汉黄芩素调节Notch信号通路对脑缺血/再灌注模型小鼠神经细胞凋亡的影响

目的探讨汉黄芩素(Wogonin,WOG)通过调节Notch信号通路对脑缺血/再灌注模型(Ischemia/reperfusion,I/R)小鼠神经细胞凋亡的影响。方法采用改良线栓堵塞法建立I/R小鼠模型,建模成功后将小鼠随机分为假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、汉黄芩素低、中、高剂量组(WOG-L组、WOG-M组、WOG-H组),汉黄芩素高剂量+Notch信号通路抑制剂组[(WOG+3,5-二氟苯乙酰基)-L-丙氨酰基-L-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)组],每组各15只;采用神经功能缺损评分评价小鼠神经功能损伤,苏木素-伊红(Hematoxylin and eosin,HE)染色法、原位末端标记法(TDT mediated dutp nick end labeling,Tunel)观察小鼠脑组织海马CA1区病理情况及神经细胞凋亡情况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色法计算小鼠脑梗死体积,酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测海马组织中肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin 6,IL-6)水平,Western blot法检测半胱氨酸蛋白酶-3(Cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)及Notch信号通路相关蛋白(受体Notch1、配体蛋白Jagged1、下游转录因子Hes1)表达水平。结果与Sham组比较,I/R组小鼠脑组织细胞损伤严重,神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3,Notch1,Jagged1,Hes1蛋白表达水平显著升高(P>0.05);与I/R组比较,WOG-L组、WOG-M组、WOG-H组小鼠脑组织细胞损伤减轻,神经功能缺损评分、脑梗死体积、神经细胞凋亡率、TNF-α及IL-6,Caspase-3蛋白表达水平显著降低,Notch1,Jagged1,Hes1表达水平显著升高(P<0.05);与WOG-H组比较,WOG+DAPT组DAPT可部分逆转汉黄芩素对I/R组小鼠神经细胞的保护作用(P<0.05)。结论汉黄芩素可以减少脑缺血/再灌注小鼠神经细胞的凋亡,改善神经功能损伤,其作用机制可能与激活Notch信号通路有关。