含硅羟基磷灰石调节巨噬细胞极性促进成骨分化机制研究

目的探讨无机骨再生修复材料含硅羟基磷灰石(si-HA)通过调节巨噬细胞极性转换促进小鼠前成骨细胞MC3T3-E1(3T3)的增殖及成骨分化的作用机制。方法制备羟基磷灰石(HA)和si-HA纳米粒子,以10 mg/L的剂量刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞(RAW,分别为HA组和si-HA组),另设Control组(10%FBS的DMEM培养基)。分析RAW细胞的极化状态及炎性因子的表达水平。收集完全培养基、HA和si-HA纳米粒子刺激RAW细胞3 d后获得的上清液,制备RAW条件培养基、HA+RAW条件培养基和si-HA+RAW条件培养基,并培养小鼠3T3前成骨细胞(分别为RAW组、HA+RAW组和si-HA+RAW组),并设空白对照组(完全培养基),检测各组细胞增殖和成骨相关基因[M1极化标志物诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、M2极化标志物Arginase基因及促炎、抗炎因子肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、IL-10和IL-1ra]的表达水平。结果si-HA组巨噬细胞iNOS、TNF-α、IL-1βmRNA表达水平低于Control组和HA组,Arginase、IL-10和IL-1ra mRNA表达水平高于Control组和HA组(P<0.05);IL-6 mRNA表达水平低于HA组(P<0.05),与Control组差异无统计学意义。si-HA+RAW组3T3细胞增殖能力、碱性磷酸酶(ALP)活性及矿化结节形成明显强于空白对照组、RAW组和HA+RAW组(P<0.05)。培养14 d时,si-HA+RAW组3T3细胞ALP、OCN、OPN、Col-1、Runx2 mRNA表达水平均高于其他3组(P<0.05)。结论si-HA纳米粒子可诱导巨噬细胞产生较有利的骨免疫微环境,增强3T3细胞的增殖和成骨分化。

术后静脉残端中肿瘤细胞残留的观察

我们制作兔胃肿瘤模型并观察肿瘤切除部位及周边组织中残端静脉的病理改变，现报道如下。一、材料与方法1．肿瘤模型制备：将胃癌肿瘤细胞悬液（取自邢台医学高等专科学校第二附属医院病理科，病理号20130836）注入荷兰兔（购自河北医科大学实验动物中心）胃黏膜下，饲养1个月后，剖腹探查有肿瘤生成定义为制模成功。