四氢生物蝶呤代谢紊乱导致一氧化氮合酶解耦联的分子机制

一氧化氮合酶(NOS)合成的一氧化氮(NO)是调节血管舒张功能的重要因子。四氢生物蝶呤(BH4)是NOS的重要辅助因子。BH4在体内的稳定性由从头合成、补救合成、氧化消耗及再循环所决定。当BH4/NOS的比例失调,可导致NOS催化L-精氨酸的作用解耦联,NOS催化产物由NO变为超氧阴离子(O2-)。O2-能与NO反应生成氧化性很强的氧亚硝基(ONOO-),ONOO-能迅速氧化BH4,加剧NOS的解耦联。NOS解耦联是高血压病、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病中内皮细胞功能障碍的重要原因,因而通过纠正NOS解耦联可有效改善内皮细胞功能,有望为保护血管内皮功能提供有效途径。

缺血再灌注损伤时微循环障碍的发生机制

局部组织器官可因血液灌注量减少发生缺血性损伤,尽早恢复血液再灌注有利于减轻缺血性损伤,但近年来发现,恢复血液再灌注后,某些情况下会进一步导致组织结构破坏和功能障碍,这种现象称为缺血再灌注损伤（Ischemia-Reperfusion Injury,IRI）,又称再灌注损伤（Reperfusion Injury,RI）[1]。IRI是创伤、扩血管药物治疗、

内皮型一氧化氮合酶对缺血再灌注组织微循环的影响

微循环（Microcirculation）是指微动脉与微静脉之间的微血管及其血液循环，是与组织、细胞进行物质、能量、信息交换的场所。正常情况下，微循环的血流量与组织器官的代谢水平相适应，保障各组织器官的血流量并调节回心血量。一旦微循环发生障碍，会直接影响各组织器官的生理功能。因此健全的微循环功能是保证人体组织器官实现正常功能的首要前提。然而，当机体病变时，

线粒体分裂对胰岛β细胞功能的影响

目的探讨线粒体分裂对胰岛B细胞功能的影响。方法通过可诱导表达野生型动力相关蛋白1（Drp-1WT）基因和突变型Drp-1（Drp-1K38A）基因的大鼠INS-1β细胞，分析不同葡萄糖条件下，线粒体分裂对胰岛β细胞功能的影响。结果在高糖条件下，强力霉素诱导后的Drp-1WT细胞线粒体分裂过程增强，网络状结构部分断裂，多呈点状结构，细胞胰岛素分泌功能降低（P〈0．01），线粒体膜电位降低（P〈0．05），细胞内ATP含量减少（P〈0．05），细胞色素C表达增加，而在Drp-1K38A细胞中，上述变化明显减轻。结论线粒体分裂增强可抑制胰岛β细胞功能。

胰高血糖素样肽-1保护内质网应激诱导的胰岛β细胞凋亡

目的探讨胰高血糖素样肽-1（GLP-1）对毒胡萝卜素（TG）诱导的胰岛13细胞凋亡的保护作用及可能机制。方法体外培养大鼠胰岛β细胞系-19细胞，采用TG诱导内质网应激，并比较存在GLP-1和GLP-1受体激动剂exendin-4的条件下胰岛B细胞凋亡情况。实验分为正常对照组、TG组（100nmol／L）、GLP-1（10nmol／L）＋TG（100nmol／L）组和exendin-4（100nmol／L）＋TG（100nmol／L）组，通过DNA片段化、原位转移酶缺口末端标记法（TUNEL）染色、AnnexinV—PI（膜连蛋白V／碘化丙啶）双染流式细胞仪检测4组细胞凋亡率的差异。采用Westernblot检测细胞色素c的释放。通过荧光探针DCFH—DA检测细胞活性氧簇（ROS）水平。罗丹明-R110（Z—DEVD—R110）染色检测细胞Caspase-3活性。2组间均数比较采用t检验，4组间比较采用单因素方差分析。结果DNA片段化检测和TUNEL染色实验均显示后两组细胞凋亡较TG组明显减少（F=2．16；t值分别为6．13和6．73，均P〈0．01）。AnnexinV—PI双染流式细胞仪检测显示TG组细胞的凋亡率为26％，在GLP-1和exendin-4存在的条件下，TG诱导的细胞凋亡明显减至19．7％和19．2％。进-步实验表明GLP-1和exendin-4能降低内质网应激过程中细胞色素c释放、活性氧簇ROS的产生和Caspase-3活性。细胞浆蛋白的Westernblot检测结果显示，给予GLP-1和exendin-4能降低内质网应激过程中细胞色素c释放（F=0．875；t值为5．37和7．26，P〈0．01）。细胞浆中凋亡蛋白酶Caspase-3的检测结果显示，GLP-1和exendin-4能抑制Caspase-3的激活和释放（F=0．838，t值为3．46和4．52，P〈0．01）。细胞线粒体活性氧的释放检测结果显示，正常情况下，细胞浆中可检测到-定量的活性氧，给予TG后释放的活性氧明显增多（61．67±7．64，t=22．13，P〈0．01），给予GLP-1和exendin-4能减少活性氧的释放（32．3±3．21，t值分别为12．41和15．28，P〈0．01）。结论GLP-1对TG诱导的B细胞凋亡具有保护作用，其机制可能通过与内质网应激导致的细胞色素c释放、Caspase-3的激活和ROS的产生有关。