2008～2009年《中国健康心理学杂志》文献计量学分析

运用文献计量学的方法,对2008～2009年出版的《中国健康心理学杂志》载文、作者情况进行统计分析,揭示该刊的特点和发展规律,为其今后的发展提供参考。

BARF1基因真核表达载体PIRES2-EGFP/BARF1的构建及鉴定

提取B95-8细胞RNA,进行逆转录聚合酶链反应(Reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)扩增BARF1基因,将其克隆到pUM-T载体,转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆,提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切,电泳回收BARF1片段.同时用EcoRI和BamHI双酶切真核载体PIRES2-EGFP,电泳后回收载体PIRES2-EGFP并与BARF1片段连接;转化E.coliDH5α,筛选阳性克隆.提取质粒并用EcoRI和BamHI双酶切鉴定插入方向,并进行测序分析.转染胃上皮细胞GES-1后,观察细胞形态与行为变化.得到666 bp的BARF1基因片段.经双酶切鉴定,BARF1基因已正确连接到PIRES2-EGFP真核表达载体;测序结果与B95-8细胞株序列完全一致.BARF1基因转染GES-1细胞后,细胞由梭形圆化,黏着力减弱,重叠生长.结果表明成功地构建了携带EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)编码BARF1基因的真核表达载体.

质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫的细胞骨架蛋白

目的用质谱技术鉴定体外蓝氏贾第鞭毛虫滋养体的细胞骨架蛋白。方法用改良TYI-S-33培养基培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取虫体总蛋白,Bradford法测定蛋白质含量,样品经蛋白质2D-电泳后用硝酸银染色,扫描检测凝胶电泳图蛋白点的数量,获取蛋白质点匹配信息,然后挑选匹配性高的蛋白点,进行质谱(MALDI-TOF-MS)分析,鉴定其种类。结果虫体总蛋白质含量(4.8241±8)μg/ml。蛋白质二维电泳显示,蛋白点密集,约1 253个点,布满整块凝胶,蛋白表达量高,蛋白点颜色深且清晰、明亮。在胶图中随机选取80个匹配良好的蛋白点,经质谱分析,鉴别出5类46种蛋白质,其中细胞骨架蛋白6种(14个点),即α-贾第素、β-贾第素、γ-贾第素、δ-贾第素、中体素、鞭毛蛋白-1,代谢酶或相关蛋白18种(28个点),翻译转录蛋白5种(5个点),其他蛋白3种(3个点)、未知蛋白14种(14个点)。另有6个点未测出。结论质谱分析技术可用于体外蓝氏贾第鞭毛虫细胞骨架蛋白的鉴定。

肿瘤可溶性抗原和金葡菌超抗原构建肿瘤疫苗的基础研究及临床应用

目的探讨肿瘤疫苗在临床应用效果,分析有效成分,为进一步纯化肿瘤疫苗打下良好基础。方法提取肺部肿瘤临床标本的可溶性抗原,和金葡菌超抗原等共同构建肿瘤疫苗,对112例肺癌术后患者(治疗组56例,对照组56例),经3～10年随访,观察临床效果;分离提取肿瘤标本中的膜蛋白、DNA、RNA、HSP70以及多肽,分析其有效成分。结果治疗组患者5年生存率高于对照组,其差异有统计学意义(P<0.01);治疗组患者未见全身及局部明显毒副作用;该疫苗的主要有效成分是多肽,膜蛋白也具有免疫活性。结论用该方法构建的肿瘤疫苗用于肺癌术后患者可提高5年生存率,患者耐受性好;该疫苗的主要有效成分是多肽和膜抗原。