蓝光诱导猪视网膜色素上皮细胞复制衰老的实验研究

目的观察蓝光对猪视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞复制衰老过程中衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence associated-beta-galactosidae,SA-β-Gal)的影响。方法将第3～6代猪 RPE 细胞置于自制蓝光发光二极管(light emitting diode,LED)光源下,波长450～500 nm,1h/d;细胞表面水平光照强度分别为(500±100)lux、(1000±200)lux、(2000±500)lux,光照时细胞水平面的温度变化为36.5～37.5℃;对照组用黑纸完全包裹培养瓶。将各组细胞消化后接种于24孔板和96孔板培养24 h,进行 SA-β-Gal 活性的检测和 MTT 法检测细胞增殖情况。结果随光照强度和传代次数增加,细胞内出现蓝色颗粒的阳性细胞数目逐渐增多,SA-β-Gal活性增高,除高强度与中强度光照组、第4代和第5代之间相比差别没有统计学意义(P>0.05)外,其余每两组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05);通过 MTT 法检测,细胞的增殖能力随光照强度和传代次数增加而降低,除中强度与低强度光照组相比差别没有统计学意义(P>0.05)外,其余每两组之间的差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论蓝光可以诱导体外培养猪 RPE 细胞复制衰老,并且光照强度增加可以促进细胞复制衰老。