mTOR信号通路与恶性肿瘤的研究进展

哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）是近年来发现的一种进化上保守的蛋白激酶,被认为是细胞生长的中心调控因子.mTOR信号通路在细胞生存、生长与增殖中起着关键调控作用,该信号通路的异常与多种恶性肿瘤有关,已逐渐成为肿瘤治疗的新靶点[1].本文就mTOR的分子结构、相关信号途径及其与恶性肿瘤的关系等做一综述.

国产雷帕霉素对人淋巴瘤细胞Raji增殖的影响

目的探讨国产雷帕霉素(宜欣可)对人淋巴瘤细胞株Raji细胞体外生长及对mTOR/p 70S6K信号通路的影响。方法 MTT法检测不同浓度(0、1、5、10、20、40、50、100 nmol/L)国产雷帕霉素作用不同时间(24、48、72 h)对Raji细胞增殖的影响。光学显微镜观察Raji细胞形态学变化。流式细胞仪测定国产雷帕霉素对Raji细胞周期分布和凋亡的影响。Western blot方法检测国产雷帕霉素处理前后对Raji细胞mTOR、p70S6K、p-p70S6K蛋白的影响。结果国产雷帕霉素对Raji细胞增殖有明显的抑制作用(不同浓度P<0.01或P<0.05),呈现明显的剂量-效应和时间-效应依赖关系。国产雷帕霉素明显抑制Raji细胞周期发展(P<0.05),但没有发生明显的凋亡(P>0.05)。0、10、50、100 nmol/L国产雷帕霉作用于Raji细胞的mTOR、p-p70S6K,其蛋白量随药物浓度增大而降低(P<0.05),p70S6K随药物浓度增大而升高(P<0.05)。结论人淋巴瘤细胞株Raji中存在mTOR/p70S6K信号通路激活状态,宜欣可可抑制该通路激活并通过阻滞细胞周期发展抑制Raji细胞增殖。

雷帕霉素对人淋巴瘤细胞株Raji细胞增殖抑制与自噬的机制研究

目的探讨雷帕霉素(宜欣可)对人淋巴瘤细胞株Raji细胞体外生长影响及诱导自噬的发生,并探讨可能的分子机制。方法 MTT法检测不同浓度(0、1、5、10、20、40、50及100 nmol/L)雷帕霉素作用不同时间(24、48及72 h)对R aji细胞增殖的影响。流式细胞仪测定雷帕霉素对R aji细胞周期分布和凋亡的影响。透射电镜观察Raji细胞形态学变化。Western blot方法检测雷帕霉素处理前后对Raji细胞自噬蛋白Beclin1的影响。结果雷帕霉素对Raji细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01或P<0.05)。呈现明显的剂量-效应和时间-效应依赖关系。雷帕霉素明显抑制R aji细胞周期发展(P<0.05),但没有发生明显的凋亡(P>0.05)。透射电镜观察到经100 nmol/L雷帕霉处理72 h后的Raji细胞胞质内有大量自噬体和自噬溶酶体。Western blot方法检测到0、1、10及100 nmol/L雷帕霉处理72 h后Beclin1蛋白表达逐渐上升,且呈浓度依赖性。结论雷帕霉素通过阻滞细胞周期发展抑制Raji细胞增殖,诱导Raji细胞发生自噬但不能诱导其凋亡。

雷帕霉素对人淋巴瘤Raji细胞株增殖影响及其机制的探讨

目的:探讨雷帕霉素(宜欣可)对人淋巴瘤细胞株Raji细胞体外增殖及细胞周期的影响,并分析其分子作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度(0、1、5、10、20、40、50和100nmol/L)雷帕霉素作用不同时间(24、48和72h)对Raji细胞增殖的影响。用流式细胞仪测定雷帕霉素对Raji细胞周期分布和凋亡的影响。应用蛋白质印迹法检测雷帕霉素对Raji细胞周期蛋白Cyclin D1、Cyclin E、Cyclin A和p27及凋亡蛋白抑制因子Survivin蛋白表达的影响。结果:雷帕霉素浓度>5nmol/L对Raji细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.05)。且呈现明显的剂量-效应和时间-效应依赖关系。雷帕霉素处理后,可明显抑制Raji细胞周期发展(P<0.05),随着药物浓度的加大、作用时间的延长,处于G0/G1期细胞逐渐增多,S期和G2/M期细胞则逐渐减少。但Raji细胞没有发生明显的凋亡现象(P>0.05)。50nmol/L雷帕霉素处理后,Raji细胞的Cyclin D1、Cyclin E、p27表达水平没有明显变化(P>0.05),但Cyclin A和Survivin表达水平被明显抑制(P<0.05)。结论:雷帕霉素通过阻滞细胞周期发展抑制Ra-ji细胞增殖,其作用机制可能与下调细胞CyclinA和Survivin表达有关。