医学专业药理学课程教学改革与实践

针对药理学在医学中所处的特殊地位和课程自身的特点,以提高教学质量,培养"创新型、应用型"医学人才为目标,遵循"学以致用、适用为主"的教学原则,从提高教师素质、改变教学方法、构建开放式、设计性实验教学体系、建立师生交流网络平台4个方面论述了药理学教学改革方法与实践成果。

荞麦花叶黄酮对2型糖尿病C_(57)小鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗的影响

目的观察荞麦花叶黄酮(FBFL)对2型糖尿病(T2DM)C57小鼠糖脂代谢及胰岛素抵抗(IR)的影响并探讨其可能的机制。方法采用高脂饮食加腹腔注射链脲佐菌素建立T2DM模型。将C57小鼠分为6组,即正常对照组、模型对照组、阿卡波糖组和FBFL低、中、高剂量组,每组11只。各组小鼠灌胃1次/d,连续4周。血糖仪测定空腹血糖(FBG)、餐后血糖(PBG)每周1次,并进行口服葡萄糖耐量试验测定;放免法测定血清胰岛素;生化仪检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)。酶联免疫法检测游离脂肪酸(FFA);HE染色观察各组小鼠胰腺组织病理改变。结果与模型对照组比较,FBFL各剂量组FBG、PBG不同程度降低,糖耐量改善,血清胰岛素水平降低,提高胰岛素敏感指数提高,TC、TG、LDL-C及FFA降低,HDL-C增高(P<0.05,P<0.01),同时胰腺组织病理改变不同程度减轻。FBFL高剂量组上述作用最为明显。结论 FBFL对T2DM C57小鼠具有降糖、降脂及改善IR作用,其IR改善作用可能通过调血脂作用产生。

荞麦花叶芦丁对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的观察荞麦花叶芦丁(RBFL)对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用,并探讨其机制。方法采用小剂量链脲佐菌素(STZ)加高糖高脂饲料喂养的方法建立SD大鼠2型糖尿病模型,模型建立成功后给予高低剂量RBFL治疗,检测各组体征变化、体质量、肾指数、血糖变化、血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr)含量。结果与糖尿病组大鼠相比,高低剂量RBFL治疗组大鼠血糖水平均显著下降,血清中SOD活性明显升高,MDA含量下降;BUN和Cr含量均显著下降。结论 RBFL可以明显降低2型糖尿病大鼠血糖,并且对2型糖尿病大鼠的肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与其降血糖、清除自由基等机制有关。

荞麦糠皮提取物对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖和血脂的影响

目的:研究荞麦糠皮提取物(BCE)对Ⅱ型糖尿病大鼠血糖和血脂的影响及其机制的探讨。方法:采用链脲佐菌素(STZ)和高脂饲料建立Ⅱ型糖尿病模型。成模大鼠随机分为模型对照组(M组)和荞麦糠皮提取物组(BCE组)。测定空腹血糖(FBG)及用正糖钳实验判断模型是否建立成功。测定各组大鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及游离脂肪酸(FFA)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量。结果:使用STZ和高脂饲料建立的Ⅱ型糖尿病模型成功。BCE能够不同程度地抑制Ⅱ型糖尿病大鼠血清中FBG、FFA、TC、TG、ALT、AST水平的升高,还可明显升高血清中HDL-C水平。结论:BCE可明显影响Ⅱ型糖尿病大鼠血糖和血脂的水平,从而改善胰岛素抵抗。

复方苦荞麦制剂对大鼠糖尿病心肌损伤的保护作用

目的:观察复方苦荞麦制剂对大鼠糖尿病心肌损伤的保护作用,阐明其作用机制。方法:腹腔一次性注射链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型。糖尿病大鼠分为模型组﹑复方苦荞麦制剂组和贝那普利组,同时设正常对照组,观察各组大鼠体征变化,测定体质量(BW)、心脏质量指数(HWI)和心功能指标[心率(HR)、左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张期末压(LVEDP)、左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)],检测空腹血糖(FBG)和血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)及心肌组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;光镜下观察各组大鼠心肌组织形态学改变。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠FBG、HWI、LVEDP、TG和TC升高(P<0.01),BW、LVSP、HR和±dp/dtmax下降(P<0.05或P<0.01);心肌组织MDA水平显著升高(P<0.01),而SOD和GSH-Px活性则显著降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,复方苦荞麦制剂组和贝那普利组大鼠FBG、HWI和LVEDP下降(P<0.05或P<0.01),BW、LVSP、HR和±dp/dtmax升高(P<0.05或P<0.01);心肌组织MDA水平显著降低(P<0.01),而SOD和GSH-Px活性则显著升高(P<0.05或P<0.01),但复方苦荞麦制剂组与贝那普利组大鼠上述各指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。大鼠心肌组织形态学,模型组大鼠心肌纤维紊乱,心肌细胞肿胀,而复方苦荞麦制剂组和贝那普利组大鼠心肌纤维紊乱和心肌细胞肿胀减轻,心肌细胞结构基本正常。结论:复方苦荞麦制剂对大鼠糖尿病心肌损伤具有保护作用,可能与抑制心肌脂质过氧化反应有关。

叶黄素预处理对顺铂损伤大鼠肝超微结构的影响

目的:观察叶黄素(LU)对顺铂(CP)损伤大鼠肝组织超微结构的影响。方法:将24只雌性SD大鼠随机分为生理盐水组(NS组)、顺铂化疗组(CP组)和LU干预组(LU+CP组),每组8只。NS组及CP组大鼠灌胃玉米油2 mL/kg,LU+CP组大鼠灌胃20 g/L的LU油溶液2 mL/kg。灌胃7 d后,CP组和LU+CP组腹腔注射1 g/L的CP 5 mg/kg,NS组腹腔注射等容量生理盐水。注射CP后第5天剖取肝脏,在光镜、透射电镜下观察大鼠肝组织形态结构改变。结果:LU+CP组的CP所致的肝细胞质空泡化及肝门管区纤维化等改变较CP组减轻,同时LU+CP组CP引起的线粒体嵴结构断裂或消失、粗面内质网呈片层状及染色质边集于核膜下等超微结构改变也较CP组减轻。结论:预防性喂饲LU可对CP所致的大鼠肝脏病理及超微结构损伤产生一定的保护作用。

缺血预适应对脑缺血再灌注大鼠皮质区血管内皮生长因子及存活素表达的影响

目的观察缺血预适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死灶周边皮质区血管内皮生长因子(VEGF)、存活素表达的影响,探讨其脑保护机制。方法 SD大鼠130只,随机分为假手术组10只、脑缺血组60只及预适应组60只,脑缺血组和预适应组按缺血后再灌注时间不同分为再灌注2、6、12、24、48和72h时间点,每个时间点10只。采用线栓法闭塞右侧大脑中动脉,制备大鼠局灶性脑缺血再灌注预适应模型。应用免疫组织化学法及Western blot检测观察梗死灶周边皮质区VEGF及存活素的表达。结果假手术组VEGF阳性细胞、存活素阳性细胞及皮质区VEGF蛋白和存活素蛋白表达较少。与脑缺血组比较,预适应组2、6、12、24、48和72hVEGF及存活素阳性细胞和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论脑缺血预适应可诱导VEGF和存活素表达上调,这可能是脑缺血预适应诱导脑缺血耐受的脑保护作用机制之一。

缺血预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧海马CA1区低氧诱导因子-1α及存活素表达的影响

目的探讨缺血预处理对局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧海马CA1区低氧诱导因子-1α(HIF-1α)及存活素表达的影响。方法健康雄性SD大鼠130只随机分为假手术组(SO组,n=10)、局灶性脑缺血再灌注组(MCAO组,n=60)、缺血预处理组(BIP组,n=60),MCAO组和BIP组又分别分为再灌注2 h、6 h、12h、24 h、48 h、72 h 6个亚组,每亚组10只大鼠。采用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型。BIP组在缺血前24h给予10 min的预缺血。采用免疫组化染色法检测HIF-1α、存活素的阳性细胞数。采用Western blot法检测HIF-1α、存活素的蛋白相对含量。结果与SO组比较,MCAO组和BIP组各时间点亚组大鼠缺血侧海马CA1区HIF-1α及存活素的阳性细胞数及蛋白相对含量均明显升高(均P<0.05)。与MCAO组比较,BIP组各时间点亚组大鼠缺血侧海马CA1区HIF-1α及存活素的阳性细胞数及蛋白相对含量均明显升高(均P<0.05)。在MCAO组和BIP组中,大鼠缺血侧海马CA1区HIF-1α及存活素的阳性细胞数及蛋白相对含量均在再灌注24 h时达到最高峰(均P<0.05)。结论缺血预处理能够诱导局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧海马CA1区HIF-1α、存活素表达上调,这或许与脑缺血耐受的产生机制有关。

荞麦黄酮复方制剂对2型糖尿病心肌肥厚的保护作用

目的探讨荞麦黄酮复方制剂(TFBCP)对2型糖尿病大鼠心肌肥厚的保护作用及其可能的机制。方法 70只SD大鼠随机取出12只作为正常对照组,其余通过高脂高热量饮食加小剂量链脲佐菌素腹腔注射,建立大鼠2型糖尿病模型。将成模大鼠随机分为4组,即TFBCP低、高剂量组,消渴丸组和肥厚模型组,前3组分别灌胃给药0.6、1.2和0.83 g/(kg.d),正常对照组和肥厚模型组每天灌服相同容积生理盐水,连续8周。观察空腹血糖(FBG)、心电图、左心室肥厚指数(LVWI:LVW/BW)和心重指数(HWI:HW/BW、LVW/HW)。采用比色法测定心室肌钙含量,用放免分析法检测血浆、心肌、肾脏血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)生成率(反映肾素活性)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量。结果与肥厚模型组比,TFBCP能剂量依赖性地改善心肌肥厚大鼠的心电图,降低FBG,LVWI,HWI,心肌钙含量和心肌AngⅡ含量,但对血浆肾脏AngⅡ含量无明显影响,对心肌、血浆和肾脏AngⅠ生成率均无明显影响,且与消渴丸组治疗效果相近。结论荞麦黄酮复方制剂对大鼠心肌肥厚具有保护作用,其机制可能与拮抗心肌局部肾素-血管紧张素系统有关。

缺血预适应对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马CA_1区血管内皮生长因子及存活素表达的影响

目的通过观察缺血预适应后局灶性脑缺血再灌注大鼠缺血侧海马CA1区血管内皮生长因子(VEGF)、存活素表达的变化,探讨缺血预适应的脑保护机制。方法 SD大鼠130只,随机分为假手术组(SO组)、脑缺血组(MCAO组)和脑缺血预适应组(BIP组),后两组按缺血后再灌注时间不同分为再灌注2 h、6 h、12 h、24 h、48 h及72 h 6个亚组。采用改良线栓法制作大鼠大脑中动脉阻塞(2 h)模型,应用免疫组化法与Western blot法观察脑缺血后再灌注各时间点海马CA1区VEGF、存活素的表达变化。结果与MCAO组比较,BIP组各时间点VEGF、存活素的阳性细胞数及蛋白量表达均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);两组组内各相邻时间点比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论脑缺血预适应可能通过上调VEGF、存活素的表达,发挥脑保护作用。

液-质串联法测定软胶囊中药用油辅料内黄曲霉毒素B_1的含量

目的:尝试利用液相色谱-串联质谱法对软胶囊中药用油辅料内黄曲霉毒素B_1含量进行测定。方法:以甲醇-0.1%甲酸水溶液为溶剂提取软胶囊中花生油所含黄曲霉毒素B_1,离心后取上清液过中性氧化铝固相萃取小柱净化,浓缩后进样测定,以甲醇-0.1%甲酸流动相梯度洗脱,流速为0.3 ml·min^(-1),柱温:30℃,进样量:25μl。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应监测方式测定样品的浓度。结果:黄曲霉毒素B_1在0.098~1.960μg·L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 5),检出限为0.05μg·L^(-1),平均加样回收率为97.73%,RSD=4.625%(n=6)。结论:此法灵敏准确,专属性强,干扰少,重现性佳,对含油药物制剂中黄曲霉毒素B_1含量检测有参考意义。

药物分析领域拉曼光谱表面信号增强剂应用研究进展

表面增强拉曼光谱法(SERS)以其独特优势在药物分子研究中具有巨大的应用价值,其中拉曼光谱活性表面增强剂与药物分子结合效果的好坏是该方法的关键所在。该文介绍了拉曼光谱表面信号增强剂与药物分子结合的效果及其应用研究进展,总结了SERS增强剂对信号放大的特点,并展望了其在药学方面的应用前景。

离子色谱法测定药用芒硝中硫酸钠含量

目的探索药用芒硝中硫酸钠含量离子色谱法的测定条件。方法采用Dionex ICS-3000型离子色谱仪、IonPacAS11-HC型分离柱、Dionex ASRS300 4-mm抑制器,以35 mmol/L的NaOH为淋洗液,流速为1.0 mL/min。结果硫酸钠质量浓度在1.053～105.300μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系(r2=0.999 7);平均回收率为97.1%,RSD=1.2%。结论所用方法灵敏准确、可操作性强,比药典收载的芒硝含量测定法简便、稳定,为药用芒硝的质量控制提供了另一种迅速实用的检测方法。

安神补心丸中掺入H1抗组胺药及镇静催眠药的检测

目的利用快速液相-质谱串联法扫描安神补心丸中违法掺入的H1抗组胺药与苯甲二氮卓类镇静催眠药,气相-质谱法测定其中掺入成分。方法快速液相-质谱串联仪进行一级质谱扫描,对其中响应较高的色谱峰通过气相-质谱库检索,确认其中成分并比较其对照品溶液及供试品溶液中相应峰的碎片的质量数及丰度计算掺入药物的量。结果被掺批次的样品中马来酸氯苯那敏平均加入量为1.84 mg/丸。结论本方法灵敏准确,可针对中成药制剂中非法掺入的抗组胺药与镇静催眠药进行有效测定。

氘代内标液质串联法测定血浆中沙丁胺醇的浓度

目的:建立液相-质谱串联法测定人血浆中的沙丁胺醇含量。方法:血浆离心后过玻璃纤维滤膜,经酶解加入氘代沙丁胺醇内标溶液,用C18小柱净化后以3%的氨水甲醇溶液对Oasis MCX小柱进行洗脱,吹干,以0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液(95∶5)溶解残余物,用液相质谱串联法测定,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。结果:沙丁胺醇在0.25～10.00μg.kg-1线性关系良好,检出限0.1μg.kg-1。结论:本法灵敏准确、重现性与特异性强、干扰少,可用于人体内沙丁胺醇药动学与生物利用度研究。

LC-MS/MS法追踪测定人血浆中克伦特罗的浓度

目的用液相色谱-质谱串联法测定人血浆中的克伦特罗含量并对其舌下片剂与气雾剂的疗效进行比较。方法血浆离心后过玻璃纤维滤膜,经酶解加入氘代克伦特罗内标溶液,用C18小柱净化后以3%的氨水甲醇溶液对Oasis MCX小柱进行洗脱,吹干,以0.1%甲酸水溶液-甲醇溶液（95：5）溶解残余物,用液相质谱串联法测定,以0.1%甲酸乙腈溶液和0.1%甲酸溶液为流动相梯度洗脱。结果克伦特罗在0.25-10.0ng·mL^-1与峰面积线性关系良好,定量下限为0.10 ng·mL^-1。结论本法灵敏准确、重现性与特异性强、干扰少,作为研究人血浆中克伦特罗浓度变化的检测方法很理想。

叶黄素对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的:探讨叶黄素(LU)预处理对酒精所致小鼠急性肝损伤的保护作用。方法:将48只小鼠随机分为4组:对照组、酒精组、20mg/kg及40mg/kg叶黄素预处理组。小鼠连续灌胃LU 8d,第4d给予LU l h后灌胃56度红星二锅头12ml/kg。连续灌胃酒精5d。在末次给药后24h采血,测定血清谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)。采血后处死动物,剖取肝脏,测定肝脏系数、肝匀浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时观察肝组织病理结构。结果:模型组小鼠血清ALT、AST活性明显高于对照组,肝组织匀浆中MDA含量显著增加,而GSH含量及SOD活性显著下降。给予叶黄素20mg/kg及40mg/kg均可降低肝损伤小鼠血清ALT、AST活性,而40mg/kg叶黄素还可降低肝组织匀浆MDA水平,提高GSH含量及SOD活性,并可改善酒精损伤大鼠肝病理组织结构。结论:叶黄素可通过抗氧化作用减轻酒精诱导的小鼠肝损伤。

叶黄素预处理对顺铂所致大鼠急性肾毒性的防治作用

目的探讨叶黄素(LU)预处理对顺铂(CP)所致大鼠急性肾损伤的保护作用及其机制。方法将40只SD大鼠随机分为5组,分别为对照组、CP组、各剂量LU(10、20和40 mg/kg)+CP组。大鼠连续灌胃LU 10 d,第7天灌胃后1 h腹腔注射CP(5 mg/kg)。CP处理后,在第5天采血,测定血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)。采血后处死动物,测定肾脏系数、肾皮质匀浆丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮(NO)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力,同时观察肾组织结构及超微结构变化。结果肾病模型组大鼠血清BUN、Cr含量均明显高于对照组,肾皮质组织匀浆中MDA及NO含量显著增加,而GSH含量及SOD活力显著下降。叶黄素可降低肾损伤大鼠血清BUN及Cr水平,降低肾组织匀浆MDA及NO水平,提高组织GSH含量及SOD活力,并可改善顺铂损伤大鼠肾病理组织及超微结构。随着叶黄素剂量增加,其保护作用增强。结论叶黄素可通过抗氧化作用减轻顺铂诱导的大鼠急性肾损伤。

K-CoxB-JN复方水提物对注射阿霉素小鼠心肌损伤的治疗作用

目的:观察抗柯萨奇B病毒性心肌炎胶囊(K-CoxB-JN)复方水提物对注射阿霉素致小鼠心肌的治疗作用。方法:以阿霉素3 mg.kg-1 ip,隔日1次,共7次致小鼠心肌损伤,造模同时开始ig K-CoxB-JN复方水提物高、中、低剂量(10,5,2.5g.kg-1)连续3周,并设模型组(生理盐水)和正常对照组。称量小鼠心脏指数,计算存活率,测定血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氧酶(LDH)活性,光镜下观察心室肌组织形态学变化。结果:K-CoxB-JN复方水提取物能减轻阿霉素致心肌损伤小鼠的心肌间质水肿、充血,减轻心肌的坏死程度,减少心肌细胞坏死范围。结论:K-CoxB-JN复方水提取物对阿霉素致心肌损伤小鼠有一定的治疗作用。

金、银纳米颗粒溶胶对三种瘦肉精分子拉曼表面信号增强效果及性质比较研究

采用柠檬酸钠还原法制备了银溶胶以及三种不同粒径大小的金溶胶作为拉曼表面增强剂,通过紫外-可见吸收光谱及透射电镜(TEM)比较其尺寸、粒度、分散性及稳定性,后选取盐酸氯丙那林、硫酸特布他林和盐酸班布特罗三种β受体激动剂类药物作为检测对象,观察拉曼信号增强效果。结果表明,金、银溶胶对β受体分子的表面增强拉曼信号增强信号基本上没有干扰。金溶胶的纳米粒子大小对于吸附能力有一定程度的影响,其颗粒大小更易于通过加入柠檬酸钠的方式进行调节,而银纳米溶胶颗粒粒径较不易控制。金溶胶能较长时间保持稳定,而银溶胶较易发生沉淀,但银纳米颗粒与目标分子结合后能产生更为强烈的共振现象,与金溶胶相比具有更强的表面增强活性,在拉曼信号增强目标分子时效果更好。