许旺细胞源性外泌体促进损伤周围神经的修复与再生

背景:周围神经损伤是临床上的常见创伤。目前短距离神经损伤可以进行端-端吻合,长距离神经损伤常需要移植物桥接。许旺细胞源性外泌体可以提高神经元存活率、改善再生微环境、促进轴突再生,在周围神经损伤与修复领域具有很好的应用前景。目的:综述许旺细胞源性外泌体在周围神经损伤后再生修复中的研究进展。方法:检索PubMed数据库、万方数据库和中国知网(CNKI)2000-2022年的相关文章。中文检索词:“许旺细胞,雪旺细胞,施万细胞,外泌体,细胞外囊泡,周围神经,外周神经,坐骨神经”;英文检索词:“Schwann cell,exosomes,vesicles,peripheral nerve,sciatic nerve”,对初步检索的文献根据纳入、排除标准进行筛选,共纳入52篇文献进行深度分析。结果与结论:①许旺细胞的增殖和迁移对周围神经损伤后的再生修复发挥重要作用,有多种信号通路介入受损周围神经的再生修复;②外泌体可以通过转移生物活性物质介导细胞间通讯以维持正常的生理过程,在周围神经损伤的修复治疗方面具有很大的潜力;③许旺细胞源性外泌体可以通过参与轴突再生和生长调节,发挥促进损伤神经再生修复的作用,为周围神经损伤的临床治疗提供理论依据。

脱细胞异体神经移植物联合电针对坐骨神经损伤大鼠脊神经节的保护作用及机制

目的探讨脱细胞异体神经移植物(ANA)联合电针对坐骨神经损伤(SNI)大鼠脊神经节的保护作用及机制。方法选取50只雄性SD大鼠,10只制备ANA;40只随机分为正常组、模型组、ANA组和联合组,每组10只。分离右侧坐骨神经,于梨状肌下缘5 mm处去除10 mm制备SNI模型。ANA组将制备好的ANA连接在损伤神经的两断端处。联合组于ANA连接术后2 d采用电子针疗仪电针“环跳穴”和“阳陵泉穴”,15 min/d,7 d为1个疗程,共4个疗程。电生理检测各组大鼠坐骨神经传导速度,评估受损轴突再生情况;尼氏染色观察脊神经节中神经元的形态结构;Western blotting和免疫荧光法检测脊神经节中神经生长因子(NGF)和脑源性神经营养因子(BDNF)的表达。结果与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经传导速度明显降低(P<0.01);神经节神经元中的尼氏体因肿胀、溶解导致结构不完整,数量显著减少(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量明显降低(P<0.01)。与模型组比较,ANA组和联合组大鼠坐骨神经传导速度明显增加(P<0.01);神经节神经元中尼氏体损伤减弱,数量明显增加(P<0.01);NGF和BDNF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。与ANA组比较,联合组大鼠坐骨神经传导速度显著增加(P<0.01);神经节神经元中尼氏体形态较规则,数量明显增加(P<0.01);NGF蛋白表达量显著升高(P<0.01)。结论ANA联合电针可提高大鼠坐骨神经传导速度,改善神经节中神经元的形态结构,发挥对脊神经节神经元的保护作用,其机制可能与提高神经元中NGF和BDNF蛋白的表达,尤其是NGF蛋白的表达相关。

脑源性神经营养因子通过PI3K/Akt信号通路促进大鼠坐骨神经再生修复的研究

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF)促进坐骨神经再生修复的作用及其机制。方法 选取10只SPF级雄性SD大鼠制备脱细胞神经移植物(ANA)。取5只大鼠设为正常(N)组。另取20只大鼠建立坐骨神经损伤模型,然后再随机分为模型(M)组、ANA组、LY294002(LY)组、溶剂对照(LYC)组。M组不再处理,其余3组均桥接ANA于损伤神经的两断端处,LY组和LYC组分别于桥接术后第2日腹腔注射LY294002或DMSO(2.0 ng·mL^(-1)·kg^(-1)),连续注射4周。测定各组大鼠运动神经传导速度(MNCV)和胫前肌湿重比率,尼氏染色观察各组大鼠脊髓前角运动神经元的形态结构,免疫荧光染色和Western blotting法检测脊髓内BDNF和p-Akt1蛋白的表达。结果 与M组比较,ANA组大鼠MNCV和胫前肌湿重比率明显升高(P <0.05);与ANA组比较,LY组MNCV和胫前肌湿重比率显著降低(P <0.05)。尼氏染色结果显示,各组脊髓内均可见蓝紫色呈斑块状的尼氏体,定量分析结果显示ANA组尼氏体数量明显多于M组(P <0.05),LY组尼氏体数量少于ANA组(P <0.05)。免疫荧光染色和Western blotting结果显示,ANA组脊髓内BDNF和p-Akt1蛋白表达量均高于M组(P <0.05);LY组脊髓BDNF和p-Akt1蛋白表达量显著低于ANA组(P <0.05)。结论 BDNF可通过激活PI3K/Akt信号通路发挥促进大鼠神经再生修复的作用。

改良Feeney自由落体法建立大鼠创伤性脑损伤模型

背景:目前关于Feeney自由落体创伤性脑损伤模型,探讨减轻开颅过程中持续磨骨损伤因素的文献较少。目的:通过改变开颅骨窗方式改良创伤性脑损伤大鼠模型。方法:将36只SD大鼠随机平均分成假手术组、模型组和改良模型组。改良模型组造模过程中改良了开骨窗的方式,用小钻头磨骨钻低速2 m/s,在打击的损伤区域边缘打6-8个小孔,每圆孔直径为0.3-0.5 mm,感到空腔而不触及脑实质后立即抽出。改良模型组和假手术组采用改良后的方法开骨窗,模型组按常规开骨窗方法,实施的打击参数相同改良模型组;假手术组不实施打击。造模后第1天对大鼠进行mNSS评分;造模后第1,7天扫描T2WI磁共振成像,测量T2值;造模后第7天,苏木精-伊红染色病理切片观察脑组织形态学,并检测血液黏度和炎症因子白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:①造模后第1天,模型组、改良模型组大鼠mNSS评分均高于假手术组(P<0.0001),改良模型组评分低于模型组(P<0.0001);②造模后第1,7天,模型组、改良模型组T2值均高于假手术组(P<0.05),改良模型组T2值低于模型组(P<0.05);③造模后第7天,模型组和改良模型组的血液黏度值、白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平均高于假手术组(P<0.05),改良模型组白细胞介素6水平低于模型组(P<0.05);④基于Feeney自由落体法的创伤性脑损伤大鼠改良模型较好地控制了创伤性脑损伤大鼠造模中开颅骨的损伤因素。

电针联合低频经颅超声刺激对创伤性脑损伤大鼠脑电信号的影响

背景:创伤性脑损伤是由头部受到撞击、打击而导致大脑正常功能被破坏的疾病,目前需要寻找有效治疗方式和客观指标,帮助医生判别损伤状况及恢复患者脑功能。目的:探究电针联合低频经颅超声刺激对创伤性脑损伤大鼠脑电信号的影响。方法:将40只6周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、低频经颅超声刺激组和联合组(n=8),后4组采用Feeney自由落体法造模,假手术组只开骨窗而不打击。各干预组均于造模后1 d开始实施干预,电针组进行电针干预,低频经颅超声刺激组进行低频经颅超声刺激干预,联合组进行两者联合干预,共干预7 d。造模后8 h,用改良神经功能缺损评分评定大鼠神经功能缺损情况;干预7 d后观察大鼠Y迷宫自发轮流行为百分比,而后采集脑电信号,利用快速傅里叶变换分解出α、β、θ和δ波段,计算各频段振荡幅值、能量占比百分比以及Lempel-Ziv复杂度、样本熵。结果与结论:①造模后8 h,模型组、电针组、低频经颅超声刺激组和联合组的改良神经功能缺损评分显著高于假手术组(P<0.05);②造模后第7天,模型组的α波、δ波频带振荡幅值、δ波能量占比百分比显著高于假手术组(P<0.05),自发轮流行为百分比、α波、β波能量占比百分比、Lempel-Ziv复杂度、样本熵显著低于假手术组(P<0.05);③与模型组比较,联合组的α波、δ波频带振荡幅值显著下降(P<0.05),电针组、低频经颅超声刺激组、联合组的α波、β波频带能量占比百分比显著升高(P<0.05),δ波能量占比百分比显著下降(P<0.05);④与电针组和低频经颅超声刺激组相比,联合组的δ波能量占比百分比显著降低(P<0.05),自发轮流行为百分比、α波、β波能量占比百分比、Lempel-Zi复杂度、样本熵显著升高(P<0.05);⑤结果显示,创伤性脑损伤大鼠出现脑电信号异常,而电针联合低频经颅超声刺激干预后可以改善大鼠脑电信号的异常情况,提示脑电频域特征和非线性特征可用来评估创伤性脑损伤情况。

副神经和迷走神经、颈神经根交通支的形态学观察及临床意义

目的观测副神经与迷走神经、颈神经根交通支的形态特点及副神经在颈静脉孔处的毗邻。方法解剖剥离头颈标本,观测颈静脉孔内的结构毗邻、颈静脉孔下方处副神经与迷走神经间的交通支及副神经脊髓根与颈神经根的交通支。结果在颈静脉孔处,左侧迷走道的面积为(6.99±0.74)mm2,右侧的面积为(5.02±0.37)mm2,差异具有统计学意义(P<0.05);在颈静脉孔下方处,迷走神经和副神经有交通支者29侧(76.3%),交通支有4种分型,左侧交通支的长度为(5.82±1.18)mm,右侧长度为(6.60±1.17)mm,左右侧相比,差异无统计学意义;在22侧标本上观测到副神经脊髓根和C1、C2颈神经后根存在交通支者17侧(77.27%,17/22)。结论副神经和迷走神经在颈静脉孔下方存在交通支,这种解剖结构特点,为临床上避免损伤副神经提供解剖学依据;副神经和颈神经后根存在交通支,说明副神经含有感觉纤维,来源于颈神经后根,其功能可能与维持头部姿势有关。

河北农村经济发展调查报告

为了推动河北农村经济发展,对河北省的唐山、秦皇岛、张家口、保定、石家庄、沧州、邢台等地的广大农村,采用实地走访、座谈、入户发放调查问卷等方法,研究河北农村经济发展状况,探析影响河北省农村经济发展的因素。调查结果表明,土地仍然是河北省广大农村经济中重要的生产资料,也是解决“三农”问题的核心和关键,当今河北省农村经济的主要矛盾为农民最重要的生产资料——土地得不到有效的开发利用。目前的土地经营方式制约了河北农村经济进一步的发展,依循社会主义市场经济规律,对土地经营方式进行创新和改革,是河北农村经济进一步发展的必由之路。

人重组Netrin-1 在脑出血后早期脑损伤的保护作用

研究人重组Netrin-1 在脑出血后早期脑损伤的保护作用。方法 选取120只健康雄性大鼠,随机分为假手术组、脑出血+溶剂组、脑出血+低剂量人重组Netrin-1组、脑出血+中剂量人重组Netrin-1 组、脑出血+高剂量人重组Netrin-1组,每组24只。注射胶原酶3h后注射Netrin-1 ,每组取6只作FJB染色和TUNEL染色,取6只作免疫共沉淀和Western blot ,取6只检测血脑屏障破坏,最后6只评估脑水肿。结果 染色结果显示,脑出血组细胞凋亡明显升高,Netrin-1 干预高剂量组细胞凋亡现象明显改善(P<0.05);中高剂量可改善脑出血后白蛋白外渗(P<0.05);中、高剂量组脑组织含水量较低(P<0.05)。结论 Netrin-1 可明显改善内出血后血脑屏障完整性,对早期脑损伤发挥保护作用。

医学生生理学翻转课堂教学模式探索与实践

生理学为基础医学与临床医学的专业基础课,课程难度大且有效教学时间少,传统的教学模式很难确保课堂效果。翻转课堂教学模式为时下我国高校教学改革探索的新方向,该文基于生理学知识特点,构建适合医学生的生理学翻转课堂教学模式。该模式既能促进学生对生理学相关知识的学习,帮助学生对知识进行内化,还能提高学生们学习的积极主动性与参与度,因而能更加有效地达成医学生生理学课程教学目标。

基于红外热成像技术探索“相对穴”内关穴透灸外关穴温度特征

目的:通过红外热成像技术,对“相对穴”内关穴透灸外关穴前后温度进行测定,总结“相对穴”内关穴透灸外关穴干预后温度特征。方法:选取60例健康志愿者随机分为试验组和对照组,各30例,分别予内关透灸外关30 min和常规艾灸内关30 min,比较干预前后大陵穴、内关穴、间使穴、郄门穴、阳池穴、外关穴、支沟穴与三阳络穴8穴温度及红外热图变化。结果:干预前,两组受试者相同穴位温度比较,差异无统计学意义(P>0.05);对照组和试验组干预前后各穴位温度变化均存在差异性,差异比较有统计学意义(P<0.05);试验组大陵穴、内关穴和外关穴干预前后温度差值相较于对照组大陵穴、内关穴和外关穴干预前后温度差值存在差异性,差异比较有统计学意义(P<0.05);试验组中内关穴与外关穴温度差值较对照组中内关穴与外关穴温度差值具有差异性,差异比较有统计学意义(P<0.05)。结论:“相对穴”内关穴透灸外关穴虽与常规艾灸内关穴一样可以促进艾灸腧穴本经与表里经气血的运行,沟通表里两经,产生循经热效应。但“相对穴”内关穴透灸外关穴相比于普通艾灸方式具有更强渗透作用及传导作用,其平衡表里两经气血的作用更强,能更好地起到阴阳相济的作用。

微波辅助复合酶法提取枸杞多糖及其抗氧化活性研究

采用微波辅助复合酶法提取枸杞多糖。以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化提取工艺,并评价其抗氧化活性。结果表明:最佳提取工艺为纤维素酶∶果胶酶∶蛋白酶质量比3∶1∶2、加酶量7%(以枸杞质量计)、酶解时间2.50 h、微波时间4 min、酶解温度52℃、酶解pH 5.2,在此条件下,枸杞多糖得率为24.37%±1.65%,制得的枸杞多糖对DPPH·和ABTS^(+)·的清除率分别为62.07%、47.82%,表明其具有较好的抗氧化活性。

脂肪干细胞源性外泌体对体外巨噬细胞迁移能力的影响

目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)对巨噬细胞RAW264.7迁移能力的影响,阐明其促进巨噬细胞功能的作用。方法:分离SD大鼠附睾旁脂肪组织,进行脂肪源性干细胞(ADSCs)原代培养,通过成脂和成骨分化诱导,结合油红O和茜素红染色检测ADSCs的多向分化潜能。采用Western blotting法和免疫荧光法检测ADSCs标记物CD29及CD44阳性表达情况,采用外泌体(Exos)分离试剂盒提取ADSC-Exos,透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析仪检测ADSC-Exos的形态大小和粒径分布范围,Western blotting法检测Exos特异性标记物CD9和TSG101蛋白表达情况,示踪法观察巨噬细胞摄取ADSC-Exos情况。将巨噬细胞RAW264.7分为对照组、10 mg·L^(-1)ADSCExos组、20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组。5-乙基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色检测各组巨噬细胞活性,Transwell小室实验检测各组巨噬细胞迁移细胞数,荧光显微镜观察各组巨噬细胞黏附情况。结果:原代ADSCs培养24 h后细胞贴壁生长,呈散在、长梭形;培养7 d,贴壁细胞呈齿梳状、旋涡状有序排列,呈成纤维细胞样外观;培养10代后ADSCs形态不规则,增殖速度减慢。分离提取的ADSCs具有成骨和成脂分化潜能,CD29和CD44蛋白表达阳性。透射电子显微镜下ADSC-Exos呈茶碟状,ADSC-Exos的粒径主峰分布于132 nm附近,ADSC-Exos中CD9和TSG101蛋白表达阳性,即ADSC-Exos提取成功。荧光显微镜下RAW264.7细胞核周围可检测到红色荧光信号,即ADSC-Exos可以被巨噬细胞摄取。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞黏附细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSCExos组巨噬细胞黏附细胞数明显增加(P<0.05)。结论:ADSC-Exos可被巨噬细胞摄取,其通过影响细胞黏附提高巨噬细胞的迁移能力。

基于网络药理学和分子对接技术探究鸭跖草治疗高热惊厥的作用机制

目的:基于网络药理学和分子对接技术探究鸭跖草治疗高热惊厥的作用机制。方法:通过检索中药系统药理学(the Chinese Medicine System Pharmacology,TCMSP)数据库、BATMAN-TCM数据库提取鸭跖草的有效成分并提取相关作用靶点,通过GeneCards和OMIM数据库检索高热惊厥疾病靶点。运用Uniport将蛋白与基因symbol转换,通过Darw venn diagram平台得出venn图及药物成分与疾病的交集基因。通过STRING数据库构建PPI网络。利用Cytoscape3.9.1软件构建“中药-有效成分-靶点”网络及“关键靶点-信号通路”网络,采用在线分析平台DAVID v6.8对关键靶点进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)信号通路富集分析和基因本体(gene ontology,GO)富集分析。利用软件R x644.0.2及绘图包ggplot2绘制KEGG信号通路和GO富集分析图。利用AutoDockTools 1.5.7,Pymol 2.0.1和Openbable3.1.1软件完成分子对接。结果:鸭跖草主要有效成分8种,对应靶点140个,疾病靶点2210个,药物疾病共同靶点64个,GO富集分析得到262条目(P<0.05)、KEGG通路富集分析筛选出67条信号通路(P<0.05),分子对接的结果显示,鸭跖草的活性成分黄酮类化合物主要通过3QXY,1GFW和2K7W等靶点调节多条信号通路发挥抗高热惊厥作用。结论:鸭跖草中的黄酮、β-谷甾醇和丙二酸单酰基人参皂苷Rb2等成分可与高热惊厥疾病靶点稳定结合并且结合能力强于临床上用于治疗高热惊厥的苯巴比妥,鸭跖草可通过多成分、多靶点、多通路治疗高热惊厥,本研究为鸭跖草用于高热惊厥治疗的研究与开发提供了新的思路。

施万细胞样细胞对大鼠背根神经节细胞突起生长和神经生长因子表达的影响及其机制

目的:探讨施万细胞样细胞(SCLCs)对大鼠背根神经节(DRG)细胞突起生长和神经生长因子(NGF)表达的影响,阐明SCLCs促进DRG细胞生长的作用及其机制。方法:分离培养脂肪源性干细胞(ADSCs),茜素红染色检测细胞中钙化结节从而观察其分化能力,将其诱导分化为SCLCs,免疫荧光法检测SCLCs中S100蛋白的表达。分离培养DRG细胞,免疫组织化学染色检测DRG细胞中神经元核抗原(NeuN)蛋白的表达。建立SCLCs与DRG细胞共培养体系,将细胞分为单培养组和共培养组。HE染色观察2组DRG细胞的形态结构,计数2组DRG细胞数和DRG细胞突起数,免疫组织化学染色检测2组DRG细胞中NGF蛋白的表达,Western blotting法检测2组DRG细胞中NGF蛋白表达水平。结果:原代ADSCs培养7 d,倒置显微镜下可见数量较多、体积较大、呈长梭形的细胞类似旋涡状或铺路石样排列。茜素红染色,镜下可见钙化结节,即所培养细胞具有分化能力。免疫荧光染色,大多数细胞均呈S100染色阳性,即ADSCs可成功诱导分化为SCLCs。培养72 h后,DRG细胞突起细而长、呈花环样排列,7~8 d后,细胞数量进一步增加,胞体较大,呈圆形,突起细长,相互连接似栅栏样。免疫组织化学染色,几乎所有细胞核均被标记为棕褐色,呈NeuN染色阳性。与单培养组比较,共培养组DRG细胞数及细胞突起数均明显增加(P<0.05),共培养组DRG细胞中NGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论:共培养条件下SCLCs可增加DRG细胞数和细胞突起数,提高DRG细胞中NGF蛋白的表达,发挥促进DRG细胞生长的作用。

大鼠脊髓损伤致痉挛后五羟色胺1D受体的表达

目的研究大鼠脊髓损伤(SCI)致痉挛后,脊髓损伤段以下五羟色胺1D受体(5-HT1DR)的表达变化。方法Wistar大鼠36只随机分为假手术(Sham)组、脊髓损伤模型(SCI)组各18只。Sham组只打开脊髓骶2(S2)节段对应椎板暴露脊髓,不予脊髓任何损伤;SCI组使用负压吸引器将脊髓S2节段完全离断1~3 mm,制作脊髓S2全横断损伤模型。术后60 d采用鼠尾痉挛评分法,评估大鼠尾部痉挛程度。免疫荧光染色法观察两组脊髓S2节段以下5-HT1DR的表达和分布,Western印迹和实时荧光定量PCR检测两组脊髓S2节段以下5-HT1DR的蛋白和mRNA表达情况。结果术后60 d,SCI组大鼠尾部痉挛评分均达到4~5分。Sham组和SCI组脊髓中5-HT1DR均主要在脊髓灰质的背角(DH)、中间带(IMZ)和腹角(VH)3个区域表达;3个区域中,SCI组脊髓中5-HT1DR光密度值较Sham组均显著降低(P<0.05)。Western印迹和实时荧光定量PCR检测结果显示:与Sham组相比,SCI组脊髓内5-HT1DR的蛋白和mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论术后60 d,SCI组大鼠尾部痉挛充分发展,痉挛症状典型;且脊髓中5-HT1DR表达显著下降,两者变化可能相关。

胱抑素C对缺血再灌注损伤大鼠脑水肿和微血管的影响

目的观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质AQP4、MMP-2和血脑屏障的形态学变化并探讨其影响机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和Cys C低、中、高浓度组。采用改良线拴法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h再灌注24 h后采用干湿重法测定脑组织含水量、检测脑组织EB含量,评价血脑屏障通透性改变程度。在电镜下观察各组大鼠脑皮质微血管的形态结构;Western blot法检测水AQP4表达,免疫组化法进行MMP-2光密度值检测。结果与缺血再灌注组比较,Cys C低、中浓度组血脑屏障损伤程度明显减轻,毛细血管张开数量增多;AQP4蛋白表达降低,MMP-2表达的OD值也显著减少。而Cys C高浓度组血脑屏障损伤严重;AQP4蛋白表达明显升高,MMP-2蛋白表达OD值也明显增大。结论Cys C在一定浓度下干预能减轻缺血再灌注对血脑屏障的损伤,其机制可能与AQP4蛋白表达降低及MMP-2表达OD值减少有一定的关系。

BMSC外泌体调控STAT3/GAP43通路促进脊髓后索损伤大鼠感觉传导功能恢复

目的探索骨髓间充质干细胞外泌体修复脊髓后索损伤大鼠感觉的功能。方法抽提大鼠骨髓间充质干细胞外泌体。将大鼠分为假手术组、PBS对照组、外泌体组,构建后索损伤模型。外泌体组经尾静脉注射外泌体,PBS对照组注射等量PBS。胶带移除实验和体感诱发电位评估感觉传导功能。免疫荧光染色观察脊髓后索形态。Western Blot检测STAT3蛋白和GAP43蛋白。结果免疫荧光染色显示所提取骨髓间充质干细胞可表达CD29和CD90。Western Blot显示抽提外泌体高表达HSP70与Alix。与PBS对照组相比,外泌体组NF-200染色阳性神经元累积光密度大,体感诱发电位波形与胶带移除实验潜伏期改善,STAT3与GAP43蛋白表达升高(P<0.05)。结论骨髓间充质干细胞外泌体可通过STAT3/GAP43通路修复后索损伤大鼠感觉功能。

补阳还五汤加水蛭对脑梗死大鼠学习记忆能力和神经元自噬的影响

目的探讨补阳还五汤加入水蛭对脑梗死大鼠学习记忆及自噬相关蛋白Beclin 1和LC3-Ⅱ表达的影响。方法采用颈动脉注射微栓子的方法制备大鼠脑梗死模型,筛选模型后随机分为模型组、补阳还五汤加水蛭低、中、高剂量组、补阳还五汤原方组,另设假手术组。分组后连续14天各组灌胃给予相应药物治疗。巴恩斯迷宫观察进入目标洞的潜伏期和探究非目标洞的错误次数,苏木素-伊红(HE)染色观察脑梗死边缘区组织形态及细胞结构变化;免疫组化定性检测Beclin 1、LC3-Ⅱ蛋白表达,免疫蛋白印迹法(Western blot)半定量检测Beclin 1、LC3-Ⅱ的表达。结果巴恩斯结果显示,与假手术组比较,模型组到达目标洞的潜伏期明显延长,进入错误洞的次数增加;与经过模型手术的实验鼠相比,补阳还五汤加水蛭低、中、高、补阳还五汤原方组治疗的大鼠成功进入目标洞的潜伏期显著缩短;进入错误洞的次数分别减少。HE染色显示,梗死边缘区脑组织损伤明显,海马区神经元密度显著减少,残存神经元出现核固缩、噬伊红现象。免疫组化显示,经过模型手术的脑梗死致模大鼠海马神经细胞中Beclin 1、LC3-Ⅱ与假手术组相比,棕黄色颗粒呈现高表达状态,补阳还五汤加水蛭低、中、补阳还五汤原方组药物治疗组Beclin 1棕黄色颗粒呈现阳性表达显著降低,补阳还五汤加水蛭低、中、高、补阳还五汤组LC3-Ⅱ棕黄色颗粒呈现阳性表达比模型组明显减弱。免疫蛋白印迹结果呈现,与假手术组比经造模手术大鼠脑组织中Beclin 1和LC3-Ⅱ蛋白含量显著升高。与模型组相比,补阳还五汤加水蛭各治疗组及原方药物治疗组Beclin 1含量显著下降,LC3-Ⅱ的含有量明显下降。结论补阳还五汤加水蛭可通过下调脑梗死大鼠脑组织内LC3-Ⅱ和Beclin 1蛋白表达,抑制脑组织受损后激活的自噬过度,降低脑梗死体积,改善大鼠因脑梗而带来的学习记忆等障碍,逐瘀的治疗作用也优于补阳还五汤原方,对脑神经功能有维持及保护作用。

不同代际居住模式老年人社交活跃度现状及影响因素——基于Charls数据的随机森林分析

目的探讨不同代际居住模式老年人社交活跃度的现状及影响因素,为科学提升老年人社交活跃度提供依据。方法对2018年的中国健康与养老追踪调查数据建立随机森林预测模型,甄别共居和独居老人社交活跃度的影响因素,并预测各影响因素的重要性。结果所有老人的高社交活跃度比例为26.88%;独居老人的高社交活跃度(18.8%)所占比重高于共居老人(8.1%)。年龄、身体功能障碍、养老金等变量对共居和独居老人的社交活跃度均具有预测作用,疼痛困扰和生命期望仅对独居老人的社交活跃度有预测作用,其预测模型效果良好(共居:AUC=0.86;独居:AUC=0.82)。结论老年人高社交活跃度比例较低。随机森林的预测模型结果验证了老年人社交活动的影响交互理论框架的适用性。

不同制备工艺对薯蓣皂苷元固体分散体体外溶出、物相特征、体内药动学的影响

目的 考察不同制备工艺对薯蓣皂苷元固体分散体体外溶出、物相特征、体内药动学的影响。方法 以Soluplus为载体,分别采用共沉淀法、微波淬冷法、冷冻干燥法制备固体分散体,测定溶解度、溶出度,采用差示扫描量热分析、粉末X射线衍射、扫描电镜、傅里叶红外光谱研究物相特征,拟合水接触角曲线。30只大鼠随机分为5组,分别灌胃给予原料药、物理混合物、3种制备工艺所得固体分散体的0.5%CMC-Na混悬液(100 mg/kg),于0、0.083、0.25、0.5、0.75、1、2、3、4、6、8、12、24、36、48、72 h采血,UPLC-MS/MS法测定薯蓣皂苷元血药浓度,计算主要药动学参数。结果 固体分散体溶解度、120 min内累积溶出度高于原料药,以共沉淀法所得更明显。薯蓣皂苷元以无定形态存在于共沉淀法、微波淬冷法所得固体分散体中,以晶体存在于冷冻干燥法所得固体分散体中。薯蓣皂苷元与Soluplus之间存在相互作用。固体分散体水接触角小于原料药、物理混合物,共沉淀法所得固体分散体的水接触角最小,润湿性最强。共沉淀法、微波淬冷法所得固体分散体的溶解机制为载体控制,冷冻干燥法所得固体分散体的溶解机制为药物控制。与原料药比较,共沉淀法、微波淬冷法所得固体分散体AUC_(0~t)、AUC_(0~∞)、C_(max)升高(P<0.05,P<0.01),CL_(z/F)降低(P<0.01),相对生物利用度分别为576.69%、447.80%。结论 共沉淀法更适合制备薯蓣皂苷元固体分散体。