解剖学实验考试方法改革与智能化题库的应用

解剖学实验考试是促进解剖实验教学,提高教学质量的重要手段。目前,国内解剖实验考试主要有以下两种:传统实验考试和多媒体实验考试,其中多媒体实验考试又可分为Powerpoint数字化标本考试方法和基于Authorware的智能化标本考试方法。该文对这3种考试方法进行介绍和评析,阐明了基于Authorware的智能化标本考试方法具有许多优势。

解剖学双语交互式Authorware自学课件的效果实现

解剖学是重要的医学基础课程,其双语教学的开展对于提高学生的专业英语应用能力具有重要意义。利用Authorware热区域产生交互式图谱效果和结构轮廓闪烁效果、利用热物体产生不规则结构的交互效果,实现解剖学双语Authorware自学课件的多种交互,激发学生双语学习的兴趣。

人体解剖学双语学习方法探究

解剖学双语学习对于医学生提高专业英语的应用能力有重要意义,通过口诀记忆法、英文字头联想记忆法、比喻记忆法、解剖学英文词干记忆法、流程记忆法等多种方法的运用,有助于双语学习效果的提高。

甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠多巴胺能神经元的影响

目的观察甘草黄酮对MPTP帕金森病(PD)小鼠多巴胺(DA)能神经元的影响。方法制作MPTP小鼠PD模型,随机分为3组:模型组(每日一次腹腔注射给予25 mg/kg MPTP,连续5次)、空白组(每日一次腹腔注射给予等量生理盐水)和甘草黄酮处理组(除给予MPTP外,每日一次灌胃给予30 mg/kg甘草黄酮,连续7次)。采用行为学观察、免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察模型小鼠的行为学表现、DA能神经元数量和腹侧中脑酪氨酸羟化酶(TH)蛋白表达水平。并观察甘草黄酮处理后对上述指标的影响。结果模型组小鼠出现PD典型行为学表现,黑质致密部DA能神经元数量(56.2±3.5 vs152.4±8.6)和腹侧中脑TH含量(3.1±0.5 vs 14.7±0.9)较对照组显著下降(P<0.01)。甘草黄酮处理组小鼠行为表现较轻。与模型组相比,黑质致密部DA能神经元的丢失和腹侧中脑TH含量下降均明显改善(P<0.01)。结论甘草黄酮对MPTP帕金森病小鼠DA能神经元具有神经保护效应。

孕酮在脑缺血大鼠TNF-α和IL-6引起脑损伤中的作用

目的观察孕酮在炎症因子TNF-α和IL-6引起新生鼠缺氧缺血性脑损伤中的作用,进一步探讨孕酮神经保护作用的分子机制。方法 96只7日龄新生Wistar大鼠随机分成4组,正常对照组、假手术组、缺氧缺血组、药物预防组。缺氧缺血组和药物预防组动物先行左侧颈总动脉结扎术,然后将动物置于37℃恒温的密闭容器中,以1.5L/min的速度吸入80ml/L氧气和920ml/L氮气混合气体2.5h建立缺氧缺血脑病动物模型。药物预防组动物于建立模型前30min按8mg/kg腹腔注射0.5g/L孕酮溶液。采用ELISA法检测脑组织中TNF-α和IL-6含量的变化,RT-PCR检测TNF-α和IL-6 mRNA的表达。结果缺氧缺血组脑组织中炎症因子TNF-α和IL-6含量在缺氧缺血后6h、24h、48h、72h明显高于对照组和假手术组大鼠(P<0.05),且在缺氧后24h升到最高点,以后逐渐下降,至7d两者差异不显著,药物预防组在缺氧缺血后各时间点均低于缺氧缺血组(P<0.05)。且缺氧24h后缺氧缺血组脑组织TNF-α、IL-6 mRNA的表达明显高于正常对照组和假手术组,药物预防组mRNA的表达明显低于缺氧缺血组(P<0.05)。结论孕酮可以保护新生鼠缺氧缺血后引起的脑损伤,其作用机制与抑制炎症因子TNF-α和IL-6 mRNA的表达以及抑制TNF-α和IL-6的生成有关。

罗格列酮对实验性大鼠脑出血后细胞凋亡的影响

目的:探讨罗格列酮对大鼠脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后血肿周围脑组织细胞凋亡的影响。方法:88只健康老龄雄性SD大鼠,随机分为假手术组8只,模型组40只,罗格列酮干预组40只,后2组又分为6 h、12 h、24 h、72 h、7 d 5个亚组,每组8只。采用大鼠股动脉新鲜自体不凝血50μl注入大脑纹状体基底节区复制脑出血模型,干湿重法检测脑组织含水量(water content of brain,BWC);原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠脑细胞的凋亡情况;免疫组化法检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)和半胱氨酸蛋白-3(Caspase-3)的表达情况。结果:(1)随着大鼠脑出血后时间的延长,ICH组BWC呈逐渐增高趋势,并在72 h达高峰。与模型组比较,罗格列酮干预组BWC均降低,组织水肿减轻(P<0.05)。TUNEL染色结果显示凋亡细胞的数量与各位BWC的复化相一致。(2)免疫组化法检测结果显示:大鼠脑出血后72 h,Caspase-3凋亡相关蛋白的表达明显上调。罗格列酮干预后,与模型组相比,PPARγ高表达,同时Caspase-3表达和凋亡细胞数明显降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:PPARγ激动剂罗格列酮可能通过抑制Caspase-3的表达,降低脑出血后脑组织的继发性凋亡损伤,对脑组织起保护作用。

c-Jun氨基端激酶对亚急性帕金森病小鼠黑质神经元凋亡的影响

目的探讨c-Jun氨基端激酶(JNK)对帕金森病(PD)模型黑质多巴胺(DA)能神经元凋亡的影响。方法采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,通过免疫组织化学和免疫蛋白印迹法,观察各组小鼠黑质区磷酸化p-c-Jun免疫阳性反应和蛋白表达水平的变化;观察给予JNK特异性抑制剂SP600125对上述变化的影响。结果与对照组相比,模型组小鼠黑质神经元p-c-Jun表达水平明显升高,TUNEL阳性细胞数量增加;JNK抑制剂组p-c-Jun表达水平明显下降,TUNEL阳性细胞数量显著减少。结论 JNK可能参与模型小鼠黑质DA能神经元凋亡过程;JNK抑制剂SP600125可在一定程度上阻抑黑质区JNK信号通路,减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质DA能神经元凋亡。

肢体缺血再灌注对脑组织细胞色素C的影响及缺血预适应的保护作用

目的探讨缺血预适应(PC)对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后脑组织细胞色素C(CytC)的影响及其可能机理。方法雄性Wistar大鼠48只,随机分成3组:对照组(control)、模型组(LIR)和缺血预适应组(IPC),每组16只,分别复制大鼠LIR模型,测定脑组织丙二醛(MDA)和胞浆细胞色素C含量,检测线粒体Ca2+、细胞色素C含量,采用尼氏染色观察脑组织病理学改变和Western印迹法检测细胞色素C的表达变化。结果大鼠LIR后,脑组织海马区、中脑红核区神经元细胞受损,模型组胞浆CytC表达明显上调,线粒体CytC表达下降,而线粒体Ca2+含量显著增加。缺血预处理后脑组织胞浆CytC、线粒体Ca2+与模型组相比含量降低,差异显著(P<0.05),而线粒体CytC表达上升,并抑制脂质过氧化的发生。结论缺血预处理可减少LIR中脑组织线粒体释放CytC,维持线粒体Ca2+稳态,对脑组织有保护作用。

拟载脂蛋白E-141012肽对脑血管痉挛小鼠代谢型谷氨酸受体/细胞外信号调节激酶途径的调节作用

目的探讨脑血管痉挛(CVS)后细胞外信号调节激酶(ERK)途径的作用机制,及重组载脂蛋白E(apoE)拟肽对脑血管痉挛损伤的保护作用。方法采用非开颅血管内线栓法制备小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)并脑血管痉挛模型。将134只健康雄性ICR小鼠随机分为4组:假手术组、模型对照组、拮抗剂组,apoE治疗组。ApoE治疗组将拟apoE-1410以无菌磷酸盐缓冲液溶解后,经尾静脉注射0.6mg/kg,术前30min开始第1次,每12h1次。拮抗剂组于SAH后10 min侧脑室注射生理盐水或LY367385(500nmol/L)5μl,术后行神经功能评分。分别在SAH后6、24、48h 3个时相点取脑组织标本,在光镜和电镜下观察脑组织病理变化,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测各组代谢型谷氨酸受体1(mG1uR1)mRNA的表达变化;免疫印迹法(Western blotting)检测mGluR1、磷酸化细胞外信号调节激酶(ERK1/2)蛋白的表达;用原位缺口末端标记法(TUNEL)检测神经细胞凋亡情况。结果与假手术组比较,模型对照组小鼠神经功能评分显著降低,随脑血管痉挛时间延长,各组小鼠mGluR1 mRNA、mGluR1和磷酸化ERK1/2蛋白均有不同程度增加,凋亡细胞增多,神经细胞出现变性坏死、细胞器数量减少。与模型对照组比较,拮抗剂组和apoE治疗组小鼠神经功能评分增加,mGluR1 mRNA、mGluR1、磷酸化ERK1/2蛋白表达均有不同程度下调,神经细胞凋亡数目减少,应用apoE1410拟肽减轻了脑组织形态学和超微结构损伤。结论脑血管痉挛后mGluR1的表达增强可通过激活ERK信号途径诱导神经细胞凋亡,apoE拟肽对脑血管痉挛损伤具有抗损坏作用。

p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂对急性重症胰腺炎大鼠神经元的保护作用

目的研究p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580对急性重症胰腺炎(SAP)大鼠神经元的保护作用。方法 45只健康雄性大鼠随机分为对照组、模型组和抑制剂组,每组15只。模型组大鼠给予质量分数5%牛磺胆酸钠2 mg·kg^(-1),经胰胆管注入胰腺腺体内;抑制剂组大鼠在建模后立即给予腹腔注射SB203580 10 mg·kg^(-1),对照组大鼠开腹后给予等量生理盐水经胰胆管注入胰腺腺体内。术后24 h采用免疫组织化学染色和免疫印迹法观察大鼠大脑皮层神经元中磷酸化p38(p-p38)和caspase-3的表达。结果模型组大鼠大脑皮层区p-p38、caspase-3阳性神经元数(21.6±2.5、33.1±3.8)较对照组(1.1±0.6、2.0±0.5)显著增加(P<0.05);抑制剂组大鼠大脑皮层区pp38、caspase-3阳性神经元数(15.3±1.3、16.6±1.4)较模型组显著减少(P<0.05)。结论 p38丝裂原活化蛋白激酶抑制剂SB203580通过抑制p38信号通路下调caspase-3表达,从而对SAP大鼠神经元起到保护作用。

急性重症胰腺炎大鼠P38丝裂原活化蛋白激酶通路对海马神经元环氧化酶-2和前列腺素E2表达的调控

目的:研究在急性重症胰腺炎(SAP)大鼠模型中,P38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)通路对于海马CA1区神经元环氧化酶-2(COX-2)和前列腺素E2(PGE2)表达的影响.方法:随机将SD大鼠分为SAP模型组、SB203580抑制剂组和对照组.采用Nissl染色、免疫组织化学显色、免疫印迹,观察每组大鼠海马CA1区p-P38、COX-2以及PGE2的表达变化和SB203580对上述指标变化的影响.结果:SAP模型组海马CA1区p-P38、COX-2、PGE2阳性神经元的数量较对照组显著增加;SB203580抑制剂组与SAP模型组比较,海马CA1区p-P38、COX-2、PGE2阳性神经元的数量明显减少.结论:P38MAPK通路对SAP大鼠模型海马COX-2和PGE2表达可能有重要调控作用,SB203580对SAP大鼠海马神经元具有保护作用.

脑出血模型制作方法研究进展

脑出血（intracerebral hemorrhage，ICH）是危害人类健康的常见病，多发病。具有发病急，病情重，变化快，病死率及致残率高等特点，其病死率占脑血管疾病的首位。因此，建立一个稳定可控的脑出血动物模型将有助于深入研究人类脑出血发病机制及有效的防治药物。目前制作脑出血模型的方法先后有自发性脑出血模型、植入填充物模拟脑出血模型、胶原酶诱导脑出血模型及自体血注入脑出血模型。由于自体血注射法具有操作简单、定位准确、出血量可控等优点，因此被广泛采用。近来，有关以自体血注入建立脑出血模型获得了更多的改进方法，有可能作为脑出血模型建立的新证据，这也是本文关注的重点。

尼莫地平对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺神经元的保护作用

目的:研究尼莫地平在1-甲基-4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)所致帕金森病(PD)模型小鼠中对黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法:雄性健康C57BL/6N小鼠随机分为对照组,腹腔注射生理盐水;模型组,腹腔注射MPTP(25 mg/kg);尼莫地平治疗组,每次注射MPTP前3 h灌胃给予尼莫地平(15 mg/kg)。观察各组小鼠行为学变化,免疫组织化学和免疫蛋白印迹法观察中脑黑质酪氨酸羟化酶(TH)、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化。结果:与对照组小鼠比较,MPTP模型组小鼠出现典型的PD症状,中脑黑质TH阳性神经元大量丢失,PGE2和TNF-α阳性细胞显著增多,蛋白水平明显升高;经尼莫地平治疗后,上述症状得到明显改善。结论:在MPTP所致PD小鼠模型中,尼莫地平通过抑制炎症因子PGE2和TNF-α的表达从而对多巴胺能神经元具有一定的保护作用。

脑血管痉挛小鼠脑动脉细胞外信号调节激酶及caspase-8表达的变化

目的：研究细胞外信号调节激酶（ERK）、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-8（caspase-8）在脑血管痉挛（CVS）后早期脑损伤中的作用，并探讨ERK特异性抑制剂U0126通过此途径发挥作用的保护机制。方法：采用非开颅血管内穿线法制备小鼠蛛网膜下腔出血（SAH）并脑血管痉挛模型，给予U0126，术后行神经功能评分，分别在术后12、24、48h3个时相点取右侧大脑动脉标本，应用免疫印迹检测各组磷酸化ERKl／2（p-ERKl／2）、caspase-8蛋白表达，TUNEL法检测大脑中动脉内皮细胞凋亡。结果：模型组小鼠神经功能评分降低，大脑中动脉出现严重脑血管痉挛，随脑血管痉挛时间延长，各组小鼠p-ERKl／2、caspase-8蛋白均有不同程度增强，凋亡细胞增多。与模型组比较，治疗组小鼠神经功能评分增加，各时相点3项指标的表达均不同程度下调。脑血管痉挛12-48hp-ERKl／2与caspase-8呈正相关。结论：脑血管痉挛后，ERK表达增强可通过激活caspase-8信号途径诱导大脑动脉内皮细胞凋亡；U0126对脑血管痉挛具有一定的治疗作用，其机制之一可能是通过部分阻抑ERK通路活化，减少凋亡实现的。

p38信号通路对急性重症胰腺炎大鼠大脑皮层COX-2表达的影响

目的观察p38信号通路对急性重症胰腺炎(SAP)大鼠大脑皮层环氧合酶2(COX-2)表达的影响。方法将45只大鼠随机分为模型组、抑制剂组、假手术组各15只。抑制剂组、模型组分别将5%牛磺胆酸钠经胰胆管逆行注入胰腺制备SAP大鼠模型,造模后5 min于大鼠尾静脉分别注射p38信号通路抑制剂SB203580及等量生理盐水;假手术组开腹后翻动胰腺数次立即缝合腹壁,尾静脉注射等量生理盐水。各组于造模后24 h断头取脑,采用Western blot法检测大脑皮层COX-2和磷酸化p38(p-p38),计算其平均光密度(IOD)值。结果抑制剂组pp38、COX-2蛋白表达的IOD值分别为7.5±0.9、7.5±1.1,模型组分别为18.3±1.3、13.3±3.0,假手术组分别为2.1±0.3、5.3±1.0;三组间两两比较,P均<0.05。相关分析显示,p-p38与COX-2蛋白表达呈正相关(r=0.661,P<0.05)。结论 p38信号通路具有调控SAP大鼠皮层COX-2表达的作用,抑制该通路可下调COX-2表达。

抑制P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路对急性重症胰腺炎大鼠大脑皮层诱导型一氧化氮合酶表达的影响

目的观察P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制剂SB203580对急性重症胰腺炎(SAP)大鼠大脑皮层诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达的影响。方法将45只SD大鼠按随机数字法分3组。模型组:将5%牛磺胆酸钠经胰胆管逆行注入胰腺制备;抑制剂组:造模后于大鼠尾静脉注射SB203580;对照组开腹后翻动胰腺数次立即缝合腹壁,尾静脉注射0.9%氯化钠注射液。造模成功后24h,检测血清淀粉酶;应用免疫组织化学、蛋白印迹法观察及检测各组神经元中iNOS和磷酸化P38表达的变化,并进行图像分析和统计学处理。结果模型组大鼠p-P38、iNOS阳性神经元显著增加及蛋白水平升高;给予注射SB203580后,抑制剂组较模型组均明显减轻(P<0.05)。结论 P38丝裂原活化蛋白激酶信号通路抑制剂SB203580具有调控SAP大鼠大脑皮层iNOS蛋白表达的作用,减轻神经元的变性丢失。

依达拉奉可经核因子相关因子2/抗氧化反应元件通路对帕金森病小鼠多巴胺能神经元起保护作用

目的：探讨导致多巴胺（DA）能神经元变性失活的可能机制,以及依达拉奉对核因子相关因子-2/抗氧化反应元件（Nrf2/ARE）通路的影响和对DA能神经元的保护作用.方法：采用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）制备帕金森病（PD）小鼠模型,将小鼠随机分为MPTP组、依达拉奉组和对照组.对各组动物进行行为学观察,采用免疫组织化学、免疫荧光和免疫印迹,观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶（TH）、Nrf2、醌氧化还原酶1（NQO1）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的变化;并观察给予依达拉奉对上述变化的影响.结果：与对照组小鼠相比,模型组小鼠出现典型PD症状.在MPTP最后一次注射后48 h黑质区TH明显减少,Nrf2、NQO1和GFAP阳性细胞明显增加,在MPTP注射后1周,黑质区TH阳性神经元丢失约75％,经依达拉奉处理后,小鼠PD症状减轻,与模型组比较,依达拉奉组在MPTP最后一次注射后48 h,黑质区Nrf2、NQO1和GFAP阳性细胞进一步增加,在MPTP注射后7d,TH阳性细胞数较对照组仅下降40％.结论：Nrf2/ARE通路在急性PD模型DA能神经元内可被激活,可能通过上调NQO1的表达对黑质DA能神经元起到保护作用;依达拉奉可活化Nrf2/ARE通路对小鼠DA能神经元起到一定保护作用.

大鼠脑出血后血肿周围脑水肿及其与NF-κB和IL-6表达的关系

目的探讨大鼠脑出血(ICH)后核因子-κB(NF-κB)和白介素-6(IL-6)动态表达情况与血肿周围脑水肿的相互关系。方法 120只SD大鼠随机分为1个假手术组和5个ICH模型组,每组20只。采用右侧脑纹状体内注射新鲜自体不凝血建立大鼠脑出血模型。干/湿重法测定脑组织含水量(BWC),尼氏染色显微镜下观察脑组织病理学变化,免疫荧光检测NF-κB和IL-6蛋白的表达部位,免疫组织化学方法检测NF-κB和IL-6蛋白的表达变化。结果 ICH模型组神经细胞内尼氏体丢失明显,脑组织血肿周围NF-κB和IL-6在脑出血后6 h开始表达,随时间延长蛋白表达增加,3 d达到高峰。各ICH模型组与假手术组之间有统计学差异(P<0.05);脑出血后NF-κB、IL-6表达量与脑水肿周围含水量呈正相关(P<0.05)。结论脑出血后NF-κB高表达,说明活化的NF-κB可进一步诱导细胞因子IL-6表达,加重炎症反应,参与出血性脑水肿的病理过程。

孕酮对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织损伤因子和抗损伤因子表达的影响

目的观察孕酮对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠皮层和海马组织中损伤因子TNF-α、IL-1β和抗损伤因子神经生长因子（NGF）、脑源性神经营养因子（BDNF）表达的影响，探讨孕酮神经保护作用的分子机制。方法将48只7日龄新生Wistar大鼠随机分成3组：假手术组、缺氧缺血组、药物预防组。缺氧缺血组和药物预防组新生大鼠先行左侧颈总动脉结扎术，然后置于37℃恒温的密闭容器中，以1．5L／min的速度吸人80mL／L氧气和920mL／L氮气混合气体2．5h建立HIBD动物模型。假手术组仅分离左侧颈总动脉，不结扎，亦不做缺氧处理。药物预防组新生大鼠于建立模型前30min按8mg／kg腹腔注射0．5g／L孕酮溶液，假手术组和缺氧缺血组注射等量的9g／L盐水溶液，24h后处死全部新生大鼠，取左侧脑组织，采用ELISA法检测脑组织TNF-α、IL-1β、NGF和BDNF水平，反转录聚合酶链式反应（RT-PCR）检测TNF-α、IL-1β和BDNFmRNA的表达。结果缺氧缺血组新生大鼠皮层和海马组织中TNF-α、IL-1β、NGF、BDNF水平及其mRNA的表达明显高于假手术组；药物预防组TNF-α、IL-1β水平及其mRNA的表达明显低于缺氧缺血组，而NGF、BDNF水平和mRNA的表达则明显高于缺氧缺血组（P均〈0．05）。结论孕酮可以保护新生大鼠缺氧缺血后引起的皮层和海马损伤，其作用机制与抑制损伤因子的表达和促进抗损伤因子的表达有关。