大鼠睾丸发育过程中锌、含锌酶含量与锌转运体(ZnT)表达的变化

目的检测大鼠睾丸不同发育阶段中锌含量和锌转运体(ZnT)的表达,探讨锌稳态在睾丸发育过程中的作用及机制。方法将雄性SD大鼠随机分为4周龄组(n=10)、8周龄组(n=10)、12周龄组(n=10)和32周龄组(n=10),分别饲养至相应周龄。取新鲜大鼠附睾尾部精子检测精子总数、活力,睾丸组织HE染色观察病理学变化,化学发光法测定血清睾酮水平,电感耦合等离子体质谱法测定睾丸组织锌含量,Zinquin探针测定大鼠睾丸锌离子水平,酶联免疫吸附法测定含锌酶(ALP、ADH、LDH)活性,实时荧光定量PCR和Western blot检测睾丸组织中锌转运体ZnT1⁃9 mRNA和蛋白表达。结果8周龄组大鼠+睾丸内开始出现精子,精子总数随大鼠周龄而增加,8、12周龄组大鼠精子活力和睾酮水平显著高于4、32周龄组大鼠(P<0.05),8、12、32周龄组大鼠睾丸游离锌离子水平显著高于4周龄组大鼠,12周和32周龄大鼠睾丸ALP活性明显低于4周和8周组(P<0.05),8、12、32周龄组大鼠睾丸ZnT3 mRNA和蛋白水平显著高于4周组(P<0.05),8、12、32周龄组大鼠睾丸ZnT4 mRNA水平显著高于4周组(P<0.05),12、32周龄组大鼠睾丸ZnT8 mRNA和蛋白水平显著高于4周和8周组(P<0.05)。结论在大鼠睾丸发育过程中,锌+含锌酶和锌转运体(ZnT)发生动态变化,为进一步研究锌稳态对雄性生殖系统发育的影响提供依据。