航天诱变高产酸副干酪乳杆菌A-4-2性质与酶活性研究

以航天诱变副干酪乳杆菌A-4-2为研究对象,采用扫描电镜、低pH值、荧光定量PCR(聚合酶链式反应)等方法对诱变菌株进行了形态学、耐受性、产胞外多糖含量及β-半乳糖苷酶基因表达量等研究。比较了突变菌株和出发菌株的耐酸、耐胆盐、产胞外多糖、表面疏水性等性能变化和差异以及β-半乳糖苷酶基因表达量的变化。结果表明,突变菌株形态学观察结果与野生菌株无明显差异;在pH值3. 5培养1 h与2 h,突变菌株较野生菌株的存活率显著升高(P <0. 05);发酵7 d后菌株耐酸能力评价结果显示,不同pH值条件下,突变菌株的活菌数均显著高于野生菌株(P <0. 05),且耐胆盐及产胞外多糖的能力均未受到影响,但菌株表面疏水性显著降低;突变菌株β-半乳糖苷酶活性和基因表达量,均显著高于出发菌株(P <0. 05)。同时,证明了β-半乳糖苷酶活性与菌株产酸有密不可分的关系。

航天搭载对嗜热链球菌G2的诱变作用及发酵性能评价

对搭载神舟十一号返回式飞船的嗜热链球菌菌株进行分离纯化,得到10株突变株。对野生株G2与突变株生长曲线、滴定酸度、黏度和胞外多糖含量等各指标进行测定,并对菌株进行扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)和透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)测试。结果表明,10株突变菌中有2株B2-1、B2-4的OD_(600)值(2.073±0.15、2.06±0.11)、滴定酸度(106±0.23)°T、(98.5±0.25)°T、黏度(3.27±0.04)Pa·s、(2.94±0.01)Pa·s及胞外多糖含量(409.35±1.38)mg/L、(398.80±5.38)mg/L均高于或者显著高于野生株G2的OD_(600)值(2.051±0.11)、滴定酸度(92±0.16)°T、黏度(2.66±0.07)Pa·s及胞外多糖含量(385.11±3.074)mg/L。最终得到2株具有优良性状的嗜热链球菌(B2-1和B2-4)。因此,航天诱变育种有可能改变嗜热链球菌发酵性能,从而得到具有优良发酵性能的嗜热链球菌菌株,为乳制品开发利用提供理论基础。

空间搭载长双歧杆菌BBMN68耐氧株筛选及其耐酸耐胆盐特性

【目的】通过航空诱变技术筛选耐氧性能良好且耐酸、耐胆盐的长双岐杆菌菌株.【方法】将实验室分离自百岁老人肠道的长双歧杆菌BBMN68搭载于“神舟十一号”飞船,进行航空诱变,将筛选的菌株采用16SrDNA测序,测定600nm处好氧/厌氧的OD值,比较野生株和突变株耐氧能力的差异,并用接种法对野生株和突变株的耐酸和耐盐特性进行了比较.【结果】与野生株耐氧能力(好氧D600nm/厌氧D600nm值为0.70)相比,突变株耐氧能力显著提高(好氧D600nm/厌氧D600nm值为0.87).突变株在pH6.5的MRSC培养基中24h的生长情况与野生株并无差异,且透射电镜显示的结果也无明显差异.同时,经过航天诱变的菌株耐酸能力和耐胆盐能力与野生株比较也没有下降.【结论】航天诱变可以有效提高长双歧杆菌BBMN68耐氧能力,且不会影响其生长性能和耐酸性与耐胆盐能力.

益生菌对大鼠肾功能缺失性肠屏障损伤的修复作用

肾功能缺失对机体的危害之一是肠屏障损伤。本研究对大鼠进行5/6肾切除手术,灌胃益生菌,研究益生菌对大鼠肾病所致肠屏障损伤及相关炎症反应的修复作用。结果表明:灌胃混合益生菌6×1010CFU/d 10周后能够显著改善受损伤肠屏障。血清检测发现,灌注益生菌后脂多糖含量从0.19 EU/mL降到0.10 EU/mL(P<0.05),说明益生菌成功阻止肠道微生物的代谢物透过肠道屏障进入机体;肠上皮隐窝深度和黏膜厚度显著增加(P<0.05),杯状细胞数量显著上升(P<0.05),紧密连接蛋白ZO-1和claudin-1的分泌显著增加(P<0.05),受损的肠道屏障得到修复。灌胃益生菌后,血清中C-反应蛋白和TNF-α等促炎因子的含量显著降低(P<0.05),IL-10和IL-13等抗炎因子的含量显著提高(P<0.05),表明益生菌修复后的肠道屏障调节了促炎因子和抗炎因子的平衡,使机体的系统炎症得到有效控制。

副干酪乳杆菌L9的发酵特性及贮藏稳定性

本试验研究了副干酪乳杆菌L9在褐色乳基料中的发酵性能,同时比较了该菌株在不同酸度饮料中的稳定性。结果表明,L9在褐色乳基料发酵72h后的终点酸度达到180°T,能满足调配褐色活性乳饮料的产品需求。28d贮藏期内L9在乳饮料、桃汁、橙汁、胡萝卜汁中活菌数未发生显著变化,维持在1.5×10~8CFU/mL以上;在苹果汁及矿物质饮料BKL中存活率为1.6%;在葡萄汁及矿物质饮料JJ与MD中存活率低于1%。对各种饮料pH值及酸度分析发现,乳饮料、桃汁、橙汁及胡萝卜汁pH值>3.8,苹果汁、葡萄汁、矿物质饮料(JJ、MD、BKL)的pH值<3.8,pH值是影响菌数变化的主要因素;另外,L9在pH值相同的矿物质饮料BKL中的存活率高于葡萄汁,说明饮料的组成也影响L9的活菌数。

充氮包装和储藏温度对益生菌粉储藏稳定性的影响

考察了充氮包装和储藏温度对益生菌粉储藏稳定性的影响。将充氮和普通包装的动物双歧杆菌A6和长双歧杆菌BBMN68益生菌储藏于-20、4、25和37℃条件下12个月,检测其水分含量、水分活度及活菌数变化。结果表明,温度对益生菌粉稳定性影响较大,在冷冻和冷藏条件下,2种益生菌粉活菌数维持稳定,存活率均在85%以上,当储藏温度上升至常温及更高时,水分活度随着时间延长缓慢上升,而活菌数则下降较快,普通包装的A6和BBMN68益生菌粉在37℃储藏12个月益生菌存活率分别仅剩0.033%和0.013%,充氮包装的存活率分别为0.14%和0.094%,分别提升了4.2和7.2倍。所以益生菌粉最佳储藏条件是冷冻或冷藏,而充氮包装能够降低高温对稳定性的影响,特别是针对耐氧性较差的长双歧杆菌,作用效果更为显著。

益生菌与骆驼乳辅助调节血糖的作用

随着人们生活水平提高和方式的改变,糖尿病在全球的发病率逐年上升。研究表明,骆驼乳和益生菌在糖尿病的预防及治疗中发挥较好的价值。本文论述了骆驼乳和益生菌分别对糖尿病的调节作用,展望了骆驼乳粉与双歧杆菌JT-6结合对糖尿病的协同作用,为开发辅助治疗糖尿病的功能乳制品提供参考。

洗肠液与抗生素联用对大鼠肠道微生物的清除作用

构建大鼠肠道无菌与低菌环境是开展肠道菌群研究的重要手段之一,传统抗生素去除方法存在用时长和肠道损伤的缺点。为达到肠道好氧菌数量级在102以下、厌氧菌未检出的目的,本文通过与传统抗生素方法对比,采用洗肠液与抗生素联用清除肠道微生物。传统抗生素去除方法耗时21d,空肠出现绒毛顶端脱落、炎症反应;洗肠液抗生素联用仅用时21h,肠道结构未出现明显损伤。由此可见,洗肠液抗生素联用具有用时短、无损伤的优点,能够有效清除肠道微生物实现实验需要。

信号分子AI-2对长双歧杆菌BBMN68耐受胁迫能力的影响

双歧杆菌是一种广泛应用的益生菌,但是受到环境胁迫后,菌株活力大幅降低,影响菌株功能发挥,其中信号分子AI-2在益生菌耐受环境胁迫中发挥关键作用。文章研究了外源添加AI-2对双歧杆菌BBMN68耐受酸、胆盐及氧胁迫能力的影响。结果表明,外源添加AI-2可以显著提高BBMN68在p H4.0酸胁迫的存活率(P<0.05),显著降低氧气的抑制作用(P<0.05),对在0.1%浓度胆盐下的生长无显著影响(P>0.05)。该研究表明,可以通过外源干预来提高长双歧杆菌的环境耐受能力。