SET8 siRNA对食管癌TE1细胞周期以及化疗敏感性的影响

目的食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,目前对食管癌发生发展相关分子机制的研究成为热点,寻找新的肿瘤分子标志物,以期提高食管癌的早期诊治水平。本研究探讨siRNA沉默SET8基因对食管癌TE1细胞周期、细胞凋亡和药物敏感性的影响。方法设计并体外转录合成针对人SET8基因的特异性siRNA,并通过脂质体(Lipofectamine^(TM) 2000)将SET8 siRNA转染入TE1细胞。蛋白质印迹法检测转染前后TE1细胞中SET8蛋白表达的变化,流式细胞术分析SET8siRNA对TE1细胞周期及细胞凋亡的影响,MTS法观察SET8基因在TE1细胞中表达沉默对紫杉醇、顺铂、5-FU、依托泊苷敏感性的影响。结果 SET8-siRNA转染组抑制了SET8蛋白表达水平,与两对照组相比分别降低了79.70%。SET8表达沉默可导致细胞周期障碍,细胞周期于SET8-siRNA转染后72h G_2/M期阻滞(P<0.01),并诱导TE1细胞凋亡,P<0.01。紫杉醇处理后,SET8-siRNA组和阴性对照组的半抑制率浓度(IC_(50))分别为(66.85±0.64)和(117.24±3.18)μg/L,SET8-siRNA转染食管癌细胞株TE1对紫杉醇药物更加敏感(t=-26.906,P=0.001),而顺铂、依托泊苷和5-FU处理后,SET8-siRNA组和阴性对照组的IC_(50)差异无统计学意义,均P>0.05。结论靶向SET8-siRNA能明显下调靶基因SET8基因的表达,导致细胞周期障碍,诱导细胞凋亡,并能提高食管癌对紫杉醇的敏感性,为食管癌的治疗提供新的策略。