应用四环素灌胃建立小鼠急性肝损伤模型的初步研究

目的:探索应用四环素灌胃建立小鼠急性肝损伤模型,并初步阐明其发生机制。方法:先以不同剂量四环素灌胃,18h后检测小鼠血清ALT、AST水平并进行光镜观察,探索导致明显急性肝损伤的相对合适剂量;再以相对合适剂量四环素灌胃,18、36、54、72h后分别检测小鼠血清ALT、SOD、MDA、GSH-PX、IL-18水平及肝细胞凋亡情况,并进行光镜、电镜观察,探索导致明显急性肝损伤的相对合适时间及可能机制。结果:10倍和15倍剂量时,小鼠血清ALT、AST明显升高,肝细胞出现明显病理改变;应用10倍剂量四环素灌胃18h后,小鼠血清ALT和IL-18水平明显升高,肝细胞广泛损伤,细胞超微结构显著变化,肝细胞凋亡程度严重。结论:应用10倍剂量四环素灌胃18h可成功造成小鼠急性肝损伤模型,其发生与IL-18水平升高和肝细胞凋亡密切相关。

异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤模型的研究

目的探索应用异烟肼灌胃建立小鼠急性肝损伤模型,并初步阐明其机制。方法昆明种小鼠50只,随机分为异烟肼正常剂量造模组(常量组)、2倍剂量造模组(2倍量组)、5倍剂量造模组(5倍量组)、8倍剂量造模组(8倍量组)和空白对照组,每组各10只。各造模组分别以90、180、450、720mg/kg剂量的异烟肼灌胃,18h后检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平并取肝组织进行光镜观察,探索导致明显急性肝损伤的相对合适剂量。另取昆明种小鼠90只,随机分为单纯造模组(40只)、干预造模组(40只)和空白对照组(10只),各造模组以相对合适剂量异烟肼灌胃,其中干预造模组于造模前以甘利欣75mg/kg体重连续灌胃5d,18、36、54、72h后分别检测血清ALT、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧物酶(GSH-Px)水平,并进行肝组织光镜和电镜观察,探索导致明显急性肝损伤的相对合适时间及可能机制。结果在探索相对合适剂量实验中,2倍量组小鼠血清ALT、AST分别为(101.6±6.3)和(108.1±14.9)U/L,明显高于空白对照组的(30.1±3.6)、(35.3±6.5)U/L和常量组的(52.8±5.3)、(53.9±8.9)U/L,差异均有统计学意义(均P<0.05),肝细胞出现广泛的脂肪变性和水肿,肝窦几乎消失;5倍量组小鼠死亡7只,8倍量组小鼠则全部死亡。在探索相对合适时间及发生机制实验中,应用2倍剂量异烟肼灌胃后18h,单纯造模组小鼠血清ALT、MDA水平明显高于空白对照组,SOD、GSH-Px水平明显低于空白对照组,肝细胞广泛损伤,细胞超微结构显著变化。结论应用2倍剂量(180mg/kg)异烟肼灌胃可成功建立小鼠急性肝损伤模型。异烟肼所致急性肝损伤可能与自由基脂质过氧化反应密切相关。

保肝解毒胶囊对雷公藤多甙片所致小鼠急性肝损伤保护作用的实验研究

目的 :运用新建雷公藤多甙致小鼠急性肝损伤模型 ,探讨保肝解毒胶囊对该模型肝损伤保护作用的效果和机理。方法 :连续 5d给小鼠灌服保肝解毒胶囊制剂 ,而后以雷公藤多甙片造小鼠急性肝损伤模型 ,检测小鼠血清谷丙转氨酶 (ALT)、谷草转氨酶 (AST)、还原型谷胱甘肽 (GSH -Px)、超氧化物歧化酶 (SOD) ,肝匀浆中过氧化物 (LPO)含量 ,并取肝组织作病理检查。结果 :保肝解毒胶囊可以对抗肝损伤 ,其疗效和剂量有关 ;保肝解毒胶囊保护肝细胞的机理与对抗脂质过氧化反应有关。结论

茵陈四苓散防治胆管结扎大鼠肝纤维化的实验研究

目的研究茵陈四苓散有效干预大鼠胆汁淤积性肝纤维化的作用机制。方法以胆管结扎的方法制备大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,造模1周后随机分为模型组和药物干预组,药物干预组经口灌胃分别给予茵陈四苓散和熊去氧胆酸,模型组给予等量生理盐水,用药4周后杀鼠取材进行观测。结果茵陈四苓散组小胆管增生较模型组明显减少,剩余肝细胞量较多;茵陈四苓散可明显降低肝组织羟脯氨酸含量;胆汁性肝纤维化程度评分结果显示,与模型组有显著差异;免疫组化检测结果显示,茵陈四苓散组胶原(Ⅳ型)和糖蛋白(FN)的表达明显减弱;图像分析结果显示,其阳性面积比也有明显差异。结论茵陈四苓散抑制胆管上皮细胞增殖,抑制增殖的胆管上皮细胞基底膜上细胞外基质的沉积,是其有效干预胆汁淤积性肝纤维化的重要机制之一。

荣肝化瘀解毒汤干预大鼠胆汁淤积性肝纤维化的实验研究

目的:研究养肝化瘀利湿法有效干预大鼠胆汁淤积性肝纤维化的作用机制。方法:胆管结扎的方法制备大鼠胆汁淤积性肝纤维化模型,造模一周后随机分为模型组和药物干预组,药物干预经口灌胃分别给予荣肝化瘀解毒汤和小柴胡汤,模型组给予等量生理盐水,用药4周后杀鼠取材,观测内容包括肝功能、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量,组织病理学、免疫组织化学观测IV型胶原(ColIV)、层粘蛋白(LM)和增殖性细胞核抗原(PCNA)。结果:(1)荣肝化瘀解毒汤显著改善胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝功能(P<0·05),降低肝组织Hyp含量(P<0·05);肝组织纤维化程度计分评定结果显示,荣肝化瘀解毒汤组肝组织纤维化程度显著减轻(P<0·05),而小柴胡汤组无显著性变化(P>0·05)。(2)模型组大鼠BECs增殖非常显著,肝实质细胞比例显著减少,其肝组织PCNA阳性BECs数显著增多(P<0·001),荣肝化瘀解毒汤组大鼠肝组织PCNA阳性BECs数显著减少(P<0·05),小柴胡汤组无显著性变化(P>0·05)。(3)模型组大鼠增生胆管周围的LM表达显著增加,肝窦壁ColⅣ表达未见明显变化,但强烈表达于增殖的BECs周围的基底膜上;图象分析显示荣肝化瘀解毒汤显著减少LM和ColIV的阳性表达(P<0·05)。结论:胆管上皮细胞增殖在胆管结扎大鼠胆汁淤积性肝纤维化形成中起重要作用,荣肝化瘀解毒汤抑制胆管上皮细胞增殖,抑制增殖的胆管上皮细胞基底膜上细胞外基质的沉积,是其有效干预胆汁淤积性肝纤维化的重要机制之一。

芦荟多糖对肝癌细胞及外周血单个核细胞作用的研究

目的:探讨芦荟多糖抑制肝癌细胞生长的作用机制。方法:采用四氮唑盐法(MTT)法检测不同浓度的芦荟多糖对体外培养的原发性肝癌细胞(PHCC)与自体外周血单个核细胞(PBMC)生长的影响。结果:芦荟多糖可不同程度地抑制肝癌细胞的生长,促进外周血单个核细胞的生长,并且呈浓度依赖性。结论:芦荟多糖可提高机体的免疫力以达到抑制肿瘤生长的作用,并在一定程度上可直接抑制体外肿瘤细胞的生长。

舒肝活血化痰方干预大鼠脂肪性肝炎的实验研究

目的:探讨舒肝活血化痰方干预大鼠高脂血症性脂肪性肝炎的疗效及作用机制。方法:采用高脂饮食复制高脂血症性脂肪性肝炎大鼠模型,用活血化痰利湿方治疗,以东宝肝泰为对照,观察其对模型大鼠血清肝功能、血脂、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量和细胞色素P4502El(CytochromeP4502El,CYP2E1)活性影响。结果:舒肝活血化痰方显著改善肝功能,降低血清TG、TC、及LDL-C的同时升高HDL-C含量,并有显著降低肝组织Hyp含量,抑制肝组织CYP2E1活性的作用。结论:舒肝活血化痰方可有效干预大鼠高脂血症性脂肪性肝炎,抑制肝组织CYP2E1的表达及与其密切相关的脂质过氧化是该方干预作用的主要机制之一。

胆总管结扎诱发大鼠肝外胆汁淤积的动态病理变化研究

目的:观察胆管结扎(BDL)诱发大鼠胆汁淤积形成过程中模型肝组织病理动态变化特点。方法:行胆总管三段结扎术复制大鼠肝外胆汁淤积模型;于大鼠胆总管结扎第3 d、7 d、14 d分别随机处死3只假手术组、5只模型组大鼠取材,21 d时处死剩余大鼠取材,观察肝组织病理学变化,肝组织纤维化程度。结果:与假手术组比较,模型组3 d时肝组织小叶周边以及汇管区见胆管上皮细胞增生,并伴有少量的单核炎性细胞浸润;7 d时胆管上皮细胞明显增生,可见少量肝细胞点状坏死。14 d时胆管上皮细胞增生范围扩大,有胶原纤维增生。21 d时增生的胆管上皮细胞形成小胆管,增生的小胆管和纤维母细胞、胶原纤维改建原有的肝小叶而形成假小叶。肝细胞与增生的胆小管相比明显减少,剩余的肝细胞形态结构尚正常。结论:BDL胆汁淤积大鼠模型主要病理改变有肝细胞减少、胆管上皮细胞增生、胶原增生和沉积,此动态病理变化程度在21 d内随造模时间延长而加重。

胆总管结扎诱发大鼠肝外胆汁瘀积的肝肾功能动态变化研究

目的:观察BDL诱发大鼠胆汁瘀积形成过程中模型肝、肾功能动态变化特点。方法:行胆总管三段结扎术复制大鼠肝外胆汁瘀积模型;于大鼠胆总管结扎第3天、1周、2周分别随机取模型组5只、假手术组3只大鼠处死取材,于3周处死剩余大鼠取材,观察大鼠一般状况和肝、肾功能。结果:与假手术组比较,模型组大鼠的体重都有不同程度的降低;肝重、脾重、肝指数、脾指数呈增高的动态变化;AlB含量在造模3d后即显著下降,随着造模时间的推移成梯级进行性降低;GLO、TP含量造模3d后先增高,并持续在一个水平,于第3周开始下降;TBil含量、GGT、ALP活性呈持续增高的动态变化,ALT活性,TBA、CHO含量在造模3d后即显著增高,此后有所下降,至3周末仍高于假手术组(P<0.01,P<0.05),AST在3d后即显著增高并维持至3周末。LDH活性在造模1w时显著增高,其后有所下降;BUN含量在造模后前2周无明显改变,至第3周有所增高,CRE含量无统计学意义。结论:BDL胆汁瘀积大鼠模型有显著的肝肾功能损害。

雷公藤多甙片致小鼠急性肝损伤的初步探讨

目的 :探讨雷公藤多甙片致急性肝损伤的作用及机理。方法 :以雷公藤多甙片按成人 10 ,2 0 ,3 0倍剂量给小鼠灌胃 ,探讨不同剂量致急性肝损伤的影响 ;再以 2 0倍剂量造成小鼠急性肝损伤 ,分别在 9,18,2 7,3 6h测小鼠血清丙氨酸基转移酶 (ALT) ,以探讨不同时间对急性肝损伤的影响 ;测定小鼠血清超氧化物歧化酶 (SOD)、还原型谷胱甘肽 (GSH Px)、肝匀浆LPO值 ,以探讨雷公藤多甙片致小鼠急性肝损伤的机理 ;并分别取肝组织作病理观察。结果 :在成人 2 0倍剂量时急性肝损伤明显 ,小鼠死亡少 ,在急性肝损伤后 18h取材肝损伤明显。结论 :雷公藤多甙片可致小鼠急性肝损伤 。

橄榄解酒饮对大、小鼠急性酒精性肝损伤模型自由基代谢的影响

目的 :观察橄榄解酒饮对大、小鼠急性酒精性肝损伤模型自由基代谢的影响。方法 :采用白酒灌胃法造模 ,第 5天检测血清及肝匀浆超氧化物歧化酶 (SOD)、脂质过氧化物 (LPO)水平。结果 :橄榄解酒饮可显著提高急性酒精性肝损伤大鼠血清SOD及大、小鼠肝匀浆SOD水平 ,显著降低大、小鼠肝匀浆LPO水平。结论 :橄榄解酒饮可通过清除自由基。

保肝解毒颗粒对雷公藤多苷所致急性肝损伤小鼠白介素18及细胞凋亡的影响

目的探讨药物性肝损伤的发病机理及保肝解毒颗粒的作用机制。方法60只小鼠随机分为6组,分别以相应剂量药物灌胃5天,再以雷公藤多苷灌胃造模,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、血清门冬氨酸氨基转移酶(AST)和白介素18(IL-18)水平及肝细胞凋亡情况。结果模型组IL-18明显升高,肝细胞凋亡严重;保肝解毒颗粒可有效降低ALT、AST和IL-18水平,并使肝细胞凋亡程度明显减轻。结论雷公藤多苷所致的急性肝损伤与IL-18和肝细胞凋亡密切相关;保肝解毒颗粒可通过降低-18水平、抑制肝细胞凋亡等起到防治肝脏损害的作用。

化痰泄浊方对脂肪肝模型大鼠胰岛素抵抗及瘦素的影响

目的:探讨化痰泄浊方对大鼠脂肪肝的作用。方法:将SD大鼠随机分为5组:正常对照组、模型组、东宝肝泰组、化痰泄浊方高剂量和低剂量组。用高脂饮食联合四环素腹腔注射法制作大鼠脂肪肝模型,观察大鼠肝脏组织的病理变化,并检测肝功能、血清瘦素、胰岛素抵抗指数,以及肝匀浆甘油三酯(triglyceride,TG)和游离脂肪酸(freefattyacid,FFA)的含量。结果:各用药组的血清瘦素、胰岛素抵抗指数及肝匀浆FFA、TG含量均显著低于模型组(P<0.01),且化痰泄浊方组的抗脂肪肝作用显著优于东宝肝泰组(P<0.05)。结论:化痰泄浊方治疗脂肪肝的作用机制主要为促进脂质代谢、改善胰岛素及瘦素抵抗。

保肝解毒颗粒对雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠自由基脂质过氧化反应的影响

目的探讨保肝解毒颗粒对雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠自由基脂质过氧化反应的影响。方法60只小鼠随机分为模型组、保肝解毒颗粒大、中、小剂量组、甘利欣对照组和空白对照组,分别以相应剂量药物灌胃5 d,再以雷公藤多苷灌胃造模,检测小鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。结果模型组血清SOD、GSH-Px水平明显降低,MDA水平明显升高;保肝解毒颗粒各剂量组均可有效降低血清ALT、AST和MDA水平,显著提高GSH-Px水平,大剂量组尚可显著提高血清SOD水平,与模型组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论保肝解毒颗粒具有明显的降酶保肝作用和抗自由基脂质过氧化作用。

橄榄解酒饮对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织病理形态的影响

目的 :观察橄榄解酒饮对大鼠急性酒精性肝损伤肝组织病理形态的影响。方法 :采用白酒灌胃法造模 ,给药 5d后取肝组织作常规HE染色 ,光镜观察。结果 :橄榄解酒饮组肝小叶结构清晰 ,肝窦基本恢复正常 ,肝细胞索排列整齐 ,肝细胞浊肿明显恢复 ,炎细胞浸润和点状坏死明显减少 ,肝细胞内仅见散在的细小脂滴 ,可见明显的肝细胞再生。结论 :橄榄解酒饮能明显减轻白酒所致的肝组织病理损伤 ,可促进肝细胞恢复。

橄榄解酒饮对大小鼠急性酒精性肝损伤的影响

为观察橄榄解酒饮 (主药 :橄榄、枳子 )对急性酒精性肝损伤的防治效果 ,采用白酒灌胃法造成大小鼠急性肝损伤的模型 ,0 5h后以橄榄解酒饮灌胃 ,记录醉酒率。第 3天检测血清ALT ,第 5天检测血清及肝匀浆ALT、AST ,并与护肝胶囊比较。结果 :橄榄解酒饮可显著降低大小鼠急性酒精性肝损伤模型醉酒率 ,提高醒 /醉比 ,显著降低血清ALT、AST及肝脏组织ALT水平 ,改善肝组织病理状态 ,促进肝细胞损伤恢复。提示橄榄解酒饮具有良好的防醉、解酒、护肝作用。

保肝解毒颗粒对雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠肝组织病理形态学的影响

目的:观察保肝解毒颗粒对雷公藤多苷致急性肝损伤小鼠肝组织病理形态学的影响。方法:60只小鼠随机分为6组,分别以相应剂量药物灌胃5天,再以雷公藤多苷灌胃造模,制备病理切片,光镜下观察,并对肝细胞变性情况进行半定量分析。结果:模型组肝细胞出现不同程度变性和凋亡细胞等病理改变,保肝解毒颗粒大、中剂量组脂肪变性较轻、肝窦稍有变窄。半定量分析结果表明,模型组肝细胞变性程度严重,与空白组比较有统计学差异(P<0.05);保肝解毒颗粒各剂量组肝细胞变性程度均有所改善,尤以大、中剂量组效果最佳,与模型组比较有统计学差异(P<0.05),与空白组比较则无统计学意义(P>0.05)。结论:保肝解毒颗粒具有良好的保肝作用。

橄榄解酒饮对急性酒精性肝损伤大鼠细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的观察橄榄解酒饮对大鼠急性酒精性肝损伤的干预效果,探讨其对肝细胞凋亡进程的调节作用。方法采用白酒灌胃造模法,每天连续两次灌胃白酒,每次间隔1h,连续5d后取肝组织切片,检测凋亡细胞指数和Bcl-2蛋白,并与护肝胶囊对照。结果橄榄解酒饮可显著降低凋亡指数、增加Bcl-2蛋白阳性表达,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论橄榄解酒饮通过抑制肝细胞凋亡而减轻肝组织损伤。

橄榄解酒机理新证

文献研究表明,橄榄具有良好的解酒功效,北宋《开宝本草》首载橄榄具有解酒功效,以后历代本草学著作对橄榄解酒均有记载。现代研究证实,橄榄及其复方制剂具有显著的解酒功效,并阐明了其解酒机理。