肺纤维化前期肺组织中ICAM-1、TGF-β、CTGF的表达及其镜下形态改变的动态观察

目的动态观察博莱霉素诱发大鼠肺纤维化模型从肺损伤到肺纤维化前期肺组织中细胞间黏附分子-1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)水平的变化,探讨肺纤维化前期的发病机制。方法雌性SD大鼠108只,随机分为肺纤维化模型组、内毒素组、空白对照组(每组36只),并于干预后第3、7、14天取各组肺组织进行免疫组化SABC法观察。结果造模后各组TGF-β、ICAM-1、CTGF的表达依次为空白对照组<内毒素组<肺纤维化模型组。肺纤维化模型组显著高于空白对照组及内毒素组(P<0.05)。光镜下观察空白对照组中肺组织结构正常;肺纤维化模型组第7天未见明显肺纤维化改变,第14天VG染色可见少量胶原纤维形成;内毒素组第7天有轻度肺泡炎,第14天肺泡炎消失。结论肺纤维化前期纤维化的发生与TGF-β、ICAM-1、CTGF三种细胞因子均有密切关系,三者可能起协同作用。

透射电镜负染色技术常见影响因素与对策

负染色技术又称阴性反差染色，简称负染。它是由HaLL和Huxley首先采用的一种应用于生物大分子研究的染色技术。与传统染色不同的是，样品进行负染色时，由于其与染液之间不发生反应，故样品本身并不着色。

超薄切片染色方法的改进及体会

在透射电子显微镜（transmission electron microscopy,TEM）（简称电镜）检查中,为确保检查的效率及拍片质量,所提供的超薄切片除应具备厚薄适中、平整、无刀痕和颤痕特征外,还需干净、结构反差效果好。由于生物样品本身结构的反差低,需经过重金属染色才能在电镜下显示清晰的超微结构。利用重金属离子对不同细胞结构的结合能力不同,使细胞内各结构对电子产生不同的散射能力,显示在荧光屏上,产生不同的反差[1]。以往实验均采用铀-铅双染法进行染色,由于该染色方法影响因素较多,结果常不稳定,

常用生物材料超薄切片的制备体会

随着科技的发展,电子显微镜技术已在生物科技、病理诊断等方面得到普遍应用。但对于整个电镜技术流程而言,超薄切片技术不仅是技术的难点,更是反映结果的关键步骤。为得到一张优质切片,越来越多的电镜工作者喜欢采用钻石刀切片,但因钻石刀价格昂贵且刀刃极易受损,操作者应注意钻石刀的维护与保养,以延长其使用期。为使初学者对生物超薄切片技术有更全面的认识,现将常用生物材料进行超薄切片制备的方法及注意事项汇总如下。

扫描电镜喷镀技术在透射电镜样本反差中的应用

透射电子显微镜是生物医学、化学、农林和材料学等领域进行科学研究的重要工具。透射电子显微镜技术中，要获得理想的实验结果，不仅要有高分辨率、高放大倍数的电子显微镜，还需要超微结构保存良好、厚度合适、反差适中的样品。没有适当的反差，就无法辨认生物组织的微细结构。如何在制样与观察时增加反差是一个值得重视的问题。本实验将扫描电镜“喷镀”技术应用于增加透射电镜样本反差，方法简便，反差效果好。目前国内尚未有使用扫描电镜“真空喷镀法”对透射电镜生物组织样本进行处理以增加反差的报道。

线粒体DNA与肿瘤研究进展

近年来研究发现线粒体脱氧核糖核酸（mtDNA）与肿瘤的发生有密切关系。但是过去的研究主要集中在肿瘤细胞线粒体的形态和能量代谢改变等方面,在人类mtDNA全序列测定以后,mtDNA突变与肿瘤相关性的研究越来越多。1mtDNA的结构及功能线粒体有自己的遗传系统和自己的蛋白质翻译系统,与细胞核的遗传系统构成了一个整体。

电镜半薄切片技术的几点改进

为了探讨半薄切片技术的改进方法,和常规的半薄切片技术相比,该文实验在染液、染色时间、防脱片和捞片工具方面进行了改进。使用改进后的半薄切片技术,得到的组织细胞结构完整,染色清晰,层次分明。实践表明,改进技术更适用于透射电子显微镜超薄切片的准确定位,是一种简便易行、效果良好的方法。

抗痨颗粒对耐多药结核分枝杆菌蛋白质组学的影响

目的:应用蛋白质组学的双向电泳技术,比较分析抗痨颗粒提取物作用前后耐多药结核分枝杆菌的全菌蛋白表达差异,揭示药物作用机制。方法:临床耐多药结核分枝杆菌接种在7H9添加OADC液体培养基中37℃培养6～8 d,细菌密度为1×108/mL～2×108/mL。抗痨颗粒浸提物的最低抑菌浓度(MIC)为0.638 8 g·L-1。加到液体培养基中,作用20 h,终浓度为相当于生药0.255 6 g·mL-1。局部内环境与外部环境完全隔离下,采用双向凝胶电泳分离全菌总蛋白,得到差异表达的蛋白质点进行分析比对。结果:耐多药结核分枝杆菌用药前后,发现了8个差异斑点,确定其中2个蛋白质为:硫代硫酸硫转移酶(thiosulfate sulfurtransferase)和假定蛋白Rv0634A。结论:揭示了抗痨颗粒对耐多药结核分枝杆菌的翻译,结构组成,氨基酸代谢,氰化物和H2S的解毒以及硫和铁转移等各方面均有一定影响,从而破坏结核分枝杆菌的生活能力,从而达到抑制结核分枝杆菌的目的。

淋巴结核丸对炎症、迟发型变态反应的影响

目的:观察淋巴结核丸对炎症和迟发型变态反应的影响。方法:观察淋巴结核丸高、中、低(含生药40,20,10 g.kg-1)剂量ig 1次对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响;观察淋巴结核丸同样剂量连续ig 7 d对大鼠棉球肉芽肿质量的影响;观察淋巴结核丸连续ig 5 d,对绵羊红细胞致敏大鼠迟发型变态反应(DTH)的影响。结果:淋巴结核丸高、中剂量对二甲苯致炎小鼠有明显的抗炎作用(高、中剂量组对耳廓肿胀的抑制率分别为18.5%,9.6%),与模型对照组相比差异显著(P<0.01);淋巴结核丸具有明显的抑制肉芽肿增生的作用,高、中、低剂量抑制率分别为44.73%,26.53%,9.30%,与模型对照组相比有显著差异(P<0.01);淋巴结核丸3个剂量均能明显增强DTH反应,与模型对照组相比均有非常显著性差异(P<0.01),具有明显的增加小鼠细胞免疫的作用。结论:淋巴结核丸具有明显的抗炎作用,可增强细胞免疫功能。