基于网络药理学及实验验证探讨益气温阳活血利水中药组分配伍防治慢性心力衰竭作用机制

利用网络药理学及分子对接预测益气温阳活血利水中药组分配伍防治慢性心力衰竭(chronic heart failure)潜在靶向作用机制。通过文献检索及课题组前期经验,确定黄芪、桂枝、丹参、葶苈子四味益气温阳活血利水代表药物。采用TCMSP、BATMAN-TCM平台筛选四种药物的活性成分并预测相关作用靶点;利用GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选CHF相关靶点;通过String数据库构建蛋白互作PPI网络;利用DAVID数据库进行GO分析和KEGG通路分析;通过Cytoscape 3.8.0软件构建网络关系图;通过Autodock vina进行分子对接。共收集得到化合物21个,CHF靶点共10759个,其中黄芪总皂苷、丹参总酚酸、葶苈子水提物及桂皮醛与疾病的交集靶点分别为75、56、163、27个,根据degree值筛选核心靶点40个;GO分析和KEGG通路分析分别将排名靠前的条目可视化;分子对接结果显示四种中药活性成分与核心靶点结合能稳定。动物实验结果显示,组分配伍能改善心功能,降低血浆中B型钠尿肽前体(NT-proBNP)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)、升高血清中超氧化物歧化酶(SOD)、降低丙二醛(MDA),改善心肌细胞凋亡。本研究初步揭示了黄芪总皂苷、丹参总酚酸、桂皮醛与葶苈子水提物组分配伍多成分、多靶点、多途径治疗CHF的机制,作用机制可能与细胞凋亡、氧化应激、炎症反应及能量代谢有关。

线上研讨式教学在中药药剂学研究生教学中的探索与应用

线上研讨式教学法以学生为主体,教师为主导,通过一系列具体措施引导学生理论与实践并重。通过线上教学与研讨式教学相结合的方法加深学生在学习过程中对重点问题的理解,促使学生把理论知识转化为实践技能,发挥学以致用的优势。本文以中药药剂学研究生教学为例,分析了线上研讨式教学的关键环节、对中药药剂学教学的意义、存在的问题及改进策略。线上研讨式教学激发了学生的积极性,提高了学生自主学习、自主解决问题的能力,培养了学生专业实践能力,提高了中药药剂学的教学效果,今后应更加注重线上研讨式教学在中药药剂学教学中的应用。

基于均匀设计法探讨益气温阳活血利水中药组分防治慢性心力衰竭的剂量配比

目的基于均匀设计法筛选益气温阳活血利水中药组分防治慢性心力衰竭(CHF)的最佳配比及配伍效应。方法采用主动脉弓缩窄法制备CHF大鼠模型,运用均匀设计法,以大鼠血清N端脑利钠肽前体(NT-proBNP)含量和射血分数(EF)为因变量,通过多元线性回归分析,筛选益气温阳活血利水中药组分最佳剂量配比,并对筛选结果进行实验验证,测定大鼠心重指数,HE及Masson染色观察心肌组织病理形态,ELISA检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、醛固酮(ALD)及血清肌钙蛋白T(cTnT)含量。结果回归方程提示益气温阳活血利水中药组分最佳配比为:黄芪总皂苷60 mg/kg,丹参总酚酸10 mg/kg,葶苈子水提物190 mg/kg,桂皮醛100 mg/kg。验证实验结果显示,与模型组比较,给药组病理切片心肌细胞排列较整齐,胶原纤维堆积改善;心重指数明显减少(P<0.01);血浆AngⅡ、ALD及血清cTnT含量均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论应用均匀设计与药效分析法可优化益气温阳活血利水中药组分防治CHF的最佳剂量配比。

中药及提取物干预心肌细胞Cx43表达拮抗心律失常的机制

心律失常即心脏电活动的起源或传导障碍导致心脏搏动的频率或节律异常的临床综合征,是心血管系统疾病中最为严重的病症之一,目前尚无特效治疗药物,常用药离子通道阻滞剂存在诱发新的心律失常或使原症状加重的风险[1]。心律失常属于中医“心悸”“怔忡”范畴,中医辨证治疗发挥了举足轻重的作用。近年来中药抗心律失常作用的相关通路研究越来很多,其中缝隙连接蛋白(connexin,Cx)尤为突出。

基于传统汤剂参比的乌药汤制剂提取工艺研究

目的:确定古代经典名方乌药汤制剂适宜的提取工艺。方法:分别采用传统工艺、传统工艺水煎液蒸馏分离挥发油、二次回流提取工艺、双提法制备不同提取液,以传统工艺提取液(传统汤剂)特征图谱、指标成分含量及出膏量为参照,比较不同提取液物质基础的异同。结果:3种工艺与传统汤剂特征图谱相似度均>0.96,出膏量均差异无统计学意义(P>0.05)。与传统汤剂20个特征峰及6个指标成分相比,传统工艺水煎液蒸馏分离挥发油中13个峰绝对峰面积显著降低,2个指标成分含量显著降低(P<0.05);二次回流提取工艺中6个峰绝对峰面积显著增加,4个指标成分含量显著增加(P<0.05);双提法中2个峰绝对峰面积显著增加,1个指标成分含量显著增加(P<0.05),其余成分无显著性变化(P>0.05)。结论:双提法与传统汤剂关键质量属性基本一致,且能保留挥发性活性物质,为适宜的提取工艺。

黑木耳Y9液体发酵产物冻干粉成分及生物活性分析

为明确黑木耳Y9发酵产物的生物活性物质含量及功能,分别对黑木耳Y9液体发酵产物冻干粉中蛋白质、纤维、多糖、黑色素、类黄酮的含量以及抗氧化、抗肿瘤活性进行测定。结果表明,黑木耳Y9发酵产物冻干粉的粗蛋白含量为135.04 mg·g^(-1),粗纤维含量为39.24 mg·g^(-1),粗多糖含量为77.04 mg·g^(-1),黑色素含量为2.80 mg·g^(-1),总黄酮含量为4.72 mg·g^(-1)。发酵产物冻干粉对DPPH·、O_(2)·^(-)和·OH清除率的IC50值分别为4.002、4.345、8.623 mg·mL^(-1),对胃癌细胞(BGC-823)和乳腺癌细胞(MCF-7)抑制率的IC_(50)值分别为9.775、3.995 mg·mL^(-1)。黑木耳Y9发酵产物含有丰富的生物活性物质,具有较强的抗氧化和抗肿瘤活性。

消痰化瘀中药对NAFLD大鼠SREBP 1c/FAS/ACCmRNA表达的影响

目的观察消痰化瘀中药对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)大鼠肝脏SREBP-1c、FAS和ACCm RNA表达的影响,探讨其治疗NAFLD的作用机制。方法将SPF级60只SD大鼠随机分正常组、模型组、阳性药(东宝肝泰)组以及消痰化瘀中药高、中、低剂量组,通过高脂饲料喂养复制NAFLD大鼠模型,造模同时给予相应药物治疗,8周后观察各组大鼠血清TC、TG、FFA、ALT、AST和肝组织中TC、TG、FFA的活性或含量改变,观察肝脏SREBP-1c、FAS和ACCm RNA的表达变化以及肝组织病理形态学改变。结果与模型组比较,消瘀化痰中药高、中、低剂量组血中TG、TC、FFA、ALT、AST和肝组织中TG、TC、FFA的活性或含量明显降低(P<0.05),肝脏SREBP-1c、FAS和ACCm RNA的表达水平明显下调(P<0.05)。结论调控SREBP-1c、FAS和ACC基因的过度表达,抑制脂质合成,促进脂肪酸氧化,减少肝脏脂质沉积,可能是消痰化瘀中药防治NAFLD的作用机理之一。

补肾活血方对肾虚血瘀型子宫内膜增生症大鼠的作用及机制研究

目的探讨补肾活血方(巴戟天、菟丝子、沙苑子、党参、茯苓等)对肾虚血瘀型子宫内膜增生症(Endometrial hyperplasia,EH)大鼠的作用及机制。方法将90只SD大鼠随机分为正常组、模型组、米非司酮组(12 mg·kg^(-1))及补肾活血方低、中、高剂量组(1.2、2.4、4.8 g·kg^(-1)),每组15只。采用灌胃羟基脲及戊酸雌二醇,联合尾静脉注射高分子右旋糖苷法复制肾虚血瘀型EH大鼠模型。造模成功后,各组按照设定剂量灌胃给药,每日1次,连续21 d。实验结束后,采用生化法检测各组大鼠血清环磷酸腺苷(c AMP)、环磷酸鸟苷(c GMP)、皮质醇(CORT)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、三碘甲状腺原氨酸(T_(3))、甲状腺素(T_(4))、促甲状腺激素(TSH)的水平以及全血黏度、血液流变学、凝血功能等指标;ELISA法检测血清雌激素(E2)、卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)的水平;HE染色法观察子宫内膜组织病理形态变化,并测量子宫内膜厚度;免疫组化法检测子宫内膜组织中基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制物1(TIMP-1)蛋白表达水平;Western Blot法检测子宫内膜组织中MMP-9、TIMP-1、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、第10号染色体缺失性磷酸酶-张力蛋白同源物基因(PTEN)蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清CORT、ACTH、c AMP、T_(3)、T_(4)、TSH、ET-1水平及ET-1/NO比值均明显降低(P<0.05,P<0.01),c GMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);血液流变学各项指标及纤维蛋白原(FIB)含量均明显升高(P<0.05),凝血酶时间(TT)、凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)均明显延长(P<0.05);子宫指数及子宫内膜厚度显著升高(P<0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著下调(P<0.01)。与模型组比较,补肾活血方组大鼠血清CORT、ACTH、c AMP、T_(3)、T_(4)、TSH、ET-1水平及ET-1/NO比值均明显升高(P<0.05,P<0.01);c GMP、E2、FSH、LH、NO水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);血液流变学各项指标及FIB含量均明显降低(P<0.05,P<0.01),TT、PT、APTT均明显缩短(P<0.05);子宫指数及子宫内膜厚度均明显降低(P<0.05,P<0.01);子宫内膜组织MMP-9、Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),TIMP-1、PTEN、Bax蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。结论补肾活血方能够改善肾虚血瘀型EH大鼠的症状和体征,保护子宫内膜血管内皮功能,以缓解子宫内膜增生,其作用机制与恢复MMP-9/TIMP-1平衡,上调Bax、PTEN表达,抑制Bcl-2表达有关。

基于TLR4/NF-κB/MLCK通路探讨百合地黄汤治疗失眠伴肠道菌群失调小鼠的机制

目的基于TLR4/NF-κB/MLCK通路研究百合地黄汤对对氯苯丙氨酸(PCPA)及多因素刺激所致失眠伴肠道菌群失调小鼠的治疗作用及机制,为临床用药提供理论依据。方法将84只KM小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药物组(地西泮,1.38 mg·kg^(-1))、百合组(2.25 g·kg^(-1))、地黄组(2.25 g·kg^(-1))、百合地黄汤组(4.5 g·kg^(-1))。采用夹尾2 min、昼夜颠倒24 h、垫料潮湿24 h、45°鼠笼倾斜24 h、交替鼠笼24 h、禁食不禁水24 h、冷水浴3 min等多因素刺激4周结合PCPA腹腔注射2 d共同制备失眠小鼠模型。模型复制成功后,给予相应的药物治疗。采用高架十字迷宫系统观察小鼠的焦虑样行为;通过翻正反射实验观察睡眠潜伏期和睡眠持续时间;16s RNA测序法分析小鼠肠道菌群组成结构;液相色谱-质谱联用(LC-MS)检测脑和结肠γ-氨基丁酸(GABA)、谷氨酸(Glu)、色氨酸(Trp)、5-羟色氨酸(5-HTP)、5-羟色胺(5-HT)的浓度变化;免疫组织化学法检测结肠中闭锁小带蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)的表达情况;实时荧光定量PCR法(q RT-PCR)检测结肠组织中基因白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、ZO-1、Occludin、Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)、肌球蛋白轻链激酶(MLCK)的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测结肠上皮组织中蛋白TLR4、NF-κB、磷酸化-核因子κB(p-NF-κB)、MLCK、肌球蛋白轻链(MLC)和磷酸化-肌球蛋白轻链(p-MLC)表达情况。结果与正常组小鼠比较,模型组小鼠在高架十字迷宫中进入开臂区域的距离、在开臂区域停留的时间明显缩短(P<0.05);睡眠潜伏期明显延长、睡眠持续时间明显缩短(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度降低(P<0.01);脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT浓度明显降低(P<0.01),Glu浓度明显升高(P<0.01);结肠中GABA、Glu浓度明显降低(P<0.01),Trp、5-HTP、5-HT浓度明显升高(P<0.01);结肠组织炎性因子IL-1β、IL-6以及TNF-α基因表达水平明显升高(P<0.01),ZO-1、Occludin基因和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),通路中TLR4、NF-κB、MLCK基因表达水平明显升高(P<0.01),TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。与模型组小鼠比较,百合地黄汤能够明显延长失眠小鼠在高架十字迷宫中进入开臂区域距离、在开臂区域停留的时间(P<0.05);明显缩短睡眠潜伏期、增加睡眠持续时间(P<0.05);肠道菌群的丰富度、均匀度升高(P<0.01);升高脑内神经递质GABA、Trp、5-HTP、5-HT浓度(P<0.05,P<0.01),降低Glu浓度(P<0.01);升高结肠中GABA、Glu浓度(P<0.01),降低Trp、5-HTP、5-HT浓度(P<0.05,P<0.01);下调IL-1β、IL-6、TNF-α基因表达水平(P<0.01),上调ZO-1、Occludin基因和蛋白表达水平(P<0.01),下调通路中TLR4、NF-κB、MLCK基因表达水平和TLR4、p-NF-κB、MLCK、p-MLC蛋白表达水平(P<0.01)。结论百合地黄汤能够有效治疗失眠伴肠道菌群失调症状,其作用机制可能与调节脑和肠内神经递质紊乱、下调TLR4/NF-κB/MLCK信号通路表达、上调紧密连接蛋白表达、降低炎症反应,进而修复肠黏膜机械屏障有关。

气相色谱-质谱联用技术分析白扁豆不同部位挥发性成分

目的建立鉴定并分析白扁豆不同部位的挥发性成分及差异的气相色谱-质谱联用技术。方法采用水蒸气蒸馏法提取白扁豆、白扁豆花、白扁豆皮的药效成分并进行分析,结合质谱数据库及文献报道鉴定其挥发性成分。结果白扁豆3个部位挥发性成分中鉴定出脂肪酸及其酯、酮、醇、醚、烃、杂环化合物等。在白扁豆中发现10种挥发性成分,鉴定出7种化学成分;在白扁豆花中发现20种挥发性成分,鉴定出17种化学成分;在白扁豆皮中发现20种挥发性成分,鉴定出15种化学成分。结论白扁豆及其扁豆花、扁豆皮中挥发性成分类别差异较大,其数量及含量也大不相同,可为其挥发性成分的开发利用提供科学依据。

基于气相指纹图谱技术研究鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和干白扁豆花的成分

本研究以白扁豆花为原料,首次通过气相(GC)色谱指纹图谱技术,考察鲜白扁豆花、冻干白扁豆花和晒干白扁豆花成分的差异。色谱柱为DB-1毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25μm),流速为1 mL/min。冻干白扁豆花和鲜白扁豆花的指纹图谱相似度比值为0.950以上;而晒干白扁豆花和鲜白扁豆花的指纹图谱相似度比值为0.720左右;采用气相质谱(GC-MS)方法,鲜白扁豆花共计检测出13种成分,鲜白扁豆花、冻干扁豆花和晒干扁豆花中成分的种类差异不大,但是相似度数值有差别,冻干扁豆花可替代鲜扁豆花应用于临床。冻干扁豆花可以更能有效的避免因储存而导致的有效成分的减少,有利于白扁豆花更好地应用于临床。

基于数据挖掘中药治疗失眠症的用药规律分析

目的:探究中医药治疗失眠症的用药规律,为指导临床用药提供参考。方法:以中国知网为数据来源,主题词为“失眠”或“不寐”或“不得卧”+“中药”,筛选近几年来与中医药治疗失眠相关的临床期刊文献,将符合标准的文献信息录入Excel中,再利用SPSS Statistics 24.0、SPSS Modeler 18.0软件对数据进行关联规则分析和聚类分析。结果:共检索文献358篇,筛选出符合收录标准的文献205篇。统计结果显示,205篇治疗失眠的文献中,以甘草(127次,61.95%)、酸枣仁(124次,60.49%)、茯苓(91次,44.39%)的使用频率最高;主要证型为心胆气虚型(29次,14.15%)、肝火扰心型(25次,12.19%)、痰热内扰型(24次,11.71%)、瘀血内阻型(20次,9.76%)、心脾两虚型(17次,8.29%)、心肾不交型(17次,8.29%);统计使用频次>12的高频中药,寒凉药、甘味药居于首位。结论:目前临床中的失眠证型以心胆气虚证、肝火扰心证、痰热内扰证、瘀血内阻证、心脾两虚证和心肾不交证为主。故临床多采用清肝火、养肝阴、化痰湿、祛瘀血、益心气的治疗原则,筛选适证中药及药物组合,其中甘草、酸枣仁、茯苓、柴胡、远志等使用频率较高,龙骨-牡蛎、当归-白术、柴胡-白芍、甘草-茯苓、甘草-半夏、柴胡-黄芩等为核心药组。

六味安神中药对小鼠镇静催眠作用影响的研究

目的:研究酸枣仁、延胡索、百合、地黄、半夏、夏枯草6味安神中药对戊巴比妥钠阈下剂量小鼠的睡眠只数,阈上剂量小鼠的睡眠潜伏期和睡眠持续时间以及对对氯苯丙氨酸(PCPA)失眠小鼠脑神经递质含量的影响,探讨其镇静催眠的作用及机制。方法:168只昆明小鼠,随机分为7组:正常组、酸枣仁组(2.25 g/kg)、延胡索组(1.50 g/kg)、百合组(2.25 g/kg)、地黄组(2.25 g/kg)、半夏组(1.35 g/kg)、夏枯草组(2.25 g/kg)。连续灌胃给药10 d,通过阈下剂量戊巴比妥钠协同睡眠实验,观察各组小鼠睡眠只数;通过阈上剂量戊巴比妥钠协同睡眠实验,观察各组小鼠睡眠潜伏期及睡眠持续时间。96只昆明小鼠,随机分为8组:正常组、模型组、酸枣仁组、延胡索组、百合组、地黄组、半夏组、夏枯草组。采用腹腔注射PCPA法复制失眠小鼠模型,药物治疗14 d。运用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、五-羟色胺(5-HT)的含量,同法检测垂体促肾上腺皮质激素(ACTH)和下丘脑促肾上腺皮质激素释放素(CRH)的含量。结果:与正常组比较,各给药组小鼠睡眠只数增加,睡眠潜伏期缩短,睡眠持续时间延长。与正常组比较,模型组小鼠血清NE、DA、ACTH和CRH含量升高,5-HT含量降低。与模型组比较,半夏组小鼠血清NE含量升高,延胡索组5-HT含量升高,其余各给药组小鼠血清NE、DA、ACTH和CRH含量降低,5-HT含量降低。结论:酸枣仁、延胡索、百合、地黄、半夏、夏枯草6味安神中药具有改善小鼠睡眠的作用,酸枣仁、延胡索、百合、地黄适用于睡后易醒的患者,半夏、夏枯草可以广泛用于失眠患者。其作用机制可能与降低脑内DA、NE、ACTH、CRH水平有关。

中医药治疗药物性肝损伤的用药规律分析

目的:运用数据挖掘技术分析中医药治疗药物性肝损伤(DILI)的用药规律。方法:以中国知网为数据来源,以“药物性肝损伤”或“药物性肝病”或“药物性肝损害”或“药物性肝炎”或“药源性肝损伤”或“药源性肝病”或“药源性肝损害”为检索词,筛选近二十年中医药治疗DILI的相关文献,将符合标准文献处方录入Excel中,再利用SPSS Modeler 18.0和SPSS Statistics 25.0软件对数据进行关联规则和系统聚类分析。结果:检索共筛选出符合标准文献75篇。纳入治疗DILI的处方75首,涉及123味中药,使用频数782次,其中甘草(51次,68.00%),柴胡(41次,54.67%),白术(36次,48.00%)等使用频率较高。统计分析药物频次>5次的中药,结果显示,治疗DILI的39味中药,药性以寒性为主,药味以苦、甘味为主,药物归经多归于肺、肝、脾经。DILI相关高频中药有甘草、柴胡、白术、白芍、茯苓、当归、茵陈,常用药物组合为柴胡-白芍、柴胡-丹参、甘草-赤芍、甘草-栀子等。结论:中医学从湿热毒瘀角度论治DILI,临床疗效显著,深入挖掘其用药规律有助于护肝新药的研究与开发。

五味化痔胶囊对痔模型大鼠炎症因子和PI3K/AKT/NF-κB信号通路的影响

目的:研究五味化痔胶囊对痔模型大鼠肛周肿胀、溃疡、出血等症状,直肠组织病理形态学,炎症因子,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/核因子κB(PI3K/AKT/NF-κB)信号通路表达的影响,探究其治疗痔病的作用机制。方法:SD大鼠分为空白组、模型组、美沙拉嗪组、五味化痔胶囊低、中、高剂量组。选用角叉菜胶、脂多糖、山莨菪碱、酚磺乙胺混合液,注射于大鼠肛肠局部复制大鼠痔模型。造模后,中药各组予五味化痔胶囊干预7 d,观察肛周肿胀、溃疡、出血等症状表现,HE染色观察直肠组织病理形态,酶联免疫吸附试验检测组织匀浆中炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)以及白介素-6(IL-6)的水平,qRT-PCR技术观察直肠组织中PI3K、AKT、NF-κB的基因表达,免疫组化法观察直肠组织环氧化酶2(COX2)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达。结果:与空白组相比,模型组肛周肿胀、溃疡、出血等症状评分升高(P<0.05),光镜下观察到直肠组织黏膜缺损、间质血管扩张充血、炎性细胞浸润等情况;血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平上升(P<0.05),直肠组织中PI3K、AKT、NF-κB的mRNA表达及COX2、iNOS蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组相比,美沙拉嗪组和五味化痔胶囊高、中剂量组症状评分下降(P<0.05),直肠组织黏膜缺损、间质血管扩张充血、炎性细胞浸润等情况有所缓解;美沙拉嗪组和五味化痔胶囊高、中、低剂量组IL-1β、IL-6和TNF-α水平下降(P<0.05),PI3K、NF-κB mRNA表达和COX2、iNOS蛋白表达下降(P<0.05),五味化痔胶囊高剂量组AKT mRNA表达下降(P<0.05)。结论:五味化痔胶囊可能通过抑制PI3K/AKT/NF-κB通路、调节炎症因子的水平治疗痔病。

锦灯笼调控PPAR/JNK2通路防治药物性肝损伤的作用机制探讨

目的基于PPAR/JNK2通路探讨锦灯笼防治药物性肝损伤(DILI)的作用机制。方法将50只Wistar大鼠随机分为5组:正常组、模型组、水飞蓟宾组(44.1 mg·kg^(-1))及锦灯笼高(6.67 g·kg^(-1))、低(1.67 g·kg^(-1))剂量组。采用对乙酰氨基酚(APAP,1000 mg·kg^(-1))溶液灌胃复制DILI大鼠模型,同时给予相应药物灌胃,每日1次,连续30 d。检测大鼠血清生化指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX);HE染色法观察肝组织病理变化;免疫组化法检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP-1β)的表达情况;免疫荧光检测肝组织巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的表达情况;Western Blot法检测肝组织c-Jun氨基末端激酶2(JNK2)、磷酸化氨基末端激酶2(p-JNK2)蛋白表达情况;qRT-PCR法检测肝组织过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和JNK2的基因表达水平。结果与正常组相比,模型组大鼠血清ALT、AST、DBIL及TBIL水平均明显升高(P<0.05,P<0.01),TNF-α、IL-6及IFN-γ水平均显著升高(P<0.01);血清MDA水平显著升高(P<0.01),GSH、GSH-PX水平显著降低(P<0.01);大鼠肝组织的肝小叶结构被严重破坏,肝细胞排列紊乱,有明显的炎性细胞浸润,并出现不同程度的坏死和变性;大鼠肝组织MIP-1β蛋白表达量显著升高(P<0.01),MIP-2蛋白阳性表达显著增强(P<0.01),p-JNK2蛋白表达显著上调(P<0.01);大鼠肝组织PPARαmRNA表达显著下调(P<0.01),PPARγ、JNK2 mRNA表达显著上调(P<0.01)。与模型组相比,水飞蓟宾组和锦灯笼高、低剂量组大鼠血清ALT、AST、DBIL、TBIL、TNF-α、IL-6及IFN-γ水平均明显降低(P<0.05,P<0.01);血清MDA水平显著降低(P<0.01),GSH、GSH-PX水平明显升高(P<0.05,P<0.01);肝损伤程度降低,肝细胞排列较为整齐,少有炎性细胞浸润,其中以锦灯笼高剂量组肝组织损伤的改善程度最为明显;大鼠肝组织MIP-1β蛋白表达量明显降低(P<0.05,P<0.01),MIP-2蛋白表达明显下调(P<0.05,P<0.01);锦灯笼高、低剂量组大鼠肝组织PPARαm RNA表达均显著上调(P<0.01),JNK2 mRNA表达显著下调(P<0.01),锦灯笼高剂量组大鼠肝组织p-JNK2蛋白表达明显下调(P<0.05),PPARγmRNA表达明显下调(P<0.05)。各组大鼠肝组织JNK2蛋白表达无明显差异(P>0.05)。结论锦灯笼可能通过调控PPAR/JNK2通路,抑制炎性因子水平,减少趋化因子产生,降低氧化应激反应,从而发挥对APAP诱导DILI大鼠的保护作用。

经典名方苓桂术甘汤中挥发油提取工艺优选

目的比较经典名方苓桂术甘汤中白术和桂枝混合挥发油的两种提取方法,优选其挥发油的提取工艺。方法分别采用提取-共沸精馏耦合(WER)法和水蒸气蒸馏(SD)法提取白术和桂枝混合挥发油,采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法对提取物进行分析,比较其差异。结果WER法挥发油得率为每100 g生药0.51 mL,SD法挥发油得率为每100 g生药0.98 mL。两种方法共分析得到17个化合物,WER法分析鉴定了15个化合物,主要为醛类物质(43.59%);SD法分析鉴定了11个化合物,主要为酮类物质(59.31%)。结论WER法提取的挥发油纯度、化合物成分含量均高于SD法,更适合经典名方苓桂术甘汤中白术和桂枝混合挥发油的提取。

UHPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定尖叶假龙胆中7个成分的含量

目的:建立UHPLC-QTRAP-MS/MS法同时测定尖叶假龙胆中芒果苷、异荭草素、去甲当药醇苷、异牡荆素、当药醇苷、去甲基雏菊叶龙胆酮、雏菊叶龙胆酮7个成分含量。方法:采用Shim-pack GIST C_(18)(100 mm×2.1 mm,2μm)色谱柱;以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相,梯度洗脱;流速为0.3 mL/min;柱温为35℃;采用电喷雾离子源(ESI),多反应离子监测(MRM)模式进行负离子监测。结果:上述7个成分之间分离度良好,且分别在一定的浓度范围内与峰面积的线性关系良好(R^(2)≥0.9990),平均加样回收率为98.76%~102.74%,RSD<2.50%,方法重复性、仪器精密度和供试品溶液的稳定性均良好。结论:该方法操作简便,快速,灵敏度高,可用于尖叶假龙胆中成分的含量测定,为尖叶假龙胆药材的质量控制提供了新方法。

金针菇面包干工艺配方的研究

以鲜金针菇、金针菇粉和干金针菇段为原料,进行金针菇面包干工艺配方的研究。通过对产品感官评价、电子鼻和电子舌的综合分析,确定最佳的金针菇面包干配方,并对其进行膳食纤维含量的测定。结果表明:通过鲜加和干加等多种形式,形成6个金针菇面包干新配方;通过产品感官评价确定得分较高的配方为新配方1和新配方6;综合电子鼻和电子舌测定结果,确定金针菇面包干最佳配方为新配方1,即:小麦面粉1000 g,酵母32 g,白砂糖140 g,食用盐12 g,酥油110 g,鸡蛋100 g,水400 mL,金针菇粉60 g,该配方制得的面包干边缘呈焦黄色,组织细密,口感酥脆且富含膳食纤维。

藏花醛药理活性及作用机制的研究进展

藏花醛是一种单萜醛,是藏红花的主要挥发性成分之一,也是藏红花香气产生的主要原因,在食品、饮品中广泛应用。现代药理学研究证明藏花醛有着广泛的药理学活性,如心血管保护作用、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种特性,这些药理作用主要基于其具有高度抑制机体内活性氧(ROS)的潜力。本文对藏花醛的主要来源、理化性质进行介绍,着重总结了近年来藏花醛的药理活性及作用机制的研究进展。