河北省近年来人间狂犬病发病情况及预防对策

目的通过对河北省近年来人间狂犬病流行情况进行分析,探讨具有针对性的防制策略。方法对河北省2001-2005年人间狂犬病疫情进行描述流行病学分析。结果近年来,河北省狂犬病疫情呈现明显的上升趋势,高发地区集中在沧州、保定和张家口市,占全省发病总数的78.57%;发病以农民为主,男性多于女性;全年均有病例发生,但以春末、夏、秋季为主。结论为有效控制河北省狂犬病流行,要采取多部门联合、对群众广泛开展宣传教育、对基层医务人员进行犬伤后紧急处置及狂犬病疫苗或抗狂犬病毒血清(人免疫球蛋白)应用知识的培训等综合性防制措施。

河北省2005～2006年H1N1亚型流感病毒血凝素HA1基因特征研究

[目的]研究2005～2006年河北省分离的H1N1型流感病毒毒株HA1基因特性。阐明HA1基因的变异与流感流行的关系。[方法]用MDCK分离培养流感病毒,提取病毒核糖核酸(RNA),采用RT-PCR扩增病毒HA1基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAStar软件作分析处理。[结果]2005～2006年在河北省流行的H1N1型流感病毒HA1基因核苷酸和氨基酸序列与同时期的H1N1亚型疫苗株A/NewCaledonia/20/1999相比已发生较大变异,核苷酸同源性为97.0%～98.1%,氨基酸同源性为97.9%～98.7%,有5～7个氨基酸发生了替换,但均不在抗原表位。种系进化结果显示A/河北南市/37/2005与A/河北新市/56/2005和A/河北新市/129/2006位于2个小分支,均距A/NewCaledonia/20/1999较远,A/河北南市/37/2005与A/NewYork/221/2003有较近的亲缘关系。[结论]H1N1型流感病毒HA1基因已发生明显变异,但对抗原性改变意义不大;近几年H1N1持续低流行使人群易感性得以积累是今年H1N1型流感流行的主要原因;2005～2006年河北省同时流行着至少2支种系发生距离较远的H1N1型流感病毒。

2005～2006年河北省流感病毒监测与毒株变异分析

目的分析2005～2006年河北省流感病毒的流行与毒株变异情况。方法将采集的咽拭子标本用MDCK（Madin—Darby Canine Kidney）细胞培养分离流感病毒，血凝抑制试验鉴定病毒型别；在分离得到的3种型别流感病毒中分别以不同时间点选取分离株，进行血凝素重链（HA1）区核苷酸序列测定，并进行基因进化特性分析。结果2005～2006年分离到流感病毒92株，甲1亚型57株，甲3亚型6株，乙型29株。HA1区核苷酸和氨基酸序列分析表明，甲1亚型流感病毒与A／New Caledonia／20／99比较，1株有5个位点（173V〉A、259W〉R、260Y〉F、281 E〉K、322V〉A）发生氨基酸替换，2株有7个位点（90T〉K、102Y〉H、153R〉K、173V〉A、216R〉K、259W〉R、274T〉N）发生替换。3株甲3亚型与A圯alfornia／7／2004比较3个位点（188N〉D、193S〉F、225D〉N）氨基酸发生同样的替换。3株乙型流感病毒与B／HongKong／330／2001比较有7个位点（48K〉E、80K〉R、116R〉H、121N〉T、129K〉N、164E〉D、197S〉N）发生了相同的氨基酸替换。结论2005～2006年河北省流行甲1、甲3亚型和乙型流感病毒。流行株的基因特性发生了一定程度的变异，但乙型毒株变异更明显。

2006年河北省新分离Victoria系B型流感病毒变异株血凝素基因序列分析

目的分析2006年河北省分离的B型流感毒株HA抗原性和基因特性,阐明HA基因的变异与流感流行的关系。方法用MDCK(Madin Darby Canine Kidney)细胞分离培养流感病毒,血凝抑制(Hemasslutination Inhibition,HI)试验鉴定型别。提取病毒核糖核酸(RNA),采用RT-PCR扩增病毒HA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAStar软件作分析处理。结果2006年在河北省流行的B型流感病毒属Victoria系,与北半球该流行期的国际疫苗株B/上海/361/02不同,其抗原性与最近的Victoria系代表株B/Hong Kong/330/2001相比已发生较大变异,核苷酸同源性仅为96.5%～97.2%,在抗原决定簇上有6个位点发生了氨基酸替换。结论2006年在河北省流行的Victoria系B型流感病毒是一个新的变种,在HA1区域发生的变异是今年B型流感流行的主要原因,应该引起重视。

2006年河北省流感爆发中分离Victoria系乙型流感病毒变异株血凝素基因序列分析

目的研究2006年河北省流感爆发中分离的乙型流感毒株HA抗原性和基因特性,阐明HA基因的变异与流感爆发的关系。方法用MDCK细胞分离培养流感病毒,提取病毒核糖核酸,采用RT-PCR扩增病毒HA基因,纯化产物进行核苷酸序列测定,用DNAStar软件作分析处理。结果2006年在河北省流感爆发中分离的乙型流感病毒属Victoria系,与最近的代表株B/HongKong/330/2001相比已发生较大变异,核苷酸同源性仅为96.4%～96.8%,在抗原决定簇上有6～7个位点发生了氨基酸替换,与流感监测中分离的Victoria系乙型流感病毒HA1区改变一致。结论2006年河北省流感爆发与常规监测中分离到的乙型流感病毒HA1抗原性改变一致,是Victoria系乙型流感病毒的一个新变种,在HA1区域发生的变异是乙型流感爆发的主要原因,应引起重视。

2008-2012年河北省肾综合征出血热监测及流行特征研究

目的 通过分析2008 2012年的监测资料,描述河北省肾综合征出血热（HFRS）流行特征和变化趋势,为疾病的防控提供依据.方法 对河北省2008 2012年HFRS病例资料及宿主动物监测资料,采用描述性流行病学方法进行统计分析.结果2008 2012年,河北省共报告HFRS病例1 853例,死亡6例,平均发病率为0.524 2/10万,病死率0.32％;2008 2010年发病维持在低发态势,2011年以后发病逐渐上升,但病死率较低.发病主要集中在东北部的秦皇岛市、唐山市和中部的石家庄市,三市占总报告病例数的77.60％;全年各月均有病例报告,但呈现出“双峰型”分布,3～6月为全年发病最高峰;男女性别比为2.60∶1,发病以青壮年为主,其中40～50岁年龄组病例最多.≥60岁的病例上升明显,大年龄组发病有增加的趋势;职业分布以农民居多;鼠密度变化趋势不明显,波动不大;2008 2010年鼠带毒率呈逐年下降趋势,2011年和2012年鼠带毒率较前3年明显升高;PCR分型结果均为汉城型（Ⅱ型）,序列同以往的测序株比较,同源性较高;鼠带病毒指数与人群发病率呈正相关（r＝0.969,P＝0.006）.结论 河北省HFRS疫情呈上升趋势,尤其对于高发地区需加强监测,并强化疫苗接种意识和落实防鼠灭鼠工作;≥60岁的病例上升明显,应及时关注大年龄组人群.

2005年河北省肾综合征出血热监测分析

目的 分析河北省2005年肾综合征出血热（HFRS）流行特征，对监测数据进行综合分析，为制定防制对策提供科学依据。方法 收集全省HFRS疫情资料，对监测点宿主动物进行监测和人群隐性感染率调查，对阳性鼠肺进行基因分型。结果 2005年河北省共报告HFRS病例1741例，死亡7例，发病率为2．54／10万，病死率为0.40％。病例分布于全省139个县（市、区），主要集中于秦皇岛和唐山市。季节特征呈春峰型，3—6月发病数占全年总发病数的57．96％。以青壮年为主，20～59岁组发病1351例，占发病总数的77．60％；男女之比为2．77：1；农民发病数占69．50％。居民区鼠密度为148％，带病毒率为4．62％；野外鼠密度为0．99％，带病毒率为0．97％。居民区和野外的优势鼠种均为褐家鼠。人群隐性感染率为5．36％。阳性鼠肺进行PCR分型，结果均为家鼠型（Ⅱ型）。结论 河北省HFRS疫区是以家鼠型为主的混合型疫区，应以高发病较集中的8个县（区）为重点，贯彻“灭鼠和免疫并重”的防制策略，科学开展HFRS的综合防制。

河北省肾综合征出血热流行特征及防制策略探讨

目的分析河北省近年来肾综合征出血热(HFRS)流行特征,探讨防制工作中存在的问题,提出进一步防制的建议。方法分析HFRS疫情,对自然疫源地进行宿主动物监测和人群隐性感染率调查,对鼠类携带病原和病人血清进行分型,对上述监测数据进行综合分析。结果河北省近年HFRS呈高流行状态,发病区域逐渐扩展,有明显区域性特征。病原分型为汉城型病毒,病人血清分型以汉城型(SEO)为主,但局部可检测到少数汉滩型(HTN)。分析河北省近年HFRS持续高发的原因,可能与灭鼠和预防接种等措施落实不够有关。结论河北省是以家鼠型为主的混合型疫区,应以高发病区的重点县和流动人口集中区域为重点,贯彻灭鼠和免疫并重的防制策略,科学开展HFRS的综合防制。

河北省2006～2007年度流感监测分析

[目的]分析2006～2007年度河北省流感流行特征与流感病毒亚型分布情况。[方法]收集2006～2007年度河北省流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)监测资料,采集ILI咽拭子标本用MDCK细胞分离病毒,血凝抑制试验鉴定病毒型别。[结果]2006～2007年度河北省流感监测表明:ILI就诊百分比为3.22%,其中儿童为6.59%,成人为0.74%,按月统计ILI就诊高峰出现在2007年1月;采集ILI咽拭子标本727份,分离到流感病毒88株,分离率为12.10%,毒株型别以甲3亚型为主,66株(占75%),甲1亚型次之,21株(占23.86%),乙型最少,仅1株(占1.14%),其中67株是1月分离到的,其高峰值出现时间与ILI就诊高峰期一致。[结论]2006～2007年度河北省流感流行高峰为1月,先后出现甲1、甲3和乙型流感病毒的流行,甲3亚型为优势毒株。

2008年河北省手足口病监测分析

手足口病是全球性传染病,世界大部分地区均有此病流行的报道。1957年加拿大首次报告[1],近年来,亚太地区有不同程度的爆发流行。1997年以来,中国台湾、新加坡、马来西亚、越南、澳大利亚、中国香港等地不断有爆发流行报道,引起世界各国关注和警惕。我国于1981年始见于上海,

河北省2005-2007年度流感流行特征分析

目的了解河北省流感流行特征、流感病毒优势株的变化,为流感防制提供科学依据。方法通过全国流感监测网络,收集2005-2007年度河北省流感或流感样病例(Influenza Like Illness,ILI)资料,对流行病学,病原学以及流感暴发疫情监测结果进行分析。采集ILI咽拭子标本用MDCK(Madin Darby Canine Kidney)细胞分离病毒,血凝抑制(Hemasslutination Inhibition,HI)试验鉴定病毒型别。结果2005-2007年两个流行期河北省ILI就诊百分比分别为4.50%和3.22%,按月统计ILI就诊百分比高峰出现在2005年12月和2007年1月;2005-2006年流行期采集ILI咽拭子标本938份,分离到流感病毒92株,分离率为9.81%。H1N1亚型57株占61.96%,H3N2亚型6株占6.52%,B型29株占31.52%。2005年11-12月为H1N1亚型;2006年1-2月为H1N1、H3N2亚型和B型同时流行,仍以H1N1亚型为主;进入3月后,H1N1亚型和B型同时流行,但B型已明显上升为优势株。2006-2007年流行期采集标本727份,分离到流感病毒88株,分离率为12.10%,H1N1亚型21株占23.86%,H3N2亚型66株占75.00%,B型1株占1.14%,H3N2亚型毒株为优势株。结论2005-2007年流行期河北省流感流行高峰为当年12月或次年1月。先后出现H1N1、H3N2和B型流感病毒的流行,流感病毒优势株发生了交替变换。

河北省2001～2005年肾综合征出血热监测分析

[目的]分析河北省近5年肾综合征出血热(HFRS)的流行特征,为制定有效的防制措施提供科学依据。[方法]收集全省近年HFRS的人群发病情况、疫源地及人群隐性感染情况,并对其流行强度进行分析。[结果]近年来,河北省HFRS发病一直维持在较高水平,2002年以后呈下降趋势,高发地区由中南部向东部地区转移。发病呈现春峰型,发病率高,病死率低,符合家鼠型(Ⅱ型)流行特征。[结论]河北省目前HFRS预防控制的重点应在东部的秦皇岛市和唐山市,防控措施仍应坚持“监测和宣传并举,灭鼠与免疫并重”的原则。

河北省肾综合征出血热高发乡镇疫苗接种效果评价

目的评价肾综合征出血热（HFRS）双价疫苗防病效果。方法选择HFRS高发乡镇为疫苗接种试点，接种对象为16～60岁人群，要求以接种的自然村为单位，疫苗接种率达到70％以上。采用间接免疫荧光法对人群免疫前后IgG抗体水平检测，了解抗体阳转情况。在其他因素不变的情况下，观察疫苗干预前后对HFRS的防病效果。结果（1）接种率：16～60岁人群应接种29088人，2针疫苗实际接种22821人，接种率78．46％，其中滦南县接种人群的接种率最高为90．37％，抚宁县最低为73．39％，滦县、卢龙和青龙县分别为80．29％、74．19％和75．57％。（2）IgG抗体阳性率：免疫前平均为3．33％，免疫后平均为80．63％。同一人群免疫前后抗体配对检测，免疫前平均为2．62％，免疫后平均为80．63％。（3）发病率：接种HFRS疫苗后高发乡镇HFRS发病数为9例，发病率为18．79／10万；干预前发病数为80例，发病率为166．56／10万。结论高发病乡镇疫苗接种覆盖率达70％以上时，防病效果显著，值得在全省其他乡镇推广。

2005-2006年河北省肾综合征出血热宿主动物监测分析

目的通过分析河北省肾综合征出血热(HFRS)宿主动物流行特征,为HFRS的防制提供科学依据。方法鼠密度监测采用常规夹夜法,将鼠肺冷冻切片,采用免疫荧光法检测鼠肺病毒抗原。结果居民区鼠密度平均为1.84%,带病毒率为3.33%,鼠种构成为褐家鼠、小家鼠和大仓鼠,褐家鼠带病毒率最高为3.35%;野外鼠密度平均为1.13%,带病毒率为2.44%,鼠种构成为褐家鼠、小家鼠、黑线姬鼠、大仓鼠、东方田鼠、大林姬鼠和社鼠,黑线姬鼠带病毒率最高为6.67%。不同区域鼠类均有褐家鼠分布,且为优势鼠种;小家鼠和大仓鼠分布于9个市,构成比位居第2位;黑线姬鼠和东方田鼠分布区域较少。结论褐家鼠是河北省HFRS主要的宿主动物和传染源,在HFRS的传播中起重要作用。因此,应对该鼠种有针对性地制定综合防制措施,以控制HFRS的流行。

河北省肾综合征出血热国家级监测点自然疫源地监测研究

目的了解河北省肾综合征出血热（HFRS）国家级监测点疫源地宿主动物的构成、分布及汉坦病毒携带状况。方法在全省4个国家级监测点，分别于春季、秋季开展宿主动物调查，采用夹夜法调查鼠密度，间接免疫荧光法检测汉坦病毒抗原携带情况。结果2005—2007年监测点居民区鼠密度波动在0．50％～3．19％之间，野外鼠密度波动在0．13％-0．94％之间。居民区鼠密度高于野外（χ^2=45．022，P〈0．01）。宿主动物构成以褐家鼠占绝对优势（77．57％），其次为大仓鼠（13．63％）和小家鼠（8．81％）。居民区汉坦病毒抗原阳性6只，鼠带病毒率1．91％，野外汉坦病毒抗原阳性2只，鼠带病毒率1．23％。8只阳性鼠中，褐家鼠7只，大仓鼠1只。结论河北省是以褐家鼠为主要宿主动物的混合型疫源地，应采取以消灭住宅区褐家鼠为主的综合性防制措施。同时应进一步加强北部地区的疫源地监测工作，从而有效地控制河北省HFRS的发生和流行。

河北省肾综合征出血热宿主动物监测分析

目的分析河北省肾综合征出血热(HFRS)宿主动物流行特征,为肾综合征出血热的防制提供科学依据。方法鼠密度监测采用常规夹夜法;将鼠肺冷冻切片,采用免疫荧光法检测鼠肺病毒抗原。结果居民区鼠密度为1.85%,带毒率为3.33%,鼠种构成为褐家鼠、小家鼠、小仓鼠和大仓鼠,褐家鼠带毒率最高为3.35%;野外鼠密度为1.13%,带毒率为2.44%,鼠种构成为褐家鼠、小家鼠、黑线姬鼠、大仓鼠、田鼠、大林姬鼠、小仓鼠和社鼠,黑线姬鼠带毒率最高为6.67%。不同区域鼠类群落结构为褐家鼠均有分布,且为优势鼠种;小家鼠和大仓鼠分布于9个市,构成比位居第2位;小仓鼠、黑线姬鼠和田鼠分布区域较少;社鼠和大林姬鼠仅分布在河北省北部承德山区。结论褐家鼠是河北省肾综合征出血热主要的宿主动物和传染源。应对该鼠种有针对性地制定综合防治措施,以控制肾综合征出血热的流行。

河北省2001～2005年流行性感冒监测

目的分析河北省2001～2005年流感流行特点和流感病毒亚型分布情况。方法在流感流行季节进行流感样病例统计,采集咽拭子标本用MDCK细胞分离病毒,血凝抑制试验鉴定病毒型别。结果4个流行期流感样病例数占门诊总病例数的百分比平均为4.69%,其中儿童为6.38%,成人为0.87%,流感样病例门诊检出率以每个流行期的1月最高;2001～2005年共采集咽拭子标本1662份,分离流感病毒189株,平均分离率为11.37%,其中A(H1N1)亚型2株(1.06%),A(H3N2)亚型156株(82.54%),B型31株(16.40%),A(H3N2)为优势流行型。2001～2002年流行期A(H1N1)、A(H3N2)亚型和B型同时流行,2002年后未见A(H1N1)亚型出现。结论流感样病例门诊检出率高峰出现在每个流行期的1月份,儿童病例比例较高,A(H3N2)是优势流行型。

2004年河北省肾综合征出血热流行特征分析

目的通过对2004年河北省肾综合征出血热(HFRS)流行特征进行分析,为有效控制该病的流行提供科学依据。方法对河北省2004年HFRS人间疫情及宿主动物监测资料进行分析。结果2004年河北省HFRS发病主要集中在东部的秦皇岛市、唐山市;3-6月发病占全年总发病数的63.65%,具有明显的春夏季流行高峰。人群隐性感染率高,病死率低,符合家鼠型疫区流行特征。结论河北省HFRS控制应坚持灭鼠与免疫并重的原则,并对易感人群接种Ⅱ型或双价HFRS疫苗。

河北省部分地区蚊虫种类及蚊传虫媒病毒调查研究

目的了解河北省部分地区蚊虫种类及蚊媒病毒分布,为该地区虫媒传染病防控提供依据。方法在自然界使用诱蚊灯采集蚊虫标本,形态学分类鉴定后分装编号,液氮保存,组织培养法进行病毒分离,用分子生物学方法检测蚊虫携带病毒种类。使用生物学信息软件对病毒核苷酸序列进行分子生物学特征分析。结果2019年9月在河北省平山县、威县、平乡县采集蚊虫3属4种共2638只,其中淡色库蚊为优势蚊种,占捕获总数的69.6%(1835/2638);其次为骚扰阿蚊,占20.5%(541/2638)。从平乡县油召乡的蚊虫标本获得1株可以稳定传代的病毒分离物,经分子生物学鉴定为浓核病毒,基因型属短浓核病毒属成员。结论该次河北省调查地区的优势蚊种各不相同,威县和平乡县以淡色库蚊为主,平山县以骚扰阿蚊为主,并在平乡县油召乡淡色库蚊中分离到一株浓核病毒。

PCR技术分类及其在复杂样本检测中的应用研究进展

聚合酶链式反应(PCR)是分子生物学研究领域极其重要的检测技术,具有较高的精确度与可靠性.根据其检测原理,PCR技术可以分为标准PCR、实时荧光定量PCR、茎环qRT-PCR、5’-核酸外切酶荧光PCR、可变数量的串联重复序列PCR、数字PCR、直接PCR扩增、等温扩增技术等.PCR技术可广泛应用于复杂样本中的DNA/RNA测定,包括血液、粪便、尿液、痰液、水样、土壤、植物、癌症标志物稀有突变基因以及低含量DNA的法医证据等,为复杂环境下生物学样本的检测提供了强大的支持.