长托宁通过下调miR-217表达抑制缺氧/复氧诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的机制研究

目的:探讨长托宁(PHC)对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞H9C2损伤的影响及作用机制。方法:体外建立H/R诱导的H9C2细胞损伤模型。不同浓度(12.5μg/L、25μg/L、50μg/L)的PHC作用于H/R诱导的H9C2细胞后,酶联免疫吸附法检测细胞中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-Px)水平,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白印迹(Western blotting)检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)蛋白表达,实时荧光定量PCR(qPCR)检测细胞中miR-217表达水平。转染miR-217抑制剂至H9C2,下调miR-217表达后,上述相同方法观察下调miR-217表达对H/R诱导的H9C2细胞中MDA含量、SOD和GSH-Px水平、细胞凋亡及Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果:PHC作用H/R诱导的H9C2细胞后,细胞中MDA含量、细胞凋亡率、Bax蛋白表达及miR-217表达均降低(均P<0.05),而SOD和GSH-Px的活性及Bcl-2蛋白表达均升高(均P<0.05)。下调miR-217表达后,H/R诱导的H9C2细胞中MDA含量、细胞凋亡率及Bax蛋白表达均降低(均P<0.05),而SOD和GSH-Px的活性及Bcl-2蛋白表达均升高(均P<0.05)。miR-217过表达逆转了PHC对H/R诱导的H9C2细胞中MDA含量、SOD和GSH-Px活性及凋亡的影响。结论:PHC通过下调miR-217表达抑制H/R诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡,保护细胞损伤。