乙型肝炎患者血清中HBV cccDNA与HBV DNA、HBsAg和HBeAg定量关系的分析

目的定量检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)、HBV DNA、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg)并分析其相互关系,探讨定量检测血清中HBV cccDNA的临床应用价值。方法随机选取HBV感染者83例,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清中HBVcccDNA及HBV DNA,同时采用化学发光法定量检测血清中HBsAg和HBeAg。结果 83例患者中HBV DNA阳性62例,其中HBV DNA载量≥105拷贝/mL者40例,血清HBV cccDNA阳性28例(70.00%);HBV DNA载量<105拷贝/mL者22例,血清HBV cccDNA阳性2例(9.09%),不同DNA载量组HBV cccDNA差异有统计学意义(P<0.01)。HBeAg阳性组和阴性组HBV cccDNA阳性率分别为70.00%(28/40)和4.65%(2/43),两组差异有统计学意义(P<0.01)。HBV cccDNA定量值与HBV DNA、HBsAg呈正相关(P<0.01)。结论血清中HBV cccDNA水平可同时反应血清HBV DNA和HBsAg水平,血清HBV cccDNA含量可作为观察HBV复制情况和评价抗病毒疗效的相关血清指标。

类风湿关节炎患者外周血CD4^+T细胞亚群的分析

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者不同时期外周血Treg和Th1、Th2、Th17细胞以及中性粒细胞上CD64的表达水平,及它们与RA的活动性指标和自身抗体的相关性。方法采集78例RA患者和21例健康人外周静脉血,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群(Treg,Th1、Th2、Th17细胞)的变化。结果 RA的CD3+CD4+T细胞和CD4+CD25+T细胞增多,活动期RA组Treg比率高于缓解期RA组和健康对照组,缓解期RA组Th2细胞减少,RA中Th1,Th17细胞与健康对照组相比无统计学意义,Treg和Th1、Th2、Th17细胞与RA的活动性指标(ESR,CRP和PLT)均无关联。结论 CD4+T细胞亚群数量异常可能与RA疾病发展有关。

HIV/AIDS患者免疫激活相关分子的表达及其对疾病进程的影响

目的探讨HIV/AIDS患者外周血免疫激活相关分子的表达特征,分析其与艾滋病疾病进程的相关性。方法采用流式细胞仪检测80例HIV/AIDS患者和20例健康人外周血T淋巴细胞亚群及CD8+T淋巴细胞表面CD38、HLA-DR、Ki67分子的表达水平,比较健康人群与HIV/AIDS患者以及HIV/AIDS患者不同CD4+T分组间CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+、Ki67+/CD8+的差异,分析CD8+T淋巴细胞CD38、HLA-DR、Ki67分子表达与CD4+T淋巴细胞及病毒载量之间的相关性。结果与健康人群相比,HIV/AIDS患者CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+、Ki67+/CD8+明显升高(P<0.05);HIV/AIDS患者不同CD4+T分组间比较显示,随着CD4+T水平的降低,CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+、Ki67+/CD8+逐渐升高,且艾滋病患者(CD4<200 cells/ml)明显低于慢性进展者(CD4≥200 cells/ml);CD38+/CD8+、HLA-DR+/CD8+、Ki67+/CD8+与血浆病毒载量均呈明显正相关。结论HIV感染能明显提高外周血CD38、HLA-DR和Ki67等分子的表达水平,且随着艾滋病疾病的进展,CD38、HLA-DR和Ki67的表达逐步升高,免疫系统异常激活的不断加剧与艾滋病疾病进程密切相关。

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞周期及凋亡的影响

目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素 (quercetin)对Eca 10 9细胞周期及凋亡的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组在同等条件下继续培养 4 8h。采用流式细胞仪检测细胞的周期 ,采用TUNEL法检测细胞凋亡百分率 ,采用DNA琼脂糖凝胶电泳法观察细胞DNA降解情况。结果 :2实验组细胞中G2 M期细胞比例较对照组显著上升 (P <0 .0 1)。细胞凋亡百分率 :2实验组显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;Br组和Q组相比 ,差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。DNA琼脂糖凝胶电泳中Br组和Q组皆呈DNA“梯样型”带 ,对照组未呈现DNA降解。结论 :8 Br cAMP和槲皮素皆可阻滞Eca 10 9细胞于G2 M期 ,并进一步诱导Eca 10 9细胞凋亡。

脑脉通联合骨髓干细胞动员对脑缺血大鼠神经细胞凋亡相关蛋白Fas、FasL及caspase-3表达的影响

目的:观察脑脉通联合骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)动员对脑缺血大鼠神经细胞凋亡和凋亡相关蛋白Fas、FasL及半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)表达的影响。方法:202只SD大鼠分为假手术组、模型组、人重组粒细胞集落刺激因子(recombinant granulocyte colonystimulatingfactor,rG-CSF)组、脑脉通组和脑脉通联合rG-CSF组(联合组)。采用改良线栓法阻塞大鼠大脑中动脉制各局灶性脑缺血动物模型。rG-CSF组和联合组大鼠分别于术前3 d和术后2 d皮下注射10μg/(kg·d)rG-CSF,脑脉通组和联合组灌胃脑脉通。术后早期(2 d和3 d)和后期(7 d和14 d)观察大鼠神经功能变化;腹主动脉取血,流式细胞仪测定外周血CD34阳性细胞数量;原位末端标记法观察神经细胞凋亡情况;免疫组织化学法检测脑组织CD34、caspase-3、Fas和FasL蛋白表达情况。结果:模型组大鼠外周血和脑组织CD34阳性细胞增加,分别于3 d和7 d时达到峰值;各治疗组尤其联合组脑组织CD34表达增强明显。各模型组大鼠神经功能评分降低,rG-CSF组7 d和14 d时的神经功能评分增加,联合组较rG-CSF组的变化显著。模型组脑组织2、3和7 d时的Fas、FasL及caspase-3蛋白表达增强;rG-CSF组2 d时FasL,各联合组Fas、FasL及caspase-3表达均减弱;联合组7 d和14 d时的Fas、FasL及caspase-3表达较rG-CSF组减弱;各实验组14 d时Fas、FasL及caspase-3表达较3 d时减弱。结论:脑脉通和BMSC动员在改善大鼠脑缺血中、后期神经功能和抑制细胞凋亡方面存在交互效应.其作用可能与脑脉通使BMSC动员后早期的Fas和FasL表达下调,以阻抑caspase-3引起的凋亡瀑布反应,进一步抑制促凋亡基因Fas和FasL的表达有关。

脑脉通对骨髓干细胞动员保护大鼠脑缺血损伤的影响

目的研究脑脉通对脑缺血大鼠骨髓干细胞动员(BMSCs)在血液和脑组织的变化及脑保护作用的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、脑脉通组、动员组、脑脉通+动员组,线栓法制备MCAO动物模型。皮下注射人重组粒细胞集落刺激因子(rG-CSF);脑脉通灌胃用药。检测大鼠外周血WBC及CD34+、脑组织CD34+变化;观察神经功能和脑组织病理改变;测定脑组织含水量和脑梗死面积。结果模型组大鼠外周血WBC(8.07±1.27)×109/L和CD34+细胞(3.17±0.75)个/μl增加,3d达到峰值,各治疗组增加更为明显;联合组2和3d外周血WBC、各时间点CD34+细胞均较动员组增加。各模型组大鼠脑组织CD34+表达增强,7d达到峰值(33.04±2.62)个/μl;各联合组较动员组增强明显。各模型组大鼠神经评分降低、脑含水量增加、脑梗死面积增大、脑组织病理损伤明显,以7d显著;动员组大鼠7和14d的上述指标改善;各联合组较动员组的改善明显。结论血液WBC数CD34+计数,脑组织、CD34+表达均显著显示,脑缺血可引起BMSCs进入外周血并向脑组织归巢,峰值时间存在差异;G-CSF可使BMSCs分布增加;脑脉通使动员后血液和脑组织BMSCs增多、脑组织峰值时间延长,且使其脑保护作用增强。

抗人CD80单链抗体的构建、表达及与抗原结合的特性分析

目的:构建及表达抗人CD80单链抗体(ScFv),并初步研究其生物学功能。方法:采用RT-PCR法从分泌鼠抗人CD80mAb的杂交瘤细胞株(4E5)中克隆VH和VL基因。用重叠延伸拼接PCR方法构建具有前导肽的L-VH-Linker-VL单链抗体基因,并亚克隆至pIRES2-EGFP表达载体,脂质体法转染中华仓鼠卵巢细胞(CHO),G418加压筛选。纯化抗CD80-ScFv,并分析其对膜型CD80的识别。竞争抑制实验分析抗CD80-ScFv与相应抗原的结合能力。MTT法体外分析抗CD80-ScFv对CD80介导的共刺激信号的阻断作用。结果:构建的抗CD80-ScFv基因全长为828 bp,经测序含有信号肽和连接肽。实验获得稳定表达细胞株SA-Ⅱ,其培养上清与L929-CD80细胞的阳性结合率达98%以上。抗体纯化后产率约为15.12 mg/L,其能够识别Raji和Daudi细胞天然表达的CD80分子,结合率分别为96.6%和95.0%。抗CD80-ScFv对鼠源亲本抗体4E5与抗原结合的竞争抑制率达98.67%,并能阻断CD80介导的共刺激信号转导,抑制PBMC的增殖,增殖率下降43.48%。结论:成功建立了抗CD80-ScFv CHO细胞的表达株(命名为SA-Ⅱ),该抗体能够特异识别细胞表面膜型CD80分子并介导相应的生物学功能。

临床输血病人ABO以外的血型抗体

输血前针对ABO以外血型进行化验是保证输血安全的重要措施。ABO以外血型不规则抗体也是引发血型鉴定障碍、输血配型难、输血出现不良反应、新生儿溶血病等重要原因之一。进行输血时，应对受血者血浆及血清做好常规抗体筛选，如出现不规则抗体，应及时指导输血，保障受血者健康。本文旨在分析ABO以外血型抗体。

RhD阴性血型抗原分析应用于临床输血的安全性

Rh血型是目前临床上除ABO血型之外常用的输血血型]，对于指导临床上输血和进一步提高新生儿溶血病的实验室诊断及维护母婴健康，都具有非常重要的临床作用。调查显示，Rh阳性血型在中国大多数人群中高达99％以上，而Rh阴性血型相对罕见。因此建立一个相对稳定的Rh阴性血型库具有非常重要的临床意义。本研究旨在探讨RhD阴性血型抗原分析应用于临床输血的安全性。

310例接受拉米夫定治疗的慢性乙型肝炎患者HBV RT区全长测序及结果分析

目的对接受拉米夫定(LAM)治疗慢性乙型肝炎(CHB)患者HBV P基因RT区全长测序并分析结果。方法选择接受拉米夫定治疗6个月以上的慢性乙型肝炎患者310例,收集LAM治疗后患者的血清,采用直接PCR产物基因测序法对HBV RT区碱基进行测序,后对测序数据用Chromas 223软件进行分析,找出HBV P基因RT区基因的变异位点和相应的氨基酸,进一步分析HBV耐药突变模式。结果 1)310例患者出现位点变异的有135例(43.5%),变异位点24个;2)基础变异位点和频率:rtM204 v/I 111例(82.20%),rtS213T 8例(5.92%),rtC256S 4例(2.96%),3位点差异有统计学意义(P<0.05);3)变异模式和频率:rtM204I 39例(28.89%),rtM204V+rtL108M 25例(18.51%),rtM204V+rt204I+rtL180M 11例(8.15%),rtM204I+rtL180M 6例(4.44%),rtM204V+rtL180M+rtV173L/M 5例(3.70%),rtS213T 5例(3.70%),rtM204V+rtL180M+rtV207M/L/I 4例(2.96%),rtM204V 4例(2.96%)等;4)rtM204V还可伴随rtT184 I/S/M、rtA181T、rtC256S、rtS213T、rtL229V等位点变异。结论拉米夫定长期治疗可引起主要耐药位点rtM204 v/I突变,并常有rtL180M、rtV173L、rtS213T、rtC256S、rtV207M/L等一系列补偿性耐药位点伴随;单位点突变除rtM204I一种外,还存在rtS213T、rtM204V等突变模式;联合突变模式多数包含rtM204位点,但也存在rtS213T+rtL187I、rtC256S+rtF221Y等突变模式。

HIV/AIDS患者外周血Th9细胞及其转录因子PU.1与病程关系的分析

目的研究HIV/AIDS患者外周血Th9细胞及其转录因子PU.1的表达量,探讨其与艾滋病疾病进展的相关性。方法40例HIV/AIDS患者根据CD4^+T淋巴细胞分为A、B 2组(A组CD4^+T淋巴细胞<350,B组CD4^+T淋巴细胞>350),同时,选取20例健康人为对照组,采用流式细胞技术及RT-PCR技术检测其外周血CD4^+T淋巴细胞亚群(Th1、Th2、Th9)及其相关转录因子(T-bet、GATA3、PU.1)的表达量,通过比较3组间Th9细胞及其转录因子PU.1表达量的差异,分析Th9细胞及其转录因子与艾滋病疾病进展的相关性。结果与健康人群相比,HIV/AIDS患者CD4^+T细胞绝对计数与百分比明显降低,CD8^+T细胞的绝对计数与百分比明显升高;3组组间比较显示,Th1细胞百分比A组(6.71±3.05)和B组(5.82±2.52)低于健康对照组(10.89±6.82)差异有统计学意义(P<0.05);Th2细胞百分比3组间差异无统计学意义;Th9细胞百分比A组(2.0±0.69)、B组(0.66±0.23)和健康对照组(0.40±0.16)之间差异有统计学意义(P<0.05);转录因子PU.1相对表达量A组(3.30±0.78)和B组(1.59±0.44)之间差异有统计学意义(P<0.05)。Th9细胞及其转录因子PU.1相对表达量与CD4^+T细胞成负相关(r=-0.637,r=-0.746,P=0.000)。结论 HIV/AIDS患者外周血Th9细胞及其转录因子PU.1的表达量随着疾病进展逐渐升高,两者与艾滋病疾病进展密切相关,可作为判断疾病进展的指标。

氟喹诺酮类药物体外诱导大肠埃希菌耐药性观察

目的:探讨大肠埃希菌在氟喹诺酮类最低抑菌浓度(MIC)下耐药性的产生,以指导临床合理使用抗生素。方法:采用多步诱导法,对32株临床分离的氟喹诺酮类敏感大肠埃希菌分别进行环丙沙星、左氧氟沙星和加替沙星的诱导性耐药试验;用琼脂稀释法测定诱导前后敏感菌株的药物敏感性;用PCR方法测定耐药基因序列。结果:22株大肠埃希菌诱导出稳定的高耐氟喹诺酮菌株;与原株比较,耐药株的MIC分别增加了32～3000倍;进行测序的6株诱导耐药菌株均发生gyrA的83Ser→Leu、87Asp→Asn和parC的80Ser→Ile突变,而测序的1株敏感菌株未发现基因突变。结论:在低浓度抗菌药物的长期压力下,可诱导大肠埃希菌产生对氟喹诺酮类的获得性耐药。

子痫前期患者脐血和胎盘组织中IGF-Ⅱ检测的临床意义

目的:探讨IGF-Ⅱ在子痫前期发病机制中的作用。方法:用免疫组织化学方法检测正常晚孕组和轻度、重度子痫前期患者胎盘组织中IGF-Ⅱ的表达,同时用ELISA方法检测3组研究对象胎儿脐血中IGF-Ⅱ的含量。结果:IGF-Ⅱ在脐血中的含量,重度子痫前期组显著高于轻度子痫前期组(P<0.001),轻度子痫前期组显著高于正常晚孕组(P<0.01);IGF-Ⅱ在胎盘组织中的表达,重度子痫前期组显著低于轻度子痫前期组(P<0.01),轻度子痫前期组显著低于正常晚孕组(P<0.01)。结论:子痫前期时脐血IGF-Ⅱ含量升高可能是子痫前期病理变化的结果,而胎盘组织中IGF-Ⅱ表达减少可能是引发子痫前期的重要因素之一。

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞内游离钙离子浓度的影响

目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素对人食管癌Eca 10 9细胞内游离钙离子浓度 ([Ca2 + ]i)的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h ,用激光共聚焦显微镜观察 3组细胞内钙离子的荧光强度。结果 :对照组细胞内游离钙离子荧光强度为 5 9.2± 8.1,Br组细胞内游离钙离子荧光强度为6 3.3± 8.5 ,与对照组比较差异无统计学意义 (P >0 .0 5 ) ;Q组细胞内游离钙离子荧光强度为 113.3± 12 .5 ,与对照组相比差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论

8-Br-cAMP和槲皮素对Eca-109细胞iNOS基因拷贝及Caspase-3表达的影响

目的 :观察 8 Br cAMP和槲皮素对Eca 10 9细胞iNOS基因拷贝及Caspase 3表达的影响。方法 :将贴壁培养的Eca 10 9细胞随机分成 3组 ,Br组 :加 8 Br cAMP至终浓度为 2× 10 5mol/L ;Q组 :加槲皮素至终浓度为 4 3μmol/L ;C组 :不加任何药物 ,只加入新培养液培养。 3组细胞同时培养 4 8h。采用原位斑点印迹法显示iNOS基因拷贝和mRNA的表达 ,采用细胞免疫化学技术显示Caspase 3的表达。结果 :Br和Q组较C组iNOS基因拷贝和mRNA表达信号较强。Br和Q组细胞内Caspase 3免疫反应 (IR)性较强 ,Br和Q组与对照组相比 ,存在显著性差异 (P 0 .0 1) ;Br组的Caspase 3 IR强于槲皮素组 (P <0 .0 1)。结论 :8 Br cAMP和槲皮素皆可上调iNOS基因的扩增和表达 ,最终可都通过上调Caspase 3的表达 ,诱导Eca 10 9细胞凋亡。

异种抗磷脂抗体皮下注射致妊娠丢失大鼠模型的改良

目的:制备异种抗磷脂抗体皮下注射致妊娠丢失大鼠模型的改良方法。方法:将80只10周龄SD孕鼠随机分为A～H组共8组(每组各10只),分别于孕8d、孕12d背部多部位皮下注射25、50、75、100mg/(kg·d)抗心磷脂抗体(ACA,A、B、C、D组)或狼疮抗凝物(LA,E、F、G、H组)蛋白液,以注射健康人血清[75mg/(kg·d)]的SD孕鼠作为空白对照(10只),至孕15d处死后取材,计算各组孕鼠胚胎吸收率、胚胎质量,酶标仪测各组血清ACA的相对含量,以部分凝血酶原时间(APTT)来判定LA的活性。结果:造模后,孕鼠血清ACA、APTT、胚胎吸收率明显增加(P<0.05);胚胎质量明显降低(P<0.05);胎盘切片镜下见胎盘免疫复合物沉积、组织变性坏死、炎性细胞浸润、血管内纤维素凝结及淤血等病理现象;且均与抗体蛋白液剂量呈正相关,其中以注射75mg/(kg·d)ACA蛋白液或LA蛋白液造模最稳定。结论:LA可作为复制本动物模型所需免疫抗体来源之一;75mg/(kg·d)ACA蛋白液或LA蛋白液为本模型所需免疫抗体的稳定有效量;改良后动物模型符合抗磷脂抗体致妊娠丢失患者的生化、产科特点及病理变化。

木香调经胶囊对肝郁型大鼠卵巢局部细胞因子表达及卵巢、子宫组织形态学的影响

目的:观察木香调经胶囊对肝郁型大鼠卵巢局部细胞因子表达及卵巢、子宫组织形态学的影响。方法:采用文献方法制备肝郁型大鼠模型。将60只Wistar雌性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、舒肝颗粒组、木香调经胶囊高剂量组、木香调经胶囊低剂量组、血府逐瘀胶囊组6组,每组10只;采用放免射免疫法测定血清血雌二醇(E2)、睾酮(T)、白细胞介素6(IL-6)及血浆β内啡肽(β-EP)的变化,免疫组化法检测卵巢组织肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平并分析各组因子之间的关系。结果:木香调经胶囊可明显降低肝郁型大鼠T、IL-6、β-EP水平,并下调卵巢组织TNF-α的表达。结论:木香调经胶囊通过调整内分泌及影响卵巢局部细胞因子的表达,可改善其局部炎症反应,调节机体免疫功能;干预并可能纠正异常的卵巢、子宫组织形态达到调经目的。

新生儿高胆红素血症心肌肌钙蛋白T的变化

目的:探讨新生儿高胆红素血症时心肌肌钙蛋白T(cTnT)的变化及其临床意义。方法:采用化学免疫系统和全自动生化分析仪,对38例高胆红素血症患儿血清cTnT及IBIL进行检测,同时选20例生理性黄疸新生儿作为对照。结果:各组新生儿血清中cTnT水平:重度高胆红素血症组显著高于轻度组(P<0·01)和对照组(P<0·01),轻度组与对照组无显著性差异(P>0·05)。结论:新生儿高胆红素血症可以引起心肌的损害,血清cTnT水平升高程度与IBIL成正相关。cTnT的检测可以为临床治疗提供实验依据。

Th22细胞及其关键转录因子在HIV/AIDS患者外周血中的表达及与病程进展的关系

目的分析HIV感染者或AIDS患者（HIV/AIDS）外周血单个核细胞（PBMC）中Th22细胞的含量及其关键转录因子芳香烃受体（Ah R）的表达量,探讨Th22细胞在HIV/AIDS疾病发生发展中的作用。方法筛选2014年3月至10月期间河南中医学院第一附属医院艾滋病研究中心经HIV抗体确证实验阳性者60例,根据CD4＋T细胞数将HIV/AIDS患者分为A（CD4〈200 cell/μl）、B（200≤CD4≤500 cell/μl）、C（CD4〉500 cell/μl）3组,同时选取体检中心健康人20例作为健康对照组,采用流式细胞术（FCM）检测外周血CD4＋T细胞数以及Th22细胞（CD4＋IL22＋）的百分比。RT-PCR技术检测其外周血单个核细胞（PBMC）中转录因子AhRmRNA的相对表达量。结果 A组Th22细胞比率大于其他3组（P〈0.05）;B组和C组Th22细胞比率均高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;B组和C组Th22细胞比较无统计学意义（P〉0.05）;A、B、C 3组转录因子AhRmRNA相对表达量均明显高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 HIV/AIDS患者PBMC中高表达Th22细胞及其转录因子AhRmRNA,提示Th22细胞很可能与HIV/AIDS疾病发生发展关系密切。

8-Br-cAMP对Hela细胞wtp53,mtp53,c-myc和iNOS基因表达的影响

目的 :探讨 8 Br cAMP对Hela细胞癌基因和抑癌基因等表达的影响。方法 :将培养的Hela细胞分为 3组 :① 8 Br cAMP组 (Br组 ) :加至 8 Br cAMP终浓度为 2× 10 -5mol/L ;②阳性对照组 (60 Co组 ) :给予60 Co照射量 4Gy ,72 0s;③阴性对照组 (C组 ) :仅加含体积分数为 10 %胎牛血清的DMEM培养液。各组细胞均培养 4 8h后 ,将 1× 10 7ml-1细胞悬液滴加至预先处理过的硝酸纤维素膜和载玻片上。应用原位杂交和完整细胞原位斑点印迹技术分别检测 3组Hela细胞中野生型p5 3(wtp5 3)、突变型p5 3(mtp5 3)、c myc和iNOS基因的表达。结果 :8 Br cAMP组与阳性对照组相比 ,差异无统计学意义 ,P >0 .0 5 ;与阴性对照组相比 ,上调wtp5 3和iNOS基因的表达 ,同时下调mtp5 3和cmyc基因的表达 ,P <0 .0 1。结论 :结果提示 8 Br