基于学生评价的公共卫生人才质量监控与提升

基于学生评价视角,对不同前置专业和不同培养阶段MPH的质量进行监控并提出改进建议。从专业学习情况、导师情况、奖学金制度、学院管理与服务和就读研究生生活情况5个方面进行问卷调查;评价结果进行标准化处理得到项目评分并进行比较。不同前置专业MPH的专业学习情况满意度方面存在差异,具有医学背景的MPH的满意度较高。两个培养阶段中与奖学金和生活情况相关的项目评分较低。针对调查结果,在课程学习、导师指导、奖学金制度等方面提出针对性建议。将学生评价应用于MPH人才质量培养监控易操作、可行性强,具有可推广性。

5′-N-乙基酰胺基腺苷对心肌线粒体自噬和呼吸功能的影响

目的:探讨选择性腺苷A2受体激动剂5′-N-乙基酰胺基腺苷(5′-N-ethylcarboxamido adenosine,NECA)对心肌线粒体自噬和呼吸功能的影响及可能机制。方法:培养大鼠心肌H9c2细胞,给予不同浓度NECA(10、100、1000 nmol/L)处理2 h,对照组给予等体积PBS处理2 h。CCK-8法检测细胞活性;蛋白质印迹实验检测线粒体自噬及相关因子的表达水平;运用线粒体膜电位探针四甲基罗丹明乙酯(TMRE)检测线粒体膜电位;运用线粒体红色荧光探针Mitotracker Red和溶酶体绿色荧光探针Lysotracker Green同时标记细胞,并用激光共聚焦扫描显微镜记录线粒体和溶酶体的共定位情况;应用Oxygraph-2k高分辨率呼吸仪检测细胞线粒体呼吸功能。结果:与对照组相比,不同浓度NECA组细胞活力和线粒体膜电位均无显著变化。蛋白质印迹实验结果显示,与对照组相比,10 nmol/L和100 nmol/L NECA处理组线粒体的线粒体外膜转位酶20(TOM20)和内膜蛋白细胞色素C氧化酶Ⅳ亚型(COXⅣ)增高,1000 nmol/L处理后,TOM20和COXⅣ较对照组无明显差异;而NECA对线粒体内膜转位酶23(TIM23)表达水平无显著影响。与对照组相比,加入10 nmol/L NECA处理后线粒体自噬相关因子FUN14结构域包含蛋白1(FUNDC1)表达明显增加,100、1000 nmol/L NECA处理对FUNDC1表达无显著影响;而NECA对同源性磷酸酶张力蛋白诱导激酶1(PINK1)和帕金森蛋白(Parkin)表达水平无明显影响。共聚焦显微镜可见,与对照组相比,NECA处理组的溶酶体与线粒体共定位降低。Oxygraph-2k高分辨率呼吸仪检测结果显示,NECA处理组心肌H9c2细胞线粒体呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ的活性与对照组相比无明显变化。结论:NECA抑制心肌H9c2细胞线粒体自噬但对线粒体呼吸功能无影响。

结核分枝杆菌利福平和异烟肼耐药突变的快速分子诊断方法构建

目的 采用快速分子诊断方法中TaqMan荧光定量PCR技术,应用于利福平和异烟肼一线抗结核药物耐药基因的诊断中,评价其性能,建立高灵敏度、高特异度、高准确性并且快速的筛查方法,为结核分枝杆菌耐药性的诊断和治疗提供依据并探讨其应用价值,努力改善耐药结核病的检测和可行性。方法 本研究针对利福平ropB基因531位点突变和异烟肼katG基因315位点突变的特点,设计TaqMan-MGB引物和探针,通过反应条件优化,建立TaqMan荧光定量PCR方法;用克隆到pUC57载体上的阳性标准品及不同菌株评价该方法的特异性、灵敏度、重复性和精密度,采用甘油三酯、胆红素和血红素进行了干扰性实验。结果 TaqMan荧光定量PCR方法的检测限可达10copies/μl;在交叉干扰实验中,检测了5种常见呼吸道感染细菌国家标准菌株,均未检出,基因野生型和突变型探针特异性较好,不受其它基因干扰;批内、批间的CT值变异系数均小于5%,标准曲线R2=0.998,扩增效率均在90%以上;该反应迅速,检测时间为1h。结论 本研究建立的TaqMan荧光定量PCR方法有助于及时发现结核分枝杆菌耐药情况,对结核病的耐药检测与后续治疗具有重要意义。

干扰circCPSF1表达对抗结核药物诱导肝损伤影响的机制研究

目的 本研究从人群和细胞两方面探究circCPSF1与抗结核药物性肝损伤(ADLI)发生的相关性,并探讨circCPSF1通过海绵作用结合miR-21影响ADLI发生的作用机制。方法收集2022年9月1日—2023年9月1日于石家庄市第五医院经肺结核治疗发生肝损伤的人群作为ADLI组,按性别和年龄1:1匹配未发生肝损伤的肺结核患者作为non-ADLI组,各128例。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测circCPSF1相对表达量并分析其与肝损伤的相关性。利用异烟肼(INH)、利福平(RFP)、吡嗪酰胺(PZA)三药联合构建肝损伤细胞模型并进行过表达或敲减处理。HE染色法观察各组细胞形态学变化;RT-qPCR检验circCPSF1、miR-21的表达情况;蛋白印迹实验(western blot)检测NF-κB蛋白水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝功能指标谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)表达含量;采用荧光色素酶报告基因实验验证circCPSF1与miR-21结合。结果相较于nonADLI组,ADLI组人群血清中circCPSF1相对表达量明显减少(P<0.05),与肝功能指标呈负相关(P <0.05)。ADLI细胞模型中,circCPSF1表达下调,miR-21表达上调(P<0.05)。过表达circCPSF1、敲低miR-21均可抑制NF-κB、TNF-α、IL-6的表达水平(P<0.05)。荧光素酶报告基因实验结果显示circCPSF1与miR-21结合。结论 在人群和细胞层面,circCPSF1在ADLI中显示出了较大的表达差异并且可发挥经典的海绵作用调控miR-21从而介导炎症因子的表达,影响抗结核药物性肝损伤。