Ⅱa类组蛋白去乙酰化酶及抑制剂在胰岛素抵抗与糖尿病中的潜在作用（英文）

Ⅱ类组蛋白去乙酰化酶(HDACs)包括HDAC4、5、7和9,它们能够发生磷酸化作用和介导核质转位。HDACs在肝、脂肪组织中的糖脂代谢中发挥作用,可加重胰岛素抵抗程度和糖尿病进展。Ⅱ类HDACs抑制剂目前已成为研究热点,旨在抑制酶活性,改善代谢和胰岛素敏感性。

miR-224-5p调控PI3K/Akt/FoxO1轴抑制氧化应激减轻缺氧/复氧诱导的心肌细胞损伤

目的 探究miRNA-224-5p在缺氧/复氧(H/R)诱导心肌细胞损伤中的作用机制。方法 收集160例急性心肌梗死(AMI)患者和80例健康体检者(HC)的血浆检测miRNA-224-5p及生化指标。H9c2细胞分为对照组(Control)、H/R组、H/R+miR-224-5pNC组、H/R+miR-224-5p mimics组。噻唑蓝(MTT)检测细胞活力;试剂盒检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和乳酸脱氢酶(LDH);双荧光素酶报告基因实验验证miR-224-5p与PTEN的靶向关系;生物信息学方法对靶基因的潜在机制进行分析;qRT-PCR检测miRNA-224-5p mRNA表达;Western blotting检测PTEN、Bcl-2、Bax、Cleaved caspase-3、SOD2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Ak及p-FoxO1/FoxO1蛋白水平;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 与HC组相比,AMI组的血糖、 C反应蛋白、CK、CK-MB和cTnI水平均显著高于对照组(P<0.05)。AMI组和H/R组miR-224-5p的表达低于对照组(P<0.05);心肌细胞活力呈缺氧/复氧时间依赖性减少;PTEN是miR-224-5p的靶基因;PI3K/Akt通路是最显著富集的通路;与Control组相比,H/R组SOD2的活性降低,LDH的活性和MDA的含量均上升,细胞凋亡率上升(P<0.05),细胞中p-PI3K、p-Akt、p-FoxO1、SOD2和Bcl-2蛋白表达水平均降低,PTEN、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达均升高(P<0.05);与H/R组比较,H/R+miR-224-5p mimics组SOD2的活性显著上升,LDH、MDA的水平和细胞凋亡率均显著降低(P<0.05),细胞中p-PI3K、p-Akt、p-FoxO1、SOD2和Bcl-2的表达均上调,PTEN、Bax和Cleaved caspase3蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论 miR-224-5p过表达通过PI3K/Akt/FoxO1轴上调抗氧化基因SOD2的表达,缓解H/R诱导的H9c2细胞的氧化应激,减少细胞凋亡。

白藜芦醇在胰岛素抵抗、糖尿病中的研究进展

作为一种多酚类植物抗毒素,近年来白藜芦醇在胰岛素抵抗、糖尿病中的作用得到逐步关注,其作用机制涉及降低ROS产生和脂质过氧化,改善胰岛素抵抗,保护胰岛β细胞,减少脂质生成,刺激脂肪酸氧化,抑制LDL氧化,恢复血脂和脂蛋白浓度、调节肠道菌群等多个方面。

儿童身材矮小的病因分析及遗传学诊断

目的探讨身材矮小患儿的病因分布及遗传学诊断。方法回顾性分析86例身材矮小患儿的病因分布及临床特征。结果 86例身材矮小患儿中,病因有6种,以特发性矮小症(ISS,41%)和生长激素缺乏症(GHD,29%)最常见,遗传性疾病(14%)次之。将遗传性疾病组与ISS组、GHD组比较显示,各组患儿就诊年龄、身高、出生身长、出生体重、父母身高及胰岛素样生长因子1(IGF-1)水平差异均无统计学意义(P>0.05),但遗传性疾病组身高距同年龄同性别个体身高第3百分位数的差值(ΔP3)和身高标准差评分(HtSDS)显著低于ISS组(P<0.05),但与GHD组相比差异无统计学意义(P>0.05)。对遗传性疾病组患儿的临床表现进行分析,显示不同遗传性疾病表型谱存在异质性及表型重叠性。结论 ISS、GHD和遗传性疾病是儿童身材矮小的主要病因。对存在严重身材矮小的患儿,在除外GHD外,有必要进一步行遗传学检查明确诊断。

肠道菌群在二甲双胍降糖机制中的作用研究进展

二甲双胍因其安全有效、费用低、心血管获益等特点,是目前2型糖尿病(T2DM)患者应用最广泛的降糖药物〔1,2〕,但其具体作用机制仍不清楚。目前认为二甲双胍的主要降糖机制是通过磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶(AMPK)依赖〔3〕和非AMPK依赖〔4〕途径实现抑制糖异生的作用。然而研究发现,静脉注射二甲双胍比口服降糖效果差很多〔5〕,二甲双胍通过肠道相关通路也可发挥降糖作用〔6〕。近期啮齿类动物研究〔7〕和临床试验〔8〕表明,肠道菌群的改变有利于二甲双胍发挥降糖作用。本文主要阐述二甲双胍通过肠道菌群发挥降糖作用的研究进展。

体重正常的中老年人群血尿酸水平与高血压发生风险相关性的10年队列研究

目的通过10年队列研究探讨血尿酸(SUA)水平对高血压发生风险的相关性。方法采用观察性队列研究,于2008年选取≥40岁的无高血压体重正常的健康体检者2950名为研究对象,采集流行病学问卷调查、体格检查及血尿酸、血脂、肝肾功能等指标检测数据,共随访10年。按照血尿酸基线水平四分位分为4组(Q1~Q4),高于正常参考范围者为Q5组。比较各组高血压的累积发病率,Logistics回归分析血尿酸水平对新发高血压的相关性,受试者工作特征(ROC)曲线分析血尿酸浓度对高血压的诊断价值。结果随着尿酸水平的增加,体重指数(BMI)、腰围(WC)、血压、血脂、空腹血糖等指标也随之增加。高血压的累积发病率为21.69%,且发病率随着基线血尿酸的升高而增加。Q1~Q5五组人群的高血压发病率分别为15.78%,18.39%,22.61%,24.46%,27.70%。调整性别、年龄、BMI,WC,总胆固醇,三酰甘油,高密度脂蛋白胆固醇及空腹血糖等混杂因素后,多因素Logistic回归分析结果显示,与Q1组相比,Q3、Q4、Q5组人群发生高血压的风险显著增加(OR=2.359、3.650和4.041)。Q2组无统计学差异(OR=1.653)。ROC曲线分析血尿酸水平对高血压无诊断价值。结论正常体重的中老年人群血尿酸水平增高可作为评估高血压发生风险的预测指标。

Cortex ID分析法用于^(18)F-FDG PET脑显像术前定位局灶性脑皮质发育不良致痫灶的临床价值分析

背景局灶性脑皮质发育不良(FCD)的治疗主要依靠外科切除致痫灶,其疗效及远期预后与致痫灶的准确定位密切相关。正电子发射断层扫描(PET)脑显像在致痫灶定位诊断中具有优势。既往采用PET脑显像依靠视觉分析法进行诊断,受医师主观因素影响大。目的探讨Cortex ID分析法用于^(18)F-脱氧葡萄糖(FDG)PET脑显像术前定位FCD致痫灶的临床应用价值。方法回顾性分析2013年2月——2017年6月就诊于河北省人民医院并行手术治疗的局灶性癫痫患者34例,经术后病理检查证实为FCD所致癫痫。术前均行发作间期^(18)F-FDG PET脑显像,分别采用视觉分析法和Cortex ID分析法进行术前致痫灶定位,以术后病理检查结果为金标准,比较两种方法对FCD致痫灶的诊断价值。结果 34例FCD患者依据金标准证实有41个FCD致痫灶,视觉分析法对FCD致痫灶的检出率为70.7%(29/41),Cortex ID分析法对FCD致痫灶的检出率为82.9%(34/41);两种方法对FCD致痫灶的检出率比较,差异无统计学意义(χ~2=0.191,P=0.295)。两种方法对FCD致痫灶的诊断具有一致性(Kappa=0.396,P=0.007)。结论 Cortex ID分析法与视觉分析法对FCD致痫灶检出率无显著差异,两种方法诊断FCD致痫灶一致性一般。Cortex ID分析法重复性好,受主观影响小。

津力达颗粒对骨骼肌线粒体生物发生和胰岛素敏感性的影响

目的探讨中成药津力达颗粒对骨骼肌线粒体生物发生和胰岛素敏感性的影响。方法随机将雄性SD大鼠分为正常饲养组12只、高脂饲养组24只,6周后每组选取6只行高胰岛素-正葡萄糖钳夹试验,鉴定造模成功后,分别测定体重、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、腹腔注射葡萄糖耐量实验(IPGTT)、葡萄糖输注率(GIR)等。余造模成功高脂喂养的18只大鼠进一步分为模型组、吡格列酮干预组、津力达颗粒干预组,继续喂养8周,分别测定体重、血脂、IPGTT、GIR等,并检测骨骼肌组织中Toll样受体2(TLR2)蛋白,以及线粒体生物发生指标过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子α(PGC1α)、线粒体融合蛋白2(MFN2)、核呼吸因子1(NRF-1)和胰岛素信号通路磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(P-AKT)、葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)等蛋白的表达水平。结果①喂养6周后:与正常组相比,模型组体重、HOMA-IR均显著升高,IPGTT各时点血糖显著升高,GIR明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。②喂养14周后:与模型组相比,吡格列酮干预组和津力达颗粒干预组大鼠体重及血脂水平明显下降,IPGTT各时点血糖显著下降,GIR显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。③喂养14周后:与模型组相比,津力达颗粒干预组和吡格列酮干预组上调了线粒体生物发生指标PGC1α、MFN2、NRF-1以及胰岛素信号通路PI3K、P-AKT、GLUT4等蛋白表达水平,并且下调了骨骼肌组织中TLR2蛋白的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。结论津力达颗粒与吡格列酮类似,可能通过促进骨骼肌线粒体生物发生而改善胰岛素敏感性。

二甲双胍与新型降糖药联合应用对T2DM的治疗效果

对于2型糖尿病患者,在无禁忌且能耐受的情况下推荐二甲双胍作为首选。而随着病程的进展,在Hb A1c≥9%或单药治疗3个月Hb A1c仍不达标时,应考虑进行二联治疗。除常用降糖药物如磺脲类、格列奈类、α-葡萄糖苷酶抑制剂(AGI)、噻唑烷二酮类(TZDs)、二肽基肽酶-4(DPP-4)抑制剂等药物,近年新兴的降糖药物如胰高血糖素样肽-1(GLP-1)受体激动剂、钠-葡萄糖共转运体-2(SGLT-2)抑制剂、多巴胺D2受体激动剂、胆汁酸螯合剂、胰淀粉样多肽类似物亦展现了良好的降糖效果,本文就二甲双胍与新型降糖药物联合对T2DM不同疗效进行综述。

二甲双胍作用新机制

二甲双胍是全世界多个指南推荐的在没有禁忌时2型糖尿病的一线降糖用药,其作用机制一直备受关注,然而至今仍未完全明确。经典理论认为二甲双胍可直接作用于肝细胞,通过活化AMPK等机制来发挥其降糖功效。近期,研究发现二甲双胍可调节肠道菌群,减少肠道菌群中的脆弱拟杆菌,使特定胆汁酸升高,进而以不依赖AMPK的方式抑制肠道FXR信号,从而达到降糖作用;一些研究还发现二甲双胍通过抑制果糖1,6-二磷酸酶-1的活性,从而降低肝脏葡萄糖生成。还有不同的研究发现二甲双胍具有调节肠道菌群从而延缓衰老的功效,并有研究发现二甲双胍在抗癌方面也有着很好的作用。本文就近几年对二甲双胍新的作用机制研究结果进行综述。

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α在高脂饮食导致的大鼠骨骼肌线粒体功能紊乱中的作用机制

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)在高脂饮食诱导的胰岛素抵抗、线粒体损伤过程中的作用。 方法将Wistar大鼠数字抽签分为对照组和高脂饮食组(各10只),高脂喂养8周后,测定空腹血糖、胰岛素水平和葡萄糖输注率,留取大鼠骨骼肌;将分化好的L6细胞分为对照组、软脂酸干预组(PA组)、空质粒转染组(pcDNA3组)和PGC1α过表达质粒转染组(pcDNA3-PGC1α组),收集细胞(n=3)。实时荧光定量聚合酶链反应(RtPCR)和免疫印迹(Westernblotting)法测定骨骼肌和肌细胞的PGC1α、核呼吸因子(NRF1)、解偶联蛋白3(UCP3)、细胞色素C氧化酶1(COX1)的表达变化。 结果与对照组比较,高脂饮食组大鼠的空腹血糖、胰岛素水平升高,葡萄糖输注率降低,(6.0±0.7)mmol/L比(5.0±0.4)mmol/L、(23.3±3.0)mU/L比(12.9±1.8)mU/L、(14.2±1.8)%比(22.6±2.4)%(t值分别为-3.578、-6.679、6.265,均P<0.05),其骨骼肌PGC1α、NRF1、UCP3、COX1表达降低(P<0.05)。在软脂酸干预的L6肌细胞,PGC1α、NRF1、UCP3、COX1表达降低(P<0.05)。PGC1α过表达后,逆转了软脂酸诱导的NRF1、UCP3、COX1表达的下降(F值分别为30.079、96.883、226.772,均P<0.001)。 结论高脂饮食造成胰岛素抵抗和骨骼肌线粒体代谢相关基因表达下降,PGC1α表达增加可改善上述基因的表达。PGC-1α表达降低可能介导了高脂诱导的线粒体功能异常和胰岛素抵抗。

丝裂原活化蛋白激酶信号通路对软脂酸培养的肌细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子表达的调控作用

目的研究软脂酸对C2C12细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子(PGC-1α)表达的影响,揭示丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路与PGC-1α表达的关系,寻找软脂酸诱导C2C12细胞PGC-1α表达变化的上游调节通路。方法检测软脂酸培养的C2C12细胞PGC-1α、细胞外信号调节激酶(ERK)、jnk氨基末端激酶(JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)及其磷酸化蛋白phosp-38MAPK(P-p38MAPK)的表达变化。寻找发生变化的MAPKs信号通路,用筛选到的p38MAPK抑制剂进行干预,分为对照(Con)组、软脂酸(Palmitate)组、p38MAPK抑制剂组和Palmitate+p38MAPK抑制剂组,测定PGC-1α、p38MAPK总蛋白及其P-p38MAPK的表达。结果软脂酸培养的C2C12细胞PGC-1α蛋白表达下降,呈时间依赖性;ERK、phospho-ERK、JNK、phospho-JNK及p38MAPK表达无变化,P-p38MAPK表达升高。用p38MAPK抑制剂干预C2C12细胞,PGC-1α表达在Palmitate组最低,p38MAPK抑制剂组和Palmitate+p38MAPK抑制剂组较Palmitate组升高,p38MAPK抑制剂组最高。结论软脂酸诱导的PGC-1α表达下降可能由p38MAPK信号通路调控。

5-氨基-4-甲酰胺咪唑核糖核苷酸对软脂酸诱导的C2C12细胞线粒体功能相关蛋白表达的影响

研究脂质堆积诱发骨骼肌线粒体功能异常过程中，腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）激动剂对骨骼肌过氧化物酶体增殖物受体γ共激活因子1α（PGC1α）、线粒体融合蛋白2（Mfn2）、核呼吸因子1（NRF1）表达的影响。方法采用反转录聚合酶链式反应（RT—PCR）和免疫印迹（Western blotting）检测软脂酸干预下成肌细胞C2C12骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达水平。Western blotting检测哪种AMPK激动剂（AICAR、罗格列酮、二甲双胍）激活PGC1α作用最强及对骨骼肌细胞Mfn2和NRF1表达水平的影响，PGC1α激动剂上调和特异性小干扰RNA下调骨骼肌细胞PGC1α表达对Mfn2和NRF1的影响。结果软脂酸引起骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达水平下降（P〈0．05）。无论有无软脂酸存在，AICAR、罗格列酮、二甲双胍均能上调PGC1α表达，其中AICAR效果最明显（P〈0．05）。AICAR能逆转软脂酸诱发的骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达下降。Mfn2和NRF1蛋白表达水平随PGC1α表达水平增加而增加，表达水平下降而下降。结论AICAR能够缓解软脂酸对骨骼肌细胞PGC1α、Mfn2和NRF1表达的不利影响，并且可能通过增强PGC1α表达上调Mfn2和NRF1表达。