姜黄素通过Akt-mTOR信号通路调控细胞自噬对骨关节炎大鼠的保护作用研究

目的研究姜黄素对大鼠骨关节炎软骨细胞的保护作用及其与细胞自噬Akt-mTOR信号通路的关系。方法将30只6周龄健康雄性SD大鼠随机分为假手术组、手术组及治疗组。手术组采用Hulth法诱导大鼠骨关节炎模型,治疗组术后即给予口服姜黄素50 mg·kg^(-1)·d^(-1),连续给药8周。通过番红-O染色和Mankin’s评分评估关节软骨结构特征;TUNEL染色分析软骨细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡相关标志物caspase-3以及Bax/Bcl2,自噬相关标志物LC-Ⅰ/Ⅱ和Beclin1以及Akt/mTOR信号通路mTOR、Akt、p-P70s6k等。此外,提取进行改良Hulth法手术后的大鼠膝关节软骨组织细胞原代培养,分别添加姜黄素(40μmol/L)、Akt-mTOR信号通路激活剂尼古丁(2.5μmol/L)、姜黄素+尼古丁组(姜黄素处理前2 h给予尼古丁处理),验证姜黄素是否通过Akt-mTOR信号通路调控细胞自噬对骨关节炎大鼠发挥保护作用。结果与手术组相比,姜黄素治疗组Mankin’s评分显著降低(P<0.05);软骨细胞凋亡受到抑制;凋亡相关标志物caspase-3以及Bax/Bcl2比值显著下降(P<0.05);自噬相关标志物LC-Ⅰ/Ⅱ和Beclin1表达显著升高(P<0.05);mTOR、Akt、p-P70s6k的表达水平显著降低(P<0.05)。在细胞实验中,当给予姜黄素+尼古丁处理后,相比于单纯给予姜黄素,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ水平明显下降(P<0.01)。结论姜黄素通过Akt/mTOR信号通路诱导自噬,在骨关节炎大鼠中发挥了治疗作用。

姜黄素对H_(2)O_(2)诱导软骨细胞自噬的调控

背景:姜黄素对骨关节炎具有良好的治疗作用,但具体机制还不清楚;研究表明自噬的激活可降低骨关节炎的严重程度。目的:探讨姜黄素对H_(2)O_(2)诱导软骨细胞自噬的调控作用。方法:体外培养C57小鼠关节软骨细胞,分为对照组、模型组以及姜黄素不同剂量组(10,20,40,80μmol/L)。模型组给予H_(2)O_(2)(1 mmol/L)处理,模拟骨关节炎体内氧化应激状态;姜黄素组中不同浓度姜黄素与软骨细胞培养48 h后,加入H_(2)O_(2),24 h后收集细胞进行检测。CCK-8法检测各组细胞活力;酶联免疫吸附法检测炎症因子白细胞介素6和肿瘤坏死因子α水平;TUNEL染色检测凋亡状况;流式细胞法检测各组细胞凋亡率;Western-blot法检测凋亡相关蛋白(活化半胱天冬酶3、Bax/Bcl-2)、细胞自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ蛋白)及自噬相关信号通路蛋白(蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)的表达情况;实时荧光定量PCR检测软骨基质降解相关基因(基质金属蛋白酶13、血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5、Ⅱ型胶原蛋白α1、软骨蛋白聚糖)的表达水平。结果与结论:①与模型组相比,姜黄素干预后软骨细胞的活力明显升高(P<0.05);炎症因子表达明显下降(P<0.05),凋亡率明显下降(P<0.05),凋亡相关标志物活化半胱天冬酶3以及Bax/Bcl-2比值显著下降(P<0.05),自噬相关标志物LC3-Ⅱ/Ⅰ和Beclin-1表达水平显著升高(P<0.05),蛋白激酶B、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白的表达水平显著降低(P<0.05);②实时荧光定量PCR显示,基质金属蛋白酶13和血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5 mRNA表达降低,Ⅱ型胶原蛋白α1和软骨蛋白聚糖mRNA表达升高(P<0.05);③提示姜黄素通过促进自噬降低H_(2)O_(2)诱导的软骨细胞凋亡,这种作用可能与蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路有关。

螺旋CT三维重建定位埋伏牙的应用研究

目的探讨螺旋CT三维重建在口腔埋伏牙中的应用研究。方法将口腔正畸科进行检查的110例患者行普通X线片及螺旋CT扫描,比较X线与螺旋CT对埋伏牙的检出率。以确诊的80例患者为研究对象,通过CT三维重建应用表面遮盖法(SSD)以及高分辨率最大密度投影法(MIP)等对确诊患者进行埋伏牙的准确定位,分析患者埋伏牙的牙数、形态、位置及其与周围组织的关系。并应用多平面重建、多方位断层等观察患者牙根吸收情况。结果螺旋CT对埋伏牙的检出率为72.73%,X线片对埋伏牙的检出率为50.91%,差异有统计学意义(P<0.05)。三维重建可以清晰显示埋伏牙的位置、数量、形态及邻近牙根吸收情况。80例患者,单颗埋伏牙患者占总数的87.5%,所占比例最高;牙位以上颌尖牙为主,发生率为31.87%,其次为上颌中切牙,占16.48%;埋伏牙多位于舌腭侧,占79.12%;邻牙中有78颗无牙根吸收,占42.86%,67颗轻微的牙根吸收,占36.81%。结论螺旋CT三维重建对埋伏牙的检出率明显高于X线,应用CT三维重建技术可以显著提高埋伏牙的检出率。埋伏牙以单颗埋伏为主,上颌尖牙患病率最高,埋伏牙主要位于腭侧,临近牙根多无根吸收或轻微根吸收。螺旋CT三维重建对埋伏牙的精确诊断及定位,为临床治疗以及矫治方案的制定提供了准确且科学的参考依据。

中医疗法联合介入治疗输卵管阻塞性不孕症50例临床观察

不孕症是指婚后有正常的性生活且未采取任何避孕措施，同居2年内而未能怀孕者。引起不孕症的原因有很多，近年来随着性传播疾病发病率上升、药物流产及宫腔内操作次数增加等因素，引起本病患病率呈上升趋势。输卵管阻塞是引起不孕症的重要原因，目前临床主要采用输卵管通液术治疗为主。2009-07-2012-10，我们采用中医疗法联合介入治疗输卵管阻塞性不孕症50例，并与采用常规输卵管通液术治疗50例对照观察，结果如下。

强直性脊柱炎骶髂关节低场强磁共振成像与患者血清白细胞介素-18肿瘤坏死因子-α水平的相关性分析

目的探讨强直性脊柱炎(AS)骶髂关节低场强磁共振成像(MRI)与患者血清白细胞介素(IL)-18、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平的相关性。方法收集2012年1月至2015年3月来我院就诊的AS患者150例骶髂关节,同期收集体检健康的志愿者50名,分别给予低场强MRI和血清IL-18、TNF-α水平检测,分析其相关性。结果AS患病组骶髂关节经低场强MRI检查,累及范围计分、水肿强度计分、水肿深度计分和总评分及血清IL-18、TNF-α水平均高于健康组,差异均有统计学意义(P<0.05)。同时采用Logistic回归进行相关性分析,上述评分差异均有统计学意义(P<0.05),且各项指标最大似然估计值和比值比(OR)值均大于0。结论 AS骶髂关节低场强MRI与患者血清IL-18、TNF-α水平呈正相关。