检测犬瘟热病毒和犬细小病毒复合型胶体金免疫层析试纸的研制

为了制备检测犬瘟热病毒(CDV)和犬细小病毒(CPV)复合型胶体金免疫层析试纸,试验采用辛酸-硫酸铵法纯化获得的单克隆抗体样品,采用一膜包被2个抗体的方法,用混合后的金标记抗貉源细小病毒VP2单克隆抗体和胶体金标记抗水貂源犬瘟热病毒单克隆抗体作为示踪物,建立了CPV和CDV感染快速鉴别诊断试纸条。结果表明:本方法特异性强,灵敏度高,且操作简便、结果判定直观,可以用于貉、貂、狐等毛皮动物CPV和CDV感染的检测与鉴别诊断。

犬瘟热病毒单克隆抗体的制备和鉴定

将从水貂中分离的犬瘟热病毒(CDV)HB株,以培养纯化的犬瘟热病毒HB株免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术,通过ELISA筛选,获得3株能稳定分泌抗犬瘟热病毒结构蛋白的单克隆抗体杂交瘤细胞株。3株单克隆抗体菌属于IgG1亚类,其腹水效价可达到1∶51 200和1∶204 800,细胞培养上清液效价可达到1∶256和1∶512。ELISA分析表明,单抗仅与CDV发生特异性反应,而与犬细小病毒(CPV)和犬腺毒(CAV)没有交叉反应;荧光免疫染色检测进一步表明单克隆抗体的特异性好。该特异性单抗的制备为建立有效检测犬瘟热病毒感染的方法奠定基础。