大黄素对TNF⁃α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响

目的探讨大黄素对TNF⁃α诱导的类风湿性关节炎成纤维样滑膜细胞增殖的影响。方法将人类风湿关节炎成纤维样滑膜HFLS⁃RA细胞随机分为对照组(未处理)、诱导组(TNF⁃α处理)、25μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)、50μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)和100μmol/L大黄素组(TNF⁃α和大黄素处理)。采用MTT法和克隆形成实验检测细胞的存活率和克隆形成率,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,RT⁃PCR检测凋亡相关基因Bcl⁃2和Bax mRNA的表达,ELISA检测细胞上清液中IL⁃6和IL⁃1β水平,Western blot检测细胞中NF⁃κB信号通路相关蛋白p⁃IκBα和p⁃NF⁃κB p65的表达。结果TNF⁃α能够使HFLS⁃RA细胞的存活率、克隆形成率、Bcl⁃2 mRNA的表达和p⁃IκBα、p⁃NF⁃κB p65蛋白的表达以及细胞上清液中IL⁃6和IL⁃1β水平升高(P<0.05),而细胞凋亡率和Bax mRNA表达降低(P<0.05);25、50、100μmol/L大黄素能够呈浓度依赖性抑制TNF⁃α引起的上述变化(P<0.05)。结论大黄素可能通过抑制NF⁃κB信号通路的活化抑制类风湿关节炎滑膜细胞增殖和炎症反应。