加速康复外科在结核性脓胸电视胸腔镜手术围术期的应用

目的探究加速康复外科(ERAS)理念在结核性脓胸电视胸腔镜手术围术期的应用价值。方法选取我院收治的116例结核性脓胸患者进行回顾性研究,依据围术期干预方式不同分为对照组(58例,行常规围术期干预)和观察组(58例,行基于ERAS的围术期干预)。比较2组患者围术期相关指标、术后数字疼痛评分法(NPRS)评分、术后并发症发生情况、术后恢复情况及手术前后白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)、用力肺活量(FVC)、每分钟最大通气量(MVV)及第一秒用力呼气容积(FEV_(1))。结果2组患者围术期相关指标比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组术后24 h、48 h的NPRS评分均低于对照组(P<0.05)。2组患者术前、术后72 h血清IL-6、CRP水平比较差异无统计学意义(P>0.05),观察组术后24 h血清IL-6、CRP水平均低于对照组(P<0.05)。观察组术后并发症发生率低于对照组(P<0.05)。观察组术后下床活动时间、肠鸣音恢复时间、拔管时间及住院时间均短于对照组(P<0.05)。2组患者术前、术后3个月FEV_(1)、FVC、MVV比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论基于ERAS理念的电视胸腔镜手术治疗结核性脓胸,可明显减轻患者应激反应及术后疼痛程度,降低术后并发症发生率,促进患者康复。

单孔胸腔镜下肺叶切除术治疗肺功能中重度减低的周围型肺癌的效果

目的探讨单孔胸腔镜下肺叶切除术治疗肺功能中重度减低的周围型肺癌患者的效果。方法选取我院肺功能中重度减低的周围型肺癌患者86例,按照随机数字表法分为单孔组和三孔组,每组43例。单孔组患者采用单孔胸腔镜下肺叶切除治疗,三孔组采用常规三孔胸腔镜下肺叶切除术治疗。观察2组围术期指标,比较2组术前及术后3 d、7 d第1秒用力呼气容积占预计值的百分比(FEV1%pred)、用力肺活量占预计值的百分比(FVC%pred)、最大分钟通气量占预计值的百分比(MVV%pred)等肺功能指标,降钙素原(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)等炎症因子,T淋巴细胞亚群CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)及并发症发生情况。结果与三孔组比较,单孔组术后下床活动及术后住院时间缩短,手术时间延长,术中出血量及术后3 d VAS评分降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。2组术后3 d及7 d的FEV1%pred、FVC%pred、MVV%pred均较术前降低(P<0.05),术后7 d单孔组FEV1%pred、FVC%pred、MVV%pred高于三孔组(P<0.05)。术后3 d,2组炎症因子均较术前升高(P<0.05),且单孔组低于三孔组(P<0.05);术后7 d,2组血清PCT、TNF-α、CRP水平出现回落,且单孔组低于三孔组(P<0.05)。术后3 d,2组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均较术前降低(P<0.05),且单孔组高于三孔组(P<0.05);术后7 d,2组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均有回升,且单孔组高于三孔组(P<0.05)。2组患者并发症发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论单孔胸腔镜下肺叶切除术治疗肺功能中重度减低的周围型肺癌安全、有效,能获得与常规三孔胸腔镜手术相近的疗效,其在机体炎症、免疫功能及术后早期恢复方面更具优势,且因其手术创伤小,切口小,患者更易接受。

CDC20在肺腺癌组织中的表达及对肺腺癌细胞增殖和侵袭的影响研究

背景与目的:肺腺癌具有早期发现难、肿瘤进展快及晚期手术切除率低等特点。尽管单药免疫治疗和免疫治疗联合化疗的相关研究在改善预后、克服耐药方面已初显成效,但是大部分肺腺癌患者从中获益仍有限。因此,迫切需要寻找具有相对较高灵敏度和特异度的新型生物标志物,以改善肺腺癌患者的预后。细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle protein 20,CDC20)参与多种肿瘤的发生、发展,但在肺腺癌中的生物学作用及机制尚未明确。本研究旨在探究CDC20在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌患者预后的预测价值,并分析CDC20对肺腺癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)检测CDC20在肺腺癌中的表达情况并结合生物信息学和临床病理学参数分析其与预后不良的相关性。采用Kaplan-Meier生存曲线描述CDC20对肺腺癌患者术后生存率的影响,采用COX多因素回归分析影响肺腺癌患者术后生存率的独立预后因素。通过受试者工作特征曲线分析CDC20表达在肺腺癌患者中的诊断价值。采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测人正常肺上皮细胞系BEAS-2B、人肺腺癌细胞系A549和H1299中CDC20的表达水平。细胞实验中,通过敲低肺腺癌细胞中的CDC20,分为si-NC(对照组)、si-CDC20#1(敲低组1)和si-CDC20#2(敲低组2)3个组。采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)、克隆形成、transwell和划痕实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力。通过基因本体论(Gene Ontology,GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析CDC20在肺腺癌中的生物学作用。通过基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)CDC20在肺腺癌中可能的调控通路。本研究经河北省胸科医院伦理委员会批准(编号:2022051)。结果:生物信息学及IHC结果均显示,CDC20在肺腺癌组织中显著高表达(P<0.05)。生物信息学与临床参数分析结果均显示,CDC20高表达与患者预后不良相关。Kaplan-Meier生存分析和COX回归分析均显示,CDC20表达情况与患者术后生存率呈显著负相关(P<0.05)。敲低CDC20能抑制肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭(P<0.05)。GO功能、KEGG通路和GSEA结果均显示,CDC20与细胞周期相关。结论:CDC20在肺腺癌中高表达,CDC20高表达是肺腺癌患者不良预后的独立危险因素。CDC20能促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭。

肌钙蛋白相关蛋白对肺腺癌细胞增殖与迁移的影响及与患者预后的关系

目的探讨肌钙蛋白相关蛋白(TROAP)对肺腺癌细胞生物学功能和免疫细胞浸润的影响及与患者预后的关系。方法选取2014-01-01-2016-06-30在河北省胸科医院接受手术治疗并经病理确诊的68例肺腺癌患者癌及癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5 cm)标本为研究对象。通过癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因表达综合数据库(GEO)分析TROAP mRNA在肺腺癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、蛋白质印迹法和免疫组织化学方法检测TROAP在肺腺癌组织和细胞株中的表达;构建TROAP干扰序列并将其转染入A549细胞中,将其分为空白对照组(Blank组)、阴性对照组(si-NC)、转染靶向TROAP的siRNA组(si-TROAP-1组和si-TROAP-2组);细胞计数盒8(CCK8)、克隆形成、Transwell和划痕实验检测细胞增殖、迁移和侵袭能力;通过GO功能和KEGG通路富集分析TROAP在肺腺癌中的生物学功能;采用单样本基因集富集分析(ssGSEA)探索TROAP表达水平与肿瘤免疫浸润的关系。结果TROAP在TCGA、GSE19804和GSE43458数据集中肺腺癌的表达水平均高于肺正常组织,t值分别为12.260、5.547和6.848,均P<0.001。TROAP表达与TNM分期(χ^(2)=11.708,P<0.001)、肿瘤大小(χ^(2)=5.968,P=0.015)和淋巴结转移(χ^(2)=18.634,P<0.001)有关联,差异均有统计学意义。肺腺癌患者预后显示,TROAP表达与患者总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)均有关联,χ^(2)值分别为13.310和10.040,P值分别为<0.001和0.002,且TROAP高表达(HR=4.724,95%CI:1.307~17.071,P=0.018)和肿瘤远处转移(HR=4.906,95%CI:1.234~19.508,P=0.024)可作为肺腺癌的独立预后因子。CCK8增殖实验结果显示,72 h时si-NC组、si-TROAP-1组和si-TROAP-2组细胞生长率分别为0.897±0.060、0.653±0.021和0.513±0.045,差异有统计学意义,F=55.510,P<0.001。克隆形成实验结果显示,si-NC组、si-TROAP-1组和si-TROAP-2组细胞克隆形成数量分别为59.330±4.040、17.330±2.517和21.000±5.292,差异有统计学意义,F=96.130,P<0.001。细胞凋亡结果显示,si-NC组、si-TROAP-1组和si-TROAP-2组细胞凋亡率分别为(12.390±1.072)%、(37.850±6.914)%和(33.520±2.275)%,差异有统计学意义,F=30.860,P<0.001。细胞划痕实验结果显示,24 h时si-NC组、si-TROAP-1组和si-TROAP-2组细胞愈合度分别为(61.790±1.524)%、(23.320±0.386)%和(23.520±1.781)%,差异有统计学意义,F=782.500,P<0.001。Transwell侵袭实验结果显示,si-NC组、si-TROAP-1组和si-TROAP-2组穿过小室的细胞数量分别为为(100.000±4.847)、(43.850±3.026)和(39.540±6.482)个,差异有统计学意义,F=137.200,P<0.001。TROAP可能参与细胞周期和DNA复制通路等过程,错误发现率<0.05,P<0.05。结论TROAP在肺腺癌中高表达与患者的不良预后相关;沉默TROAP可抑制肺腺癌细胞A549增殖、侵袭和迁移;TROAP表达可能与肿瘤免疫浸润细胞相关,表明TROAP可能是肺腺癌患者预后标志物。

DDIT4对A549细胞增殖迁移的影响及其机制

目的探讨DNA损伤诱导转录因子4(DDIT4)在肺腺癌细胞中的表达及其对细胞增殖、凋亡的影响和可能机制。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹检测DDIT4在肺腺癌细胞系(H1299和A549)及正常肺支气管上皮细胞(BEAS-2B)中表达;慢病毒转染抑制A549细胞中DDIT4表达,分为DDIT4敲低慢病毒(sh-DDIT4,分为sh-DDIT4#1、sh-DDIT4#2和sh-DDIT4#3)组和转染空病毒(NC)组。蛋白质印迹检测细胞中DDIT4沉默效果;CCK-8、平板克隆形成实验检测sh-DDIT4对肺腺癌细胞增殖能力的影响;TUNEL凋亡实验检测sh-DDIT4对肺腺癌细胞凋亡能力的影响;Transwell和划痕实验检测sh-DDIT4对肺腺癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果qRT-PCR结果显示,DDIT4 mRNA在BEAS-2B、H1299和A549细胞中相对表达水平分别为1.01±0.04、2.19±0.09和3.10±0.09,差异有统计学意义,F=183.00,P<0.001。蛋白质印迹结果显示,DDIT4蛋白在BEAS-2B、H1299和A549中表达水平分别为0.39±0.02、0.98±0.01和1.00±0.02,差异有统计学意义,F=457.00,P<0.001。DDIT4mRNA在NC、sh-DDIT4#1、sh-DDIT4#2和sh-DDIT4#3组中表达量分别为1.01±0.02、0.58±0.02、0.59±0.02和0.27±0.04,差异有统计学意义,F=150.40,P<0.001;DDIT4蛋白在各组中表达量分别为1.12±0.01、0.61±0.02、0.62±0.02和0.23±0.05,差异有统计学意义,F=145.10,P<0.001。CCK-8增殖实验结果显示,120h时NC和sh-DDIT4组细胞生长率分别为0.91±0.04和0.57±0.01,差异有统计学意义,t=7.71,P<0.001。克隆形成实验结果显示,NC和sh-DDIT4组细胞克隆形成数量分别为120.70±6.64和10.67±0.88,差异有统计学意义,t=16.42,P<0.001。EdU实验结果显示,NC和sh-DDIT4组细胞的EdU阳性率分别为(64.33±1.76)%和(13.33±1.20)%,差异有统计学意义,t=23.89,P<0.001。细胞凋亡结果显示,NC和sh-DDIT4组细胞凋亡率分别为(22.33±1.45)%和(49.67±0.88)%,差异有统计学意义,t=16.08,P<0.001。细胞划痕实验结果显示,36h时NC和sh-DDIT4组细胞愈合度分别(84.33±1.86)%和(44.67±2.03)%,差异有统计学意义,t=14.43,P<0.001。Transwell侵袭实验结果显示,NC和sh-DDIT4组穿过小室的细胞数量分别为为(118.00±3.79)和(28.00±1.73)个,差异有统计学意义,t=21.62,P<0.001。结论DDIT4在肺腺癌细胞中表达上调,沉默DDIT4表达可抑制肺腺癌细胞增殖、迁移及侵袭,诱导细胞凋亡。