕周为(16.6±2.3)周,高龄孕妇(≥35岁)占比为10.18%(43132/423596),体外受精-胚胎移植(IVF-ET)受孕孕妇占比为1.58%(6713/423596),双胎妊娠孕妇占比为1.38%(5849/423596),初产妇占比为34.23%(144977/423596)。(2)筛查结果与检测性能:21三体、18三体和13三体分别确诊325例、73例和20例,敏感度分别为99.39%、100.00%和100.00%,特异度分别为99.98%、99.99%和99.98%,阳性预测值分别为75.76%、68.87%和21.51%;249190例孕妇同时出具补充报告,性染色体非整倍体、其他常染色体非整倍体和缺失或重复综合征分别确诊255例、10例和9例,阳性预测值分别为37.78%、6.06%和32.14%。NIPT筛查高龄、IVF-ET受孕、双胎妊娠孕妇目标染色体三体(21、18、13三体)的总体敏感度分别为99.29%、100.00%和90.00%,特异度均为99.93%,阳性预测值分别为82.25%、61.54%和69.23%。结论NIPT用于胎儿染色体非整倍体的全人群一线筛查效果显著、性能良好,可以为完善出生缺陷防控策略提供参考依据。

妊娠期糖尿病孕妇血清镁离子及维生素D的水平

目的测定GDM患者体内镁离子,25-羟基维生素D3与IL-6水平,进而探讨镁离子及25-羟基维生素D3与IL-6及糖代谢指标的关系。方法选择2018年10月至2019年10月常规产前检查住院分娩的妊娠晚期、单胎孕妇共200例,其中GDM组100例,糖耐量正常(NGT)组100例。检测2组孕妇外周血血清镁、25-羟基维生素D3、IL-6、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平,并分析血清镁、25-羟基维生素D3及IL-6与血糖、胰岛素抵抗指数及血脂水平的关系。结果GDM组TG、空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数均明显高于NGT组(P<0.05)。GDM组及NGT组血清镁离子水平分别为[(0.56±0.07)ng/ml;(0.92±0.11)ng/ml],2组比较,GDM组镁离子水平明显低于NGT组(P<0.05);GDM组及NGT组血清25-羟基维生素D3水平分别为[(15.32±3.24)ng/ml;(21.47±5.38)ng/ml],2组比较,GDM组镁离子水平明显低于NGT组(P<0.05);GDM组和NGT组血清中IL-6水平分别为[(164.70±39.54)ng/ml;(98.21±28.91)ng/ml],2组比较,GDM组血清中IL-6水平明显高于NGT组(P<0.05)。GDM组血清镁离子浓度与空腹血糖呈负相关(r=-0.64,P<0.01),25-羟基维生素D3水平与IL-6水平呈负相关(r=-0.57,P<0.01),IL-6水平与空腹血糖呈正相关(r=0.71,P<0.01)。结论孕期血清镁离子,25-羟基维生素D3及IL-6参与GDM血糖水平的调节,维生素D可直接通过炎性途径发挥胰岛素抵抗作用。

TSC1基因无义突变1例

结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)是一种以细胞增生和组织发育不良为特征的多系统受累的神经皮肤综合征,发病率为1/10000~1/6000,属于一种常染色体显性遗传病,80%~85%的TSC患者是由位于染色体9q34上的TSC1基因和/或染色体16p13上的TSC2基因突变引起,其中仅约10%~30%的TSC是由TSC1基因突变引起的[1-3];TSC临床表型多样化,这导致临床诊断困难,因此正确认识及诊断此类疾病尤为重要。近年来随着高通量测序技术的发展,基因测序为TSC的诊断提供了便利,并且基因诊断可作为独立的诊断标准。本研究中我们应用高通量测序一代测序确定了1个TSC家系,并对其行基因检测产前诊断,该突变位点为TSC1 c.749T>G(p.L250X),属于无义突变,国内罕见报道,现将该病例报道如下,旨在为临床TSC的诊断及产前诊断提供参考资料。