高效液相色谱串联质谱法检测阿奇霉素原料药及其制剂中6种N-亚硝胺类基因毒性杂质

目的建立同时测定阿奇霉素原料药及其制剂中N-亚硝基二甲胺(NDMA)、N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸(NMBA)、N-亚硝基二乙胺(NDEA)、N-亚硝基乙基异丙胺(NEIPA)、N-亚硝基二异丙胺(NDIPA)、N-亚硝基二丁胺(NDBA)6种N-亚硝胺类基因毒性杂质含量的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)法。方法色谱柱为ACE Excel 3 C18-AR柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为0.6 mL/min,离子源为大气压化学电离(APCI)源,采用多反应监测(MRM)模式。结果NDMA,NMBA和NDEA,NEIPA,NDIPA,NDBA的质量浓度分别在0.48~48.00 ng/mL和0.13~13.25 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r>0.9950,n=6);NDMA,NMBA,NDEA,NEIPA,NDIPA,NDBA的检测限分别为0.16,0.16,0.04,0.04,0.04,0.04 ng/mL,定量限分别为0.49,0.48,0.13,0.13,0.13,0.13 ng/mL;精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于2.0%(n=6);平均加样回收率分别为90.50%,90.43%,93.36%,99.30%,96.09%,98.59%,RSD分别为3.01%,6.02%,3.30%,2.78%,4.45%,5.34%(n=9)。结论该方法操作简便、灵敏度高、结果准确、专属性强,可用于阿奇霉素原料药及其制剂中6种N-亚硝胺类基因毒性杂质的含量测定。