PM2.5通过激活巨噬细胞内质网应激进而影响ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块

目的探讨细颗粒物(PM2.5)通过激活巨噬细胞内质网应激促进巨噬细胞细胞质内Ca^(2+)的积累,进而影响ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)斑块的形成。方法体内实验:8周龄ApoE^(-/-)小鼠共计24只,随机分为对照组和PM2.5组,每组12只。采用高脂饲料喂养8周后,对照组小鼠气管内滴注生理盐水,PM2.5组小鼠气管内滴注PM2.5的生理盐水混悬液(30 mg/kg/d)。8周后主动脉根部石蜡切片行movat染色、DHE法检测氧自由基(ROS)水平;采用TUNEL法对斑块内细胞凋亡情况进行检测;Western Blot法检测内质网应激下游炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白的表达量。体外实验:分离培养小鼠原代腹腔巨噬细胞后,将细胞分为对照组(无刺激)、LPS组(模型组,LPS 100ng/mL,24 h)、LPS+PM2.5组(24 h)。采用钙离子荧光探针Fura-2 AM检测巨噬细胞内Ca^(2+)的积累量,Western Blot法检测巨噬细胞内IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白的表达量。结果体内实验PM2.5组小鼠AS斑块面积明显增大,ROS水平显著增高(P<0.001);斑块内坏死凋亡细胞数量明显增多,内质网应激下游炎症因子IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白表达量升高(P<0.001);体外实验LPS+PM2.5组与LPS组比较,细胞内Ca^(2+)积累量明显增多(P<0.001);IL-6、TNF-α、MCP-1蛋白的表达量均升高(P<0.001)。结论经PM2.5处理的高脂饲养的ApoE^(-/-)小鼠,PM2.5可作用于巨噬细胞,激活其内质网应激,导致巨噬细胞细胞质中Ca^(2+)积累增加,使氧自由基的产生与斑块内细胞坏死凋亡数量增加,对动脉粥样硬化斑块的发生发展起到促进作用。

miR-29a对ApoE基因敲除小鼠动脉粥样硬化形成的作用及分子机制

目的探讨miR-29a对载脂蛋白(Apo)E基因敲除小鼠动脉粥样硬化(AS)形成的作用及分子机制。方法将实验动物分为5组,B6组C57BL/6J小鼠3只,正常饮食;AD组载脂蛋白E(ApoE)敲除小鼠3只,正常饮食;AG组ApoE敲除小鼠3只,高脂饮食;AP组ApoE敲除小鼠3只,尾静脉注射pAd-GFP腺病毒,高脂饮食;AM组ApoE敲除小鼠3只,尾静脉注射pAdmiR-29a病毒,高脂饮食。高脂饲喂ApoE基因缺陷小鼠快速形成AS模型,高分辨力超声检查miR-29a对脂质斑块形成的影响,HE染色检查动脉斑块形成情况,免疫组织化学检测miR-29a对斑块血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖及锌指蛋白转录因子5(KLF5)表达的影响。结果 ApoE敲除小鼠经miR-29a转染可见低回声脂质斑块,miR-29a转染可以促进斑块组织内VSMCs的增殖,并上调KLF5的表达。结论 miR-29a促进了ApoE基因缺陷小鼠动脉斑块内VSMCs的增殖,其分子机制可能与上调增殖相关转录因子KLF5的表达有关。

孕妇不同孕期碘营养与新生儿甲状腺功能的关系

目的 研究孕妇在妊娠不同时期碘营养水平、甲状腺功能与新生儿甲状腺功能的关系。方法 采用酸消化砷 铈接触法测定尿碘 ,放射免疫分析法测定血清三碘甲腺原氨酸 (T3 )、甲状腺素(T4)、游离T3 (FT3 )、游离T4(FT4) ,免疫放射分析法测定促甲状腺激素 (TSH) ,用ELISA法测定新生儿脐带血滤纸片TSH。结果 妊娠早、中、晚期孕妇尿碘中位数分别为 2 0 6 .3μg/L、16 1.4 μg/L、2 0 3.3μg/L ,尿碘值 <10 0 μg/L的比率分别为14 .6 %、17.1%、11.1%。孕妇血清T3 、T4水平明显高于婚检妇女 (P <0 .0 0 1) ;妊娠早、晚期妇女血清T3 、T4水平差异不显著 ;孕晚期妇女血清FT3 、FT4分别为 (2 .6 1± 0 .4 7)pmol/L、(5 .5 0± 1.5 7)pmol/L。妊娠晚期与妊娠早期、婚检妇女血清TSH水平比较 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1)。三组人群TSH频数分布比较 ,差异无显著性 (χ2 =1.138,P >0 .5 )。新生儿脐带血TSH中位数为 1.99mU/L ,>5mU/L的比率为 9.4 %。结论 ①在碘盐供应良好的地区 ,对孕妇不需要再补充碘盐以外的其他碘剂 ;②碘营养适宜、甲状腺功能正常的孕妇所生新生儿脐带血TSH >5mU/L的比率 <10 % ;③用非妊娠正常人的FT3 、FT4正常值范围评价孕妇甲状腺功能容易造成错误诊断。

类风湿关节炎患者血清同型半胱氨酸水平的临床研究

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者血清中同型半胱氨酸(Hcy)的水平及其在合并心血管病变(CVD)的RA患者血清中的变化。方法选取于2011年-2014年在河北省人民医院就诊的143例RA患者及143例健康体检者,根据患者是否患有心血管病变分为RA合并CVD组及RA未合并CVD组,用酶循环法法分别检测3组的Hcy水平,同时记录RA患者的病程、DAS28评分、C-反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(ACCP)、血沉(ESR)、血脂等相关指标,分析Hcy与各项指标之间的相关性。结果 RA患者血清Hcy水平明显高于健康体检者,差异具有统计学意义(P<0.05)。RA合并CVD患者血清Hcy水平明显高于RA未合并CVD患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,RA患者血清Hcy水平与其关节肿痛数、ESR、LDL-C呈显著正相关(P<0.05)。结论 RA患者血清Hcy水平较健康体检者有所升高,并与心血管疾病的发展密切相关。