赖氨大黄酸对胆汁淤积性肝纤维化大鼠Smad2、Smad3表达的影响

目的探讨赖氨大黄酸(RHL)对胆汁淤积性肝纤维化模型大鼠Smad2、Smad3表达的影响。方法采用胆总管结扎(BDL)的手术方法建立大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,将大鼠随机分为5组:对照组、模型组、赖氨酸组、低剂量RHL组[35mg/(kg·d)]、高剂量RHL组[70mg/(kg·d)]。应用实时荧光定量PCR的方法检测大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3mRNA的相对表达量。Western blot的方法检测Smad2、Smad3蛋白时相对表达量的变化。结果与模型组大鼠比较,经RHL治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3mRNA相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组大鼠相比,经RHL治疗后胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝脏组织中Smad2、Smad3蛋白的相对表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 RHL能够抑制肝纤维化的发展,可能是通过抑制Smad2、Smad3mRNA和蛋白的表达,阻断TGF-β1/Smads信号传导通路实现的。

赖氨大黄酸通过调控miRNA表达水平抑制HBV增殖

目的研究赖氨大黄酸在体外对乙型肝炎病毒(HBV)增殖及病毒抗原表达的影响及分子机制,为研究赖氨大黄酸抗HBV作用机制奠定初步的实验依据。方法将HepG2.2.15细胞分为实验组(分别加入5、10、20、40、80μmol/L赖氨大黄酸)及不加赖氨大黄酸的对照组,分别培养24、48h收获上清液,采用四唑氮化合物(MTS)法检测细胞的增殖活性,采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg的表达水平,实时定量PCR(RT-PCT)检测其中HBV DNA的拷贝数及miR-210、miR-185、miR-199a-3p、miR-370、miR-196a、miR-184、miR-217的表达水平。miR-210、miR-185、miR-199a-3p、miR-370、miR-196a、miR-184、miR-217反义链(ASO)分别转染HepG2.2.15细胞后,MTS法检测细胞的增殖活性,ELISA法检测HBsAg和HBeAg的表达水平。结果在没有对HepG2.2.15细胞的增殖活性产生影响的情况下,赖氨大黄酸抑制了HBsAg的产生和HBV的增殖。20μmol/L的赖氨大黄酸明显促进了miR-210、miR-185、miR-199a-3p的表达,而抑制了miR-370的表达,与对照组相比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论赖氨大黄酸可能通过影响细胞内miRNA的表达抑制HepG2.2.15细胞中HBV的增殖和HBsAg的产生。

膜联蛋白A7在子宫内膜异位症内膜组织中的表达

目的 探讨膜联蛋白A7（ANXA7）在子宫内膜异位症（内异症）内膜组织中的表达及意义。方法 分别采用实时荧光定量聚合酶链反应、免疫组织化学和蛋白质印迹法检测50例内异症患者（内异症组）的在位内膜、异位内膜及47例非子宫内膜异位症患者（对照组）内膜组织中ANXA7 mRNA及蛋白表达情况，组间进行比较。结果 内异症组患者在位内膜及异位内膜ANXA7 mRNA水平增生期较同期对照组分别增加（2.530±0.119）、（5.060±0.197）倍，分泌期分别增加（3.680±0.134）、（4.250±0.285）倍，与对照组［（1.000±0.009）、（1.000±0.015）倍］比较，差异均有统计学意义（均P〈0.05）；对照组内膜、内异症在位内膜及异位内膜增生期ANXA7蛋白表达分别为0.129±0.012、0.484±0.028、0.479±0.033，分泌期分别为0.166±0.022、0.453±0.036、0.430±0.031，内异症各组高于同期对照组，差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论 ANXA7高表达可能在子宫内膜异位症的发生发展中发挥作用。

赖氨大黄酸对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用及其机制

目的:观察赖氨大黄酸(RHL)对氧化应激引起的小鼠动脉血管损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:采用腹腔注射百草枯方法建立活性氧引起血管损伤小鼠模型。将30只C57小鼠随机分为对照组(n=10)、百草枯模型组(n=10)和RHL干预组(n=10)。RHL干预组小鼠在造模前1周灌胃给予RHL,对照组和百草枯模型组灌胃给予等体积蒸馏水。百草枯模型组和RHL干预组腹腔注射百草枯,对照组腹腔注射等体积生理盐水,每周注射1次,持续2周。造模2周后检测血清丙二醛(MDA)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;DCFH-DA染色观察血管活性氧水平;HE染色观察腹主动脉病理表现;Western blotting法检测血管损伤相关基因的表达。结果:与对照组比较,百草枯模型组小鼠血管组织小鼠血清SOD和GSH-Px活性下降(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05);与百草枯模型组比较,RHL干预组MDA水平下降(P<0.05),SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05);DCFH-DA和HE染色,百草枯模型组小鼠血管组织血管组织活性氧水平升高(P<0.05),血管结构破坏,RHL干预组血管活性氧水平下降(P<0.05),病理变化明显减轻。Western blotting法检测,与对照组比较,百草枯模型组小鼠血管组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和caspase-3表达水平降低(P<0.05),caspase-3裂解片段表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,RHL干预组小鼠血管组织eNOS和caspase-3表达水平升高(P<0.05),caspase-3裂解片段表达水平降低(P<0.05)。结论:百草枯能够诱导体内活性氧水平升高引起血管细胞损伤,RHL通过清除活性氧,上调eNOS表达,下调caspase-3裂解片段表达来拮抗百草枯的作用。