miR-107对宫颈癌细胞系HeLa生物学行为的影响

目的探讨miR-107调控氧连接氮乙酰葡萄糖胺转移酶(O-linked N-acetylglucosamine transferase, OGT)对宫颈癌细胞HeLa增殖、迁移和侵袭的影响。方法 40例宫颈癌患者均行手术治疗,取其手术切除的宫颈癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测2种组织miR-107和OGT mRNA相对表达量。对数生长期宫颈癌细胞HeLa随机分为对照组、模拟剂对照组、模拟剂组、抑制剂对照组、抑制剂组,对照组细胞正常培养,模拟剂对照组、模拟剂组、抑制剂对照组、抑制剂组细胞分别转染mimic-NC、miR-107 mimic、inhibitor-NC、miR-107 inhibitor,转染48 h后,采用MTT法检测细胞存活率,采用划痕实验检测细胞迁移距离,采用Transwell法检测侵袭细胞率,采用Western blot法检测细胞OGT、上皮钙黏蛋白、神经钙黏蛋白相对表达量,采用双荧光素酶报告基因法检测miR-107与OGT的靶向关系。结果宫颈癌组织miR-107相对表达量(3.53±0.17)低于癌旁组织(14.82±0.22)(P<0.05),OGT mRNA相对表达量(7.49±0.25)高于癌旁组织(5.38±0.24)(P<0.05);模拟剂组细胞存活率[(47.53±3.36)%]、划痕愈合百分比[(12.62±2.11)%]低于对照组[(99.93±1.02)%、(26.40±2.16)%]、模拟剂对照组[(99.85±2.11)%、(25.73±2.24)%]、抑制剂组[(99.96±3.24)%、(75.33±3.50)%](P<0.05),侵袭细胞数[(23.40±5.16)个]少于对照组[(82.83±6.47)个]、模拟剂对照组[(79.61±6.28)个]、抑制剂组[(121.44±5.10)个](P<0.05);抑制剂组细胞划痕愈合百分比高于对照组、抑制剂对照组[(26.48±3.02)%](P<0.05),侵袭细胞数多于对照组、抑制剂对照组[(80.93±5.08)个](P<0.05),细胞存活率与抑制剂对照组[(99.93±2.16)%]、对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。模拟剂组细胞OGT、神经钙黏蛋白相对表达量低于对照组、模拟剂对照组、抑制剂组(P<0.05),上皮钙黏蛋白相对表达量高于对照组、模拟剂对照组、抑制剂组(P<0.05);抑制剂组细胞OGT、神经钙黏蛋白相对表达量高于对照组、抑制剂对照组(P<0.05),上皮钙黏蛋白相对表达量低于对照组、抑制剂对照组(P<0.05);以上指标对照组、模拟剂对照组、抑制剂对照组组间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05)。miR-107可靶向OGT。结论宫颈癌组织miR-107呈低表达,miR-107过表达可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭,可能是通过抑制OGT蛋白表达逆转上皮-间质转化发挥调控作用。