NDRG2上调PTEN表达抑制乳腺癌细胞迁移的实验

目的利用具有相同遗传背景但不同转移能力的乳腺癌细胞模型MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞,研究NDRG2调控乳腺癌细胞迁移的作用及机制。方法利用RT-PCR和蛋白免疫印迹法检测MCF-7、LM-MCF-7以及MDA-MB-231细胞中NDRG2和PTEN mRNA和蛋白表达水平;构建pCMV-NDRG2和pCMV-PTEN表达载体以及设计合成NDRG2和PTEN siRNA,通过转染过表达或沉默NDRG2和PTEN表达,Transwell迁移实验检测转染后细胞迁移能力改变,Western blot检测NDRG2和PTEN表达调控关系。结果 MCF-7细胞中NDRG2和PTEN mRNA水平和蛋白表达水平显著高于LM-MCF-7和MDA-MB-231细胞(P<0.05);在LM-MCF-7和MDA-MB-231中上调NDRG2表达可降低细胞迁移能力至13.02%和26.33%(P<0.01);在MCF-7细胞中沉默NDRG2表达可增强细胞迁移能力至354.62%(P<0.01);蛋白免疫印迹检测显示PTEN表达受NDRG2调控;沉默(或过表达)NDRG2表达,同时过表达(或沉默)PTEN,MCF-7(或LM-MCF-7)细胞迁移能力未发生显著变化(P>0.05)。结论乳腺癌细胞中,NDRG2的表达下调,导致PTEN表达下降,解除了对乳腺癌细胞迁移的抑制作用。NDRG2/PTEN信号途径的沉默是乳腺癌细胞获得高迁移能力的重要机制。